Papel predictivo de los nuevos biomarcadores para pacientes hipersensibles a la radiación en el cáncer de mama (Biorise) (BIORISE)

Los mecanismos moleculares involucrados en las respuestas inducidas por la radiación son complejos, y los enfoques proteómicos pueden usarse para comprender mejor el proceso de reacción general de la radiación ionizante e identificar posibles marcadores predictivos de radio radio. Hasta ahora, pocas publicaciones han abordado la determinación de pacientes radiosensibles.

En base a nuestros resultados anteriores y para mejorar el valor predictivo positivo del ensayo de efecto tardío inducido por radiación, desarrollamos un enfoque proteómico cuantitativo para identificar marcadores radiobiológicos predictivos en pacientes con toxicidad grave. Primero, cuatro pacientes fueron seleccionados con un valor RILA bajo de los estudios prospectivos mencionados anteriormente. Dos pacientes no tuvieron toxicidad al menos cuatro años después del final del tratamiento, mientras que otros dos pacientes desarrollaron una toxicidad grave mayor que el grado 2. Los linfocitos T se han aislado de sangre completa y la mitad de ellos se han irradiado in vitro. Luego realizará un flujo de trabajo de proteómica cuantitativa utilizando un etiquetado ITRAQ 8-PLEX y después de varios fraccionamientos para optimizar la resolución del análisis (fraccionamiento de gel seguido de cromatografía nanoliquida), las proteínas se identificaron mediante espectrometría de masa en tándem (4800 más MALDI TOF/TOF). Se identificaron más de 1300 proteínas totales con alta confianza (95%, un péptido único). A los 0 Gy, 135 proteínas se expresaron diferencialmente entre pacientes con o sin toxicidad grave inducida por radio. En los linfocitos T irradiados (8 Gy), 107 proteínas se expresaron diferencialmente entre pacientes con o sin toxicidad grave inducida por radio. Entre ellos, cinco proteínas (AK2, adenilato quinasa 2; IDH2, isocitrato deshidrogenasa 2 (NADP+); Anx1, anexina 1; APEX1, ADN-(Apurínica o sitio apirimidínico) Lyase y HSC70, Cogenio de calor de calor 71 KDA) con el rato de expresión de proteína más alta (> 1.5) y que no diabré el rato de expresión de la expresión de proteína) y eso no había diferenciado en el rato de expresión de noía) y que mostró ratio de expresión de noía más alta) y eso no había diferenciado en el rato de expresión de la proteína) y eso no había diferenciado en el rato de expresión de noía más alta). Los controles, fueron seleccionados para la validación consecutiva. Estas proteínas están involucradas en varios mecanismos, incluido el metabolismo y la producción de energía, la apoptosis, la proteína de unión de calcio y la reparación de daños por el ADN. Estas cinco proteínas son actualmente objeto de solicitud de patente.

Luego, otros 10 pacientes serán reclutados (5 pacientes con grados ≥ 2 fibrosis mamaria y 5 pacientes sin toxicidad) que presentaron un valor de RILA bajo para validar la expresión de proteínas mediante transferencia Western. Los resultados mostraron que todas las proteínas se sobreexpresaron en pacientes con linfocitos T irradiados con toxicidad severa comparativamente a los pacientes sin toxicidad.

Sin embargo, para confirmar el nivel de expresión de proteínas en los pacientes con efectos tardíos inducidos por la radiación y determinar el valor de rendimiento, en particular el valor predictivo positivo, de un análisis de sangre basado en la dosis de un panel de cinco proteínas, es necesario validar estos resultados preliminares mediante un estudio prospectivo en una gran cohorte de pacientes