Inmunoorientación selectiva de células T CD8 patógenas de pacientes con diabetes tipo 1

Para obtener la prueba de principio de nuestro enfoque, hemos iniciado una estrecha colaboración entre el Laboratorio de Inmunología del Instituto de Investigación MIGAL Galilee, Kiryat Shmona (MIGAL) y el Centro Breinin de Diabetes Tipo 1 y Endocrinología en el Centro Médico Ziv en Safed (Ziv) . En este estudio, primero identificaremos a los portadores del alelo HLA-A0201 entre pacientes pediátricos y adultos jóvenes con diabetes tipo 1 en Ziv. Luego, examinaremos el grupo de células T en las muestras de sangre periférica de estos pacientes en busca de células T CD8 reactivas contra cualquiera de los 3 péptidos de unión a HLA-A0201 conocidos asociados con autorreactividad en T1D: cadena beta de insulina 10-18, IGRP 265-73 y IGRP 222-230. El péptido MP 58-66 derivado del virus de la influenza servirá como referencia. A continuación, aislaremos las células T CD8 policlonales de muestras de sangre de los mismos pacientes, las activaremos y expandiremos ex vivo y las transfectaremos mediante electroporación con ARNm transcrito in vitro que codifica las respectivas construcciones de péptido/MHC/CD3-zeta. A continuación, realizaremos experimentos de cocultivo para evaluar la capacidad de las células T transfectadas con ARNm para eliminar las células T autorreactivas del mismo paciente de forma selectiva para los péptidos.