Identifikation af autoantigener i EGPA og svær eosinofil astma (IDEA)

Forskerne vil tilgå forskningsspørgsmålet med parallelle agnostiske og målrettede tilgange.

I den agnostiske tilgang vil tilstedeværelsen af ​​autoantistoffer i patientserum og sputum mod inaktive og aktiverede eosinofiler, med og uden post-translationel modifikation, blive undersøgt ved indirekte immunfluorescens.

I den målrettede tilgang vil efterforskerne undersøge tilstedeværelsen/fraværet af antistoffer ved hjælp af enzymbundet immunoassay (ELISA) mod forudvalgte eosinofile kandidat- og basemembranproteiner både i naturlig form og post-translationelt modificeret. Proteiner, der skal undersøges, vil blive valgt baseret på litteraturgennemgang (f.eks. eosinofil peroxidase og kollagen V) og eosinofil-specifikke proteiner identificeret af FANTOM5 (Functional Annotation of the Mouse/Mammalian Genome) genesetanalyse (FANTOM Consortium et al. 2014).

Både blod- og sputumprøver fra højt karakteriserede patienter med svær eosinofil astma og/eller EGPA vil blive undersøgt givet muligheden for kompartmentspecifikke immunresponser.

Når kandidat-autoantigener er blevet identificeret i den udvalgte gruppe af patienter med svær eosinofil astma og EGPA, vil efterforskerne undersøge deres forekomst i serumprøver fra et bredere udvalg af patienter med eosinofile luftvejssygdomme, herunder mild til moderat astma, svær eosinofil astma, EGPA, nasal polypose og eosinofil kronisk obstruktiv lungesygdom (KOL) samt raske kontroller. Sygdomslængde, atopi, tilstedeværelse/fravær næsepolypper, køn, alder vil blive undersøgt som kovariater. Korrelationer med højeste eosinofiltal i blodet, behov for orale kortikosteroider og tilstedeværelse af andre autoantistoffer, f.eks. anti-MPO (myeloperoxidase) ANCA (anti-neutrofilt cytoplasmatisk antistof), vil blive undersøgt. Især vil efterforskerne se efter tilstedeværelsen af ​​nye autoantistoffer i specifikke patientundergrupper: i) ANCA negativ, ii) ANCA positiv ved immunfluorescens, men negativ for anti-MPO og anti-PR3 (proteinase-3) antistoffer, iii) ANA (anti -nukleært antistof) positivt, men ANCA og ekstraherbart nukleart antigen (ENA) negativt; da patienter i alle tre grupper kan have nye, endnu ubestemte autoantistoffer. ROC (receiver operator characteristic curve) AUC-analyser (areal under kurve) vil blive udført for at fastslå den prædiktive værdi af blodautoantistoffer til diagnosticering af eosinofil luftvejssygdom.