Eficacia de los suplementos DIM para aumentar la relación 2-OHE1/16 (EDIMI216OHE1)

El propósito de este estudio fue evaluar la efectividad de la suplementación con 3,3´-Diindolilmetano (DIM) para aumentar la proporción urinaria de los metabolitos de estrógeno 2OHE1:16alphaOHE1 (RMEU) en mujeres con riesgo de cáncer de mama para contribuir a generar una herramienta de prevención temprana de esta enfermedad.

Actividades para detectar mujeres con REMU menor a 0.9:

Consultar diariamente en el servicio de uroginecología del Instituto Nacional de Perinatología, las historias clínicas de las mujeres que acuden a las consultas con el fin de verificar los criterios de inclusión y exclusión.

Entrevistar a estas mujeres para corroborar los criterios de inclusión y exclusión. Cuantificar las concentraciones de metabolitos de estrógenos en orina para detectar la presencia de REMU inferior a 0,9.

Brindar resultado e invitar a mujeres que presenten REMU menor a 0.9 a participar del proyecto de suplementación con DIM.

Cuando las mujeres tuvieran un REMU igual o superior a 0,9, proporcionar orientación dietética y de resultados centrada en mantener el IMC en el rango normal (19,0-24,9) o disminución (IMC mayor o igual a 25) de peso y el aumento en el consumo de frutas y verduras.

Actividades para la inclusión de mujeres en el estudio de la suplementación con DIM:

Una vez explicado el estudio a las pacientes, se citaba a las mujeres que cumplían con los criterios de inclusión para que aportaran una carta de consentimiento informado en la que se les mencionaba que tenían la libertad de aclarar cualquier duda que pudiera surgir.

Una vez que la mujer leyó la carta, la entendió y accedió a participar, se solicitó la firma de la misma.

En la misma fecha que cada mujer ha firmado la carta, se programó otra cita entre el día 12 y 15 del ciclo menstrual para las siguientes valoraciones:

Datos personales: Nombre, fecha de nacimiento, domicilio, teléfono, estado civil y ocupación.

Socioeconómico: Con los criterios de la Asociación Mexicana de Agencias de Mercado y Opinión con base 2005

Historia clínica completa que incluía:

Los antecedentes familiares de enfermedades crónicas incluyeron cáncer de mama, antecedentes personales de enfermedades y uso de medicamentos, factores de riesgo personales de cáncer de mama, tipo, frecuencia y duración de la actividad física.

Nutrición: Considerando tanto indicadores antropométricos (peso, talla y perímetro de muñeca, cintura y cadera), composición corporal (% de grasa corporal y masa magra por el método de desplazamiento del aire) y dieta (recordatorio de 24 horas, frecuencia de consumo de crucíferas verduras en el último año y uso de suplementos). Las mediciones de los indicadores antropométricos se realizaron mediante la técnica LOHMAN. La información fue procesada con el sistema NUTRIKCAL que está estandarizado para alimentos de consumo común en México.

Primera orina de la mañana. Primera orina de la mañana con una diferencia no menor de ocho horas de la orina anterior.

Una vez recibidas las muestras de orina, se les adicionó, para su conservación, 0,1 g de ácido ascórbico por 10 mL de orina, y se almacenaron a -70°C hasta su cuantificación.

Para el análisis de los metabolitos 2OHE1 y 16αOHE1, se utilizó un método de inmunoensayo enzimático competitivo en fase sólida, utilizando el kit comercial ESTRAMET™ 2/16 (Immune Care Corporation, Bethlehem, MI. USA), que fue validado por el fabricante por cromatografía de gases y espectrometría de masas. El análisis se realizó de acuerdo con las instrucciones del fabricante; brevemente: la muestra de orina se hidrolizó con una actividad de enzima beta glucuronidasa y sulfatasa. Los metabolitos urinarios libres, unidos a anticuerpos monoclonales conjugados con fosfatasa alcalina. La cuantificación de los metabolitos 2OHE1 y 16αOHE1 se realizó por triplicado y nuestro equipo ya ha informado de la reproducibilidad de este método en un estudio. Para cada una de las determinaciones de la RMEU se tomaron curvas de referencia, lográndose un 97% de precisión.

Adherencia y efectos secundarios. En la primera valoración se entrega a las mujeres un calendario para registrar diariamente el consumo u omisión del suplemento (principio activo o placebo) así como una serie de efectos secundarios con el fin de evaluar la adherencia y seguridad del suplemento. Esto incluyó efectos secundarios que ya se habían informado en otros estudios con DIM e I3C. Además solicitó a los participantes la devolución del vial de suplementos para posteriormente realizar el conteo de pastillas que sobraron.

Tamaño de la muestra.

Para estimar el tamaño de la muestra se consideró lo siguiente:

Dos conjuntos de comparación (placebo y 75 mg DIM). De acuerdo a la literatura y esperando encontrar una diferencia de .48 en el promedio de RMEU del grupo de suplementación con respecto al grupo placebo.

Otros estudios han informado una desviación estándar de 0,77 en el RMEU. Calculado con un alfa de 0,05 y una potencia del 80%. Se requieren aproximadamente 31 mujeres por grupo más un 10% para reponer pérdidas en el seguimiento, lo que da un total aproximado de 35 mujeres por grupo.

Análisis estadístico. El análisis estadístico de los datos se realizó de la siguiente manera: las diferencias entre las características basales se realizó mediante la prueba T de Student para variables paramétricas con distribución normal, U Mann-Whitney para las que no tenían distribución normal y X2 para las no paramétricas. . El cambio de metabolitos de estrógenos y RMEU en cada grupo se evaluó mediante la prueba de Wilcoxon y la comparación del efecto entre grupos, los valores de concentraciones de los metabolitos de estrógenos y RMEU así como sus diferencias, se realizó mediante el prueba U Mann-Whitney.

Enmascaramiento. Un investigador desconocido para el estudio, recibió y codificó viales que contenían el suplemento DIM y el placebo, registrando el código en un papel que se guardaba en un sobre que se abría al final del estudio.