Eficácia dos suplementos DIM para aumentar a proporção 2-OHE1/16 (EDIMI216OHE1)

O objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia da suplementação com 3,3´-Diindolilmetano (DIM) para aumentar a proporção urinária de metabólitos de estrogênio 2OHE1:16alphaOHE1 (RMEU) em mulheres com risco de câncer de mama para contribuir para gerar uma ferramenta de prevenção precoce desta doença.

Atividades para detectar mulheres com REMU menor que 0,9:

Consultar diariamente no serviço de uroginecologia do Instituto Nacional de Perinatologia, os prontuários das mulheres que compareceram às consultas, a fim de verificar os critérios de inclusão e exclusão.

Entrevistar essas mulheres para corroborar os critérios de inclusão e exclusão. Quantificar as concentrações de metabólitos de estrógenos na urina para detectar a presença de REMU menor que 0,9.

Apresentar resultado e convidar as mulheres que apresentarem REMU menor que 0,9 a participar do projeto de suplementação com DIM.

Quando as mulheres tiveram REMU igual ou superior a 0,9, fornecer resultado e orientação dietética com foco na manutenção do IMC na faixa normal (19,0-24,9) ou diminuição (IMC maior ou igual a 25) de peso e o aumento do consumo de frutas e hortaliças.

Atividades para inclusão de mulheres no estudo da suplementação de DIM:

Uma vez explicado o estudo às pacientes, as mulheres que preencheram os critérios de inclusão foram citadas para fornecer uma carta de consentimento informado, mencionando que elas tinham a liberdade de esclarecer qualquer dúvida que pudesse surgir.

Uma vez que a mulher leu a carta, entendeu e concordou em participar, solicitou-se a assinatura da mesma.

Na mesma data em que cada mulher assinou a carta, foi agendada outra consulta entre o 12º e o 15º dia do ciclo menstrual para as seguintes avaliações:

Dados pessoais: Nome, data de nascimento, morada, telefone, estado civil e profissão.

Socioeconômico: Com os critérios da Associação Mexicana de Agências de Mercado e Opinião 2005

História clínica completa que incluiu:

A história familiar de doenças crônicas incluiu câncer de mama, história pessoal de doenças e uso de medicamentos, fatores de risco pessoais de câncer de mama, tipo, frequência e duração da atividade física.

Nutrição: Considerando os indicadores antropométricos (peso, altura e perímetro de punho, cintura e quadril), composição corporal (% de gordura corporal e massa magra pelo método de deslocamento de ar) e dieta (recordatório de 24 horas, frequência de consumo de crucíferos hortaliças no último ano e uso de suplementos). As medidas dos indicadores antropométricos foram feitas pela técnica de LOHMAN. A informação foi processada com o sistema NUTRIKCAL que é padronizado para alimentos comumente consumidos no México.

Primeira urina da manhã. Primeira urina da manhã com uma diferença não inferior a oito horas da urina anterior.

Uma vez recebidas as amostras de urina, adicionou-se, para conservação, 0,1 g de ácido ascórbico por 10 mL de urina, e armazenou-se a -70°C até sua quantificação.

Para a análise dos metabólitos 2OHE1 e 16αOHE1, foi utilizado o método de imunoensaio enzimático competitivo em fase sólida, utilizando o kit comercial ESTRAMET™ 2/16 (Immune Care Corporation, Bethlehem, MI. USA), que foi validado pelo fabricante por cromatografia gasosa e espectrometria de massa. A análise foi realizada de acordo com as instruções do fabricante; resumidamente: a amostra de urina foi hidrolisada com atividades de uma enzima beta glucuronidase e sulfatase. Os metabólitos urinários livres, unidos a anticorpos monoclonais conjugados com fosfatase alcalina. A quantificação dos metabólitos 2OHE1 e 16αOHE1 foi realizada em triplicata e a reprodutibilidade desse método já foi relatada por nossa equipe em estudo. Para cada uma das determinações do RMEU foram feitas curvas de referência, alcançando 97% de acerto.

Aderência e efeitos colaterais. Na primeira avaliação é dado às mulheres um calendário para registrar diariamente o consumo ou omissão do suplemento (composto ativo ou placebo), bem como uma série de efeitos colaterais, a fim de avaliar a adesão e segurança do suplemento. Isso incluiu efeitos colaterais já relatados em outros estudos com DIM e I3C. Além disso, solicitou que os participantes devolvessem o frasco de suplementos para posteriormente fazer a contagem dos comprimidos que sobraram.

Tamanho da amostra.

Para estimar o tamanho da amostra foi considerado o seguinte:

Dois conjuntos de comparação (Placebo e 75mg DIM). De acordo com a literatura e esperando encontrar uma diferença de 0,48 na média de RMEU do grupo de suplementação em relação ao grupo placebo.

Outros estudos relataram um desvio padrão de 0,77 no RMEU. Calculado com um alfa de 0,05 e uma potência de 80%. Aproximadamente 31 mulheres são necessárias por grupo mais 10% para repor as perdas no seguimento, o que dá um total aproximado de 35 mulheres por grupo.

Análise Estatística. A análise estatística dos dados foi realizada da seguinte forma: as diferenças entre as características basais foram realizadas usando o teste T de Student para variáveis ​​paramétricas com distribuição normal, U Mann-Whitney para aquelas que não tiveram distribuição normal e X2 para as não paramétricas . A variação dos metabólitos do estrogênio e do RMEU em cada grupo foi avaliada pelo teste de Wilcoxon e a comparação do efeito entre os grupos, dos valores das concentrações dos metabólitos do estrogênio e do RMEU, bem como suas diferenças, foi realizada por meio do teste U Mann-Whitney.

Mascaramento. Um estranho ao pesquisador do estudo, recebeu e codificou frascos contendo o suplemento DIM e placebo, registrando o código em um papel que foi guardado em um envelope que foi aberto ao final do estudo.