Identifikasjon av autoantigener i EGPA og alvorlig eosinofil astma (IDEA)

Utforskerne vil tilnærme forskningsspørsmålet med parallelle agnostiske og målrettede tilnærminger.

I den agnostiske tilnærmingen vil tilstedeværelsen av autoantistoffer i pasientserum og sputum mot inaktive og aktiverte eosinofiler, med og uten posttranslasjonell modifikasjon, bli undersøkt ved indirekte immunfluorescens.

I den målrettede tilnærmingen vil etterforskerne undersøke ved enzymkoblet immunoassay (ELISA) tilstedeværelsen/fraværet av antistoffer mot forhåndsutvalgte eosinofil- og basemembranproteiner både i naturlig form og posttranslasjonelt modifisert. Proteiner som skal undersøkes vil bli valgt basert på litteraturgjennomgang (f. eosinofil peroksidase og kollagen V) og eosinofilspesifikke proteiner identifisert av FANTOM5 (Functional Annotation of the Mouse/Mammalian Genome) genesetanalyse (FANTOM Consortium et al. 2014).

Både blod- og sputumprøver fra høyt karakteriserte pasienter med alvorlig eosinofil astma og/eller EGPA vil bli undersøkt gitt mulighet for kompartmentspesifikke immunresponser.

Når kandidat-autoantigener har blitt identifisert i den utvalgte gruppen av pasienter med alvorlig eosinofil astma og EGPA, vil etterforskerne undersøke deres prevalens i serumprøver fra et bredere utvalg av pasienter med eosinofile luftveissykdommer, inkludert mild til moderat astma, alvorlig eosinofil astma, EGPA, nasal polypose og eosinofil kronisk obstruktiv lungesykdom (KOLS) samt friske kontroller. Sykdomslengde, atopi, tilstedeværelse/fravær nesepolypper, kjønn, alder vil bli undersøkt som kovariater. Korrelasjoner med høyeste eosinofiltall i blodet, behov for orale kortikosteroider og tilstedeværelse av andre autoantistoffer, f.eks. anti-MPO (myeloperoksidase) ANCA (anti-nøytrofilt cytoplasmatisk antistoff), vil bli undersøkt. Spesielt vil etterforskerne se etter tilstedeværelsen av nye autoantistoffer i spesifikke pasientundergrupper: i) ANCA negativ, ii) ANCA positiv ved immunfluorescens, men negativ for anti-MPO og anti-PR3 (proteinase-3) antistoffer, iii) ANA (anti -nukleært antistoff) positivt, men ANCA og ekstraherbart nukleært antigen (ENA) negativt; siden pasienter i alle tre gruppene kan ha nye, ennå ikke bestemte autoantistoffer. ROC (receiver operator characteristic curve) AUC (areal under kurve)-analyser vil bli utført for å fastslå den prediktive verdien av blodautoantistoffer for diagnostisering av eosinofil luftveissykdom.