Identificação de autoantígenos em EGPA e asma eosinofílica grave (IDEA)

Os investigadores abordarão a questão da pesquisa com abordagens paralelas agnósticas e direcionadas.

Na abordagem agnóstica, a presença de autoanticorpos no soro e escarro do paciente para eosinófilos inativos e ativados, com e sem modificação pós-traducional, será examinada por imunofluorescência indireta.

Na abordagem direcionada, os investigadores examinarão por imunoensaio ligado a enzima (ELISA) a presença/ausência de anticorpos para eosinófilos candidatos pré-selecionados e proteínas de membrana de base, tanto na forma nativa quanto modificadas pós-traducionalmente. As proteínas a serem examinadas serão escolhidas com base na revisão da literatura (por exemplo, peroxidase de eosinófilos e colágeno V) e proteínas específicas de eosinófilos identificadas por análise de conjunto de genes FANTOM5 (Anotação Funcional do Genoma de Camundongo/Mamífero) (FANTOM Consortium et al. 2014).

Amostras de sangue e escarro de pacientes altamente caracterizados com asma eosinofílica grave e/ou EGPA serão examinadas dada a possibilidade de respostas imunes específicas do compartimento.

Uma vez que os autoantígenos candidatos tenham sido identificados no grupo selecionado de pacientes com asma eosinofílica grave e EGPA, os investigadores examinarão sua prevalência em amostras de soro de uma seleção mais ampla de pacientes com doenças eosinofílicas das vias aéreas, incluindo asma leve a moderada, asma grave asma eosinofílica, GEPA, polipose nasal e doença pulmonar obstrutiva crônica (DPOC) eosinofílica, bem como controles saudáveis. Duração da doença, atopia, presença/ausência de pólipos nasais, sexo, idade serão examinados como co-variáveis. Correlações com contagens mais altas de eosinófilos no sangue, necessidade de corticosteróides orais e presença de outros autoanticorpos, por exemplo, anti-MPO (mieloperoxidase) ANCA (anti-anticorpo citoplasmático de neutrófilos), serão examinados. Em particular, os investigadores procurarão a presença de novos autoanticorpos em subconjuntos específicos de pacientes: i) ANCA negativo, ii) ANCA positivo por imunofluorescência, mas negativo para anticorpos anti-MPO e anti-PR3 (proteinase-3), iii) ANA (anti -anticorpo nuclear) positivo, mas ANCA e antígeno nuclear extraível (ENA) negativo; uma vez que os pacientes em todos os três grupos podem ter autoanticorpos novos, ainda não determinados. As análises ROC (curva característica do operador do receptor) AUC (área sob a curva) serão realizadas para determinar o valor preditivo dos autoanticorpos sanguíneos para o diagnóstico de doença eosinofílica das vias aéreas.