Identificación de autoantígenos en EGPA y asma eosinofílica severa (IDEA)

Los investigadores abordarán la pregunta de investigación con enfoques paralelos agnósticos y específicos.

En el enfoque agnóstico, se examinará mediante inmunofluorescencia indirecta la presencia de autoanticuerpos en el suero y el esputo del paciente contra eosinófilos inactivos y activados, con y sin modificación postraduccional.

En el enfoque dirigido, los investigadores examinarán mediante inmunoensayo ligado a enzimas (ELISA) la presencia/ausencia de anticuerpos contra eosinófilos candidatos preseleccionados y proteínas de membrana base, tanto en forma nativa como modificadas postraduccionalmente. Las proteínas a examinar se elegirán en función de la revisión de la literatura (p. peroxidasa de eosinófilos y colágeno V) y proteínas específicas de eosinófilos identificadas mediante el análisis del conjunto de genes FANTOM5 (anotación funcional del genoma de ratón/mamífero) (FANTOM Consortium et al. 2014).

Se examinarán muestras de sangre y esputo de pacientes altamente caracterizados con asma eosinofílica grave y/o EGPA dada la posibilidad de respuestas inmunitarias específicas del compartimento.

Una vez que se hayan identificado los autoantígenos candidatos en el grupo seleccionado de pacientes con asma eosinofílica grave y EGPA, los investigadores examinarán su prevalencia en muestras de suero de una selección más amplia de pacientes con enfermedades eosinofílicas de las vías respiratorias, incluido asma leve a moderada, asma grave asma eosinofílica, EGPA, poliposis nasal y enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC) eosinofílica, así como controles sanos. Se examinarán como covariables la duración de la enfermedad, la atopia, la presencia/ausencia de pólipos nasales, el sexo y la edad. Correlaciones con los recuentos de eosinófilos en sangre más altos, la necesidad de corticosteroides orales y la presencia de otros autoanticuerpos, p. se examinará anti-MPO (mieloperoxidasa) ANCA (anticuerpo anti-citoplasma de neutrófilo). En particular, los investigadores buscarán la presencia de nuevos autoanticuerpos en subgrupos de pacientes específicos: i) ANCA negativo, ii) ANCA positivo por inmunofluorescencia pero negativo para anticuerpos anti-MPO y anti-PR3 (proteinasa-3), iii) ANA (anti -anticuerpo nuclear) positivo pero ANCA y antígeno nuclear extraíble (ENA) negativos; ya que los pacientes en los tres grupos pueden tener nuevos autoanticuerpos, aún no determinados. Se realizarán análisis ROC (curva característica del operador del receptor) AUC (área bajo la curva) para determinar el valor predictivo de los autoanticuerpos sanguíneos para el diagnóstico de la enfermedad eosinofílica de las vías respiratorias.