Impacto del tratamiento ionizante en la estructura nuclear de los espermatozoides humanos.
El cáncer diferenciado de tiroides es la tercera causa de cáncer en hombres jóvenes en edad fértil. Su tratamiento mediante irradiación con terapia de yodo radiactivo 131 (RAT) podría alterar la espermatogénesis y provocar azoospermia e infertilidad permanente. Se recomendó una criopreservación preventiva de gametos antes de RAT, pero sin mencionar un período de riesgo teratogénico transmisible a la descendencia. Hasta la fecha, el impacto de RAT en el núcleo del esperma humano es poco o incluso desconocido, especialmente en la longitud de los telómeros.
Nuestro objetivo es definir los efectos RAT en el núcleo del esperma humano mediante la exposición a la irradiación in vitro de los espermatozoides humanos para imitar la de las gónadas en el contexto de la irradiación con yodo131 utilizado para el cáncer de tiroides. Analizaremos los parámetros espermáticos estándar, las principales alteraciones del ADN y la longitud de los telómeros mediante ensayos moleculares y celulares. La morfología del núcleo y la organización de la cromatina también se analizarán utilizando imágenes biológicas en 3D. Este estudio permitirá optimizar las indicaciones para la preservación de la fertilidad.
Descripción general del estudio
Estado
Condiciones
Intervención / Tratamiento
Descripción detallada
Nuestro objetivo principal es medir el impacto in vitro del tratamiento de irradiación en la calidad nuclear del esperma, como la fragmentación y oxidación del ADN, la condensación y organización de la cromatina, la morfología del núcleo y, en particular, la longitud de los telómeros espermáticos (STL).
Los objetivos secundarios son:
- para medir el impacto de RAT en los parámetros del esperma (vitalidad, motilidad y morfología)
- para medir el impacto de la crioconservación en la organización de la cromatina y la morfología del núcleo
- evaluar el impacto de RAT en espermatozoides humanos en comparación con la criopreservación
- evaluar el impacto de diferentes dosis y tipos de irradiación en los espermatozoides humanos
- establecer relaciones entre alteraciones potenciales de parámetros espermáticos estándar (vitalidad, motilidad y morfología) y parámetros espermáticos nucleares (fragmentación y oxidación del ADN, condensación y organización de la cromatina, morfología del núcleo y STL.
Nuestro objetivo final es proporcionar una mejora significativa del diagnóstico de fertilidad masculina y optimizar nuestras prácticas de preservación de la fertilidad.
Con este fin, expondremos espermatozoides humanos eyaculados (n = 90) a diferentes dosis (bajas y moderadas) de fotones gamma o X para imitar la irradiación de las gónadas. Las dosis absorbidas por las muestras se calcularon utilizando la plataforma GATE Monte Carlo (versión 8.2). La configuración de la geometría del experimento se modeló como volúmenes voxelizados tridimensionales dentro del software al asignar una forma, tamaño, distancia y densidad para todos los volúmenes creados. Todas las mediciones se realizarán en muestras sobrantes de hombres sometidos a análisis de semen de rutina en el Centro de Medicina Reproductiva, después de recibir su consentimiento informado por escrito. Las muestras de semen se recolectan y se subdividen en 3 brazos para analizar la calidad del esperma después de:
- exposición a la radiación (3 condiciones);
- un ciclo de congelación-descongelación;
- estado fresco: control negativo sin tratamiento.
Antes (estado fresco) y después de cada tratamiento analizaremos:
- parámetros seminales estándar (vitalidad, motilidad y morfología) de acuerdo con la OMS, 2010;
- STL utilizando Flow FISH, q-PCR y q-FISH;
- condensación de cromatina (cromomicina A3);
- oxidación del ADN (residuos 8-OHdG);
- fragmentación de ADN (TUNEL);
- Estructura del núcleo en 3D mediante bioimagen en 3D.
Tipo de estudio
Inscripción (Anticipado)
Contactos y Ubicaciones
Ubicaciones de estudio
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Clermont-Ferrand, Francia, 63000
- Reclutamiento
- CHU de Clermont-Ferrand
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Contacto:
- Lise Laclautre, PharmD
- Número de teléfono: 33 04 73 75 49 62
- Correo electrónico: promo_interne_drci@chu-clermontferrand.fr
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Investigador principal:
- Hanaé PONS-REJRAJI, PhD
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Sub-Investigador:
- Florence BRUGNON, MD, PhD
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Sub-Investigador:
- Cyril BOUCHE, PhD
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Sub-Investigador:
- Aurélie VEGA, PhD
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Sub-Investigador:
- Philippe VAGO, MD, PhD
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Sub-Investigador:
- Andreï TCHIRKOV, MD, PhD
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Sub-Investigador:
- Céline PEBREL-RICHARD, MD
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Sub-Investigador:
- Gaëlle SALAUN, MD, PhD
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Sub-Investigador:
- Lauren VERONESE, MD, PhD
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Sub-Investigador:
- Laetitia GOUAS, MD, PhD
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Sub-Investigador:
- Carole GOUMY, MD, PhD
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Criterios de participación
Criterio de elegibilidad
Edades elegibles para estudiar
Acepta Voluntarios Saludables
Géneros elegibles para el estudio
Método de muestreo
Población de estudio
Descripción
Criterios de inclusión:
- Hombre menor de 45 años
- Varón sometido a análisis de semen de rutina en el Centro de Medicina Reproductiva, que acepte el protocolo de investigación y firme el consentimiento asociado será incluido en el protocolo sin distinción de criterios físicos.
Criterio de exclusión:
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Plan de estudios
¿Cómo está diseñado el estudio?
Detalles de diseño
Cohortes e Intervenciones
Grupo / Cohorte |
Intervención / Tratamiento |
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brazo de control "fresco"
Semen fresco tratado sin irradiación antes de la criopreservación
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los espermatozoides se congelarán en medio crioprotector Cryosperm® (Origio).
Las muestras se envasarán en pajuelas de alta seguridad previamente identificadas (Criobiosistema).
La congelación lenta de las pajuelas se realizará mediante el dispositivo programable Nanodigicool® (Cryobiosystem).
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brazo de control "criopreservado"
semen criopreservado sin irradiación (n=60)
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los espermatozoides se congelarán en medio crioprotector Cryosperm® (Origio).
Las muestras se envasarán en pajuelas de alta seguridad previamente identificadas (Criobiosistema).
La congelación lenta de las pajuelas se realizará mediante el dispositivo programable Nanodigicool® (Cryobiosystem).
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irradiación aguda a dosis bajas
Exploración de la pelvis: irradiación aguda (1 o 2 segundos) utilizando dosis bajas (n = 30),
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La muestra de esperma se colocará en la mesa de procesamiento del escáner para exponerla durante 1 a 2 segundos.
Luego se harán varios niveles de dosis para limitar el valor de 17 mGy
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larga irradiación a baja dosis
Gammagrafía ósea: irradiación larga (3h) usando dosis bajas (n=30),
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La muestra de esperma se expondrá a la radiación gamma mediante la adición de una solución de Tc99m durante 3 horas.
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irradiación prolongada a dosis media
Terapia con yodo radiactivo 131 (RAT) aplicada para el cáncer de tiroides: irradiación larga (3 h) usando dosis media (n = 60),
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la muestra de esperma se expondrá a la radiación gamma mediante la adición de una solución de I131 durante 3 horas
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¿Qué mide el estudio?
Medidas de resultado primarias
Medida de resultado |
Medida Descripción |
Periodo de tiempo |
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Medir in vitro el impacto de un tratamiento de radiación ionizante sobre la calidad nuclear espermática y en particular el tamaño de los telómeros.
Periodo de tiempo: 01/01/2018-01/01/2022
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Para lograr este objetivo, expondremos el esperma humano a una dosis de irradiación de I131 para imitar la irradiación de las gónadas y el esperma. La reliquia de semen se crioconservará (condición de control). Después de la descongelación, la misma muestra se subdividirá en 2 grupos para analizar la calidad del esperma:
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01/01/2018-01/01/2022
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Medidas de resultado secundarias
Medida de resultado |
Medida Descripción |
Periodo de tiempo |
|---|---|---|
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Medir in vitro el impacto de una dosis de irradiación de I131 en la calidad nuclear del esperma, en particular en STL.
Periodo de tiempo: 01/01/2018-01/01/2022
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Todas las mediciones se realizan en muestras sobrantes de hombres sometidos a análisis de semen de rutina en el Centro de Medicina Reproductiva, después de recibir su consentimiento informado por escrito. Las muestras de semen se recolectarán y subdividirán en 3 brazos para analizar la calidad del esperma después de:
Antes (estado fresco) y después de cada tratamiento analizaremos:
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01/01/2018-01/01/2022
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para medir el impacto de RAT en los parámetros del esperma (vitalidad, motilidad y morfología)
Periodo de tiempo: 01/01/2018-01/01/2022
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Todas las mediciones se realizan en muestras sobrantes de hombres sometidos a análisis de semen de rutina en el Centro de Medicina Reproductiva, después de recibir su consentimiento informado por escrito. Las muestras de semen se recolectarán y subdividirán en 3 brazos para analizar la calidad del esperma después de:
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01/01/2018-01/01/2022
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Medir in vitro el impacto de la crioconservación en la calidad nuclear del esperma, en particular en STL, la organización de la cromatina y la morfología del núcleo.
Periodo de tiempo: 01/01/2018-01/01/2022
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Todas las mediciones se realizan en muestras sobrantes de hombres sometidos a análisis de semen de rutina en el Centro de Medicina Reproductiva, después de recibir su consentimiento informado por escrito. Las muestras de semen se recolectarán y subdividirán en 3 brazos para analizar la calidad del esperma después de:
Antes (estado fresco) y después de cada tratamiento analizaremos:
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01/01/2018-01/01/2022
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evaluar el impacto de RAT en espermatozoides humanos en comparación con la criopreservación
Periodo de tiempo: 01/01/2018-01/01/2022
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Compararemos los efectos inducidos por RAT y la crioconservación en cada muestra de esperma.
Para limitar el sesgo, para cada tratamiento de irradiación, se tratará una muestra de espermatozoides (control crioconservado) en condiciones idénticas.
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01/01/2018-01/01/2022
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evaluar el impacto de diferentes dosis y tipos de irradiación en los espermatozoides humanos
Periodo de tiempo: 01/01/2018-01/01/2022
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Todas las mediciones se realizan en muestras sobrantes de hombres sometidos a análisis de semen de rutina en el Centro de Medicina Reproductiva, después de recibir su consentimiento informado por escrito. Las muestras de semen se recolectarán y subdividirán en 3 brazos para analizar la calidad del esperma después de:
La exposición a la irradiación se realizará bajo 3 condiciones:
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01/01/2018-01/01/2022
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establecer relaciones entre alteraciones potenciales de parámetros espermáticos estándar (vitalidad, motilidad y morfología) y parámetros espermáticos nucleares (fragmentación y oxidación del ADN, condensación y organización de la cromatina, morfología del núcleo y STL.
Periodo de tiempo: 01/01/2018-01/01/2022
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Correlacionaremos los efectos inducidos por sobre la vitalidad, motilidad y morfología y parámetros nucleares espermáticos (fragmentación y oxidación del ADN, condensación y organización de la cromatina, morfología del núcleo y STL.
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01/01/2018-01/01/2022
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Colaboradores e Investigadores
Patrocinador
Colaboradores
Investigadores
- Silla de estudio: Hanae PONS-REJRAJI, PhD, CHU de Clermont-Ferrand
Fechas de registro del estudio
Fechas importantes del estudio
Inicio del estudio (ACTUAL)
Finalización primaria (ANTICIPADO)
Finalización del estudio (ANTICIPADO)
Fechas de registro del estudio
Enviado por primera vez
Primero enviado que cumplió con los criterios de control de calidad
Publicado por primera vez (ACTUAL)
Actualizaciones de registros de estudio
Última actualización publicada (ACTUAL)
Última actualización enviada que cumplió con los criterios de control de calidad
Última verificación
Más información
Términos relacionados con este estudio
Palabras clave
Otros números de identificación del estudio
- 2020 PONS-REJRAJI
Plan de datos de participantes individuales (IPD)
¿Planea compartir datos de participantes individuales (IPD)?
Información sobre medicamentos y dispositivos, documentos del estudio
Estudia un producto farmacéutico regulado por la FDA de EE. UU.
Estudia un producto de dispositivo regulado por la FDA de EE. UU.
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