Identifizierung von Autoantigenen bei EGPA und schwerem eosinophilem Asthma (IDEA)

Die Forscher werden sich der Forschungsfrage mit parallelen agnostischen und zielgerichteten Ansätzen nähern.

Beim agnostischen Ansatz wird das Vorhandensein von Autoantikörpern im Patientenserum und -sputum gegen inaktive und aktivierte Eosinophile mit und ohne posttranslationale Modifikation durch indirekte Immunfluoreszenz untersucht.

Bei dem zielgerichteten Ansatz werden die Forscher mittels enzymgebundenem Immunoassay (ELISA) das Vorhandensein/Fehlen von Antikörpern gegen vorselektierte Kandidaten-Eosinophilen- und Basismembranproteine ​​sowohl in nativer Form als auch in posttranslational modifizierter Form untersuchen. Die zu untersuchenden Proteine ​​werden basierend auf einer Literaturrecherche ausgewählt (z. Eosinophilen-Peroxidase und Kollagen V) und Eosinophilen-spezifische Proteine, die durch FANTOM5 (Functional Annotation of the Mouse/Mammalian Genome)-Genset-Analyse identifiziert wurden (FANTOM Consortium et al. 2014).

Sowohl Blut- als auch Sputumproben von hochgradig charakterisierten Patienten mit schwerem eosinophilem Asthma und/oder EGPA werden angesichts der Möglichkeit kompartimentspezifischer Immunantworten untersucht.

Sobald Kandidaten-Autoantigene in der ausgewählten Gruppe von Patienten mit schwerem eosinophilem Asthma und EGPA identifiziert wurden, werden die Forscher ihre Prävalenz in Serumproben einer größeren Auswahl von Patienten mit eosinophilen Atemwegserkrankungen, einschließlich leichtem bis mittelschwerem Asthma, untersuchen eosinophiles Asthma, EGPA, Nasenpolyposis und eosinophile chronisch obstruktive Lungenerkrankung (COPD) sowie gesunde Kontrollen. Krankheitsdauer, Atopie, Vorhandensein/Fehlen von Nasenpolypen, Geschlecht, Alter werden als Kovariaten untersucht. Korrelationen mit den höchsten Eosinophilenzahlen im Blut, dem Bedarf an oralen Kortikosteroiden und dem Vorhandensein anderer Autoantikörper, z. Anti-MPO (Myeloperoxidase) ANCA (anti-neutrophiler zytoplasmatischer Antikörper) wird untersucht. Insbesondere werden die Forscher nach dem Vorhandensein neuer Autoantikörper in bestimmten Patientenuntergruppen suchen: i) ANCA-negativ, ii) ANCA-positiv durch Immunfluoreszenz, aber negativ für Anti-MPO- und Anti-PR3 (Proteinase-3)-Antikörper, iii) ANA (anti -nukleärer Antikörper) positiv, aber ANCA und extrahierbares nukleäres Antigen (ENA) negativ; da Patienten in allen drei Gruppen neuartige, noch nicht bestimmte Autoantikörper haben können. ROC (Receiver Operator Characteristic Curve) AUC (Area Under Curve)-Analysen werden durchgeführt, um den prädiktiven Wert von Blutautoantikörpern für die Diagnose einer eosinophilen Atemwegserkrankung zu ermitteln.