Impacto do tratamento ionizante na estrutura nuclear de espermatozóides humanos.
O câncer diferenciado de tireoide é a terceira causa de câncer em homens jovens em idade reprodutiva. Seu tratamento por irradiação com terapia com iodo radioativo 131 (RAT) pode alterar a espermatogênese e resultar em azoospermia e infertilidade permanente. Uma criopreservação preventiva de gametas foi recomendada antes do RAT, mas sem mencionar um período de risco teratogênico transmissível à prole. Até o momento, o impacto do RAT no núcleo do esperma humano é pouco conhecido ou mesmo desconhecido, principalmente no comprimento dos telômeros.
Nosso objetivo é definir os efeitos do RAT no núcleo do esperma humano pela exposição à irradiação in vitro de espermatozóides humanos para mimetizar o das gônadas no contexto da irradiação com iodo131 usado para câncer de tireoide. Analisaremos parâmetros espermáticos padrão, principais alterações de DNA e comprimento dos telômeros usando ensaios moleculares e celulares. A morfologia do núcleo e a organização da cromatina também serão analisadas usando bioimagem 3D. Este estudo permitirá otimizar as indicações para a preservação da fertilidade.
Visão geral do estudo
Status
Condições
Descrição detalhada
Nosso principal objetivo é medir o impacto in vitro do tratamento de irradiação na qualidade nuclear do esperma, como fragmentação e oxidação do DNA, condensação e organização da cromatina, morfologia do núcleo e, principalmente, comprimento dos telômeros (STL).
Os objetivos secundários são:
- para medir o impacto do RAT nos parâmetros do esperma (vitalidade, motilidade e morfologia)
- para medir o impacto da criopreservação na organização da cromatina e na morfologia do núcleo
- avaliar o impacto do RAT em espermatozóides humanos em comparação com a criopreservação
- avaliar o impacto de diferentes doses e tipos de irradiação em espermatozóides humanos
- estabelecer relações entre potenciais alterações dos parâmetros padrões do esperma (vitalidade, motilidade e morfologia) e dos parâmetros nucleares do esperma (fragmentação e oxidação do ADN, condensação e organização da cromatina, morfologia do núcleo e STL).
Nosso objetivo final é fornecer uma melhoria significativa no diagnóstico de fertilidade masculina e otimizar nossas práticas de preservação da fertilidade.
Para tanto, iremos expor espermatozóides humanos ejaculados (n = 90) a diferentes doses (baixa e moderada) de fótons gama ou X para mimetizar a irradiação das gônadas. As doses absorvidas pelas amostras foram calculadas usando a plataforma GATE Monte Carlo (versão 8.2). As configurações de geometria do experimento foram modeladas como volumes voxelizados em três dimensões dentro do software, atribuindo uma forma, tamanho, distância e densidade para todos os volumes criados. Todas as medições serão feitas em amostras excedentes de homens submetidos à análise de sêmen de rotina no Centro de Medicina Reprodutiva, após receberem seu consentimento informado por escrito. As amostras de sêmen são coletadas e subdivididas em 3 braços para analisar a qualidade do esperma após:
- exposição à irradiação (3 condições);
- um ciclo de congelamento e descongelamento;
- estado fresco: controle negativo sem tratamento.
Antes (estado fresco) e após cada tratamento iremos analisar:
- parâmetros de sêmen padrão (vitalidade, motilidade e morfologia) de acordo com a OMS, 2010;
- STL usando Flow FISH, q-PCR e q-FISH;
- condensação da cromatina (cromomicina A3);
- oxidação do DNA (resíduos 8-OHdG);
- fragmentação de DNA (TUNEL);
- Estrutura do núcleo 3D usando bioimagem 3D.
Tipo de estudo
Inscrição (Antecipado)
Contactos e Locais
Contato de estudo
- Nome: Lise Laclautre, PharmD
- Número de telefone: 34 04 73 75 49 63
- E-mail: promo_interne_drci@chu-clermontferrand.fr
Locais de estudo
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Clermont-Ferrand, França, 63000
- Recrutamento
- CHU de Clermont-Ferrand
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Contato:
- Lise Laclautre, PharmD
- Número de telefone: 33 04 73 75 49 62
- E-mail: promo_interne_drci@chu-clermontferrand.fr
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Investigador principal:
- Hanaé PONS-REJRAJI, PhD
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Subinvestigador:
- Florence BRUGNON, MD, PhD
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Subinvestigador:
- Cyril BOUCHE, PhD
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Subinvestigador:
- Aurélie VEGA, PhD
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Subinvestigador:
- Philippe VAGO, MD, PhD
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Subinvestigador:
- Andreï TCHIRKOV, MD, PhD
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Subinvestigador:
- Céline PEBREL-RICHARD, MD
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Subinvestigador:
- Gaëlle SALAUN, MD, PhD
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Subinvestigador:
- Lauren VERONESE, MD, PhD
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Subinvestigador:
- Laetitia GOUAS, MD, PhD
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Subinvestigador:
- Carole GOUMY, MD, PhD
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Critérios de participação
Critérios de elegibilidade
Idades elegíveis para estudo
Aceita Voluntários Saudáveis
Gêneros Elegíveis para o Estudo
Método de amostragem
População do estudo
Descrição
Critério de inclusão:
- Homem menos de 45 anos
- O homem submetido à análise de sêmen de rotina no Centro de Medicina Reprodutiva, aceitando o protocolo de pesquisa e assinando o consentimento associado será incluído no protocolo sem distinção de critérios físicos.
Critério de exclusão:
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Plano de estudo
Como o estudo é projetado?
Detalhes do projeto
Coortes e Intervenções
Grupo / Coorte |
Intervenção / Tratamento |
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braço de controle "fresco"
Sêmen fresco tratado sem irradiação antes da criopreservação
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os espermatozoides serão congelados em meio crioprotetor Cryosperm® (Origio).
As amostras serão acondicionadas em palhetas de alta segurança (Cryobiosystem) previamente identificadas.
O congelamento lento das palhetas será realizado por meio do dispositivo programável Nanodigicool® (Cryobiosystem).
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braço de controle "criopreservado"
sêmen criopreservado sem irradiação (n=60)
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os espermatozoides serão congelados em meio crioprotetor Cryosperm® (Origio).
As amostras serão acondicionadas em palhetas de alta segurança (Cryobiosystem) previamente identificadas.
O congelamento lento das palhetas será realizado por meio do dispositivo programável Nanodigicool® (Cryobiosystem).
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irradiação aguda em dose baixa
Varredura da pelve: irradiação aguda (1 ou 2 segundos) usando baixa dose (n = 30),
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amostra de esperma será colocada na mesa de processamento do scanner para ser exposta por 1 a 2 segundos.
Vários níveis de dose serão então feitos para limitar o valor de 17 mGy
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irradiação longa em dose baixa
Cintilografia óssea: irradiação longa (3h) usando baixa dose (n=30),
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amostra de esperma será exposta à radiação gama adicionando uma solução de Tc99m por 3 horas.
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irradiação longa em dose média
Terapia com iodo radioativo 131 (RAT) aplicada ao câncer de tireoide: irradiação longa (3h) usando dose média (n=60),
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amostra de esperma será exposta à radiação gama adicionando uma solução de I131 por 3 horas
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O que o estudo está medindo?
Medidas de resultados primários
Medida de resultado |
Descrição da medida |
Prazo |
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Medir in vitro o impacto de um tratamento com radiação ionizante na qualidade nuclear do esperma e, em particular, no tamanho dos telômeros.
Prazo: 01/01/2018-01/01/2022
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Para atingir esse objetivo, vamos expor o esperma humano a uma dose de irradiação de I131 para imitar a irradiação de gônadas e espermatozoides. Relíquias de sêmen serão criopreservadas (condição controle). Após o descongelamento, a mesma amostra será subdividida em 2 grupos para análise da qualidade espermática:
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01/01/2018-01/01/2022
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Medidas de resultados secundários
Medida de resultado |
Descrição da medida |
Prazo |
|---|---|---|
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Medir in vitro o impacto de uma dose de irradiação de I131 na qualidade nuclear do esperma, principalmente no STL.
Prazo: 01/01/2018-01/01/2022
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Todas as medições são feitas em amostras excedentes de homens submetidos à análise de sêmen de rotina no Centro de Medicina Reprodutiva, após receberem seu consentimento informado por escrito. Amostras de sêmen serão coletadas e subdivididas em 3 braços para analisar a qualidade do esperma após:
Antes (estado fresco) e após cada tratamento iremos analisar:
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01/01/2018-01/01/2022
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para medir o impacto do RAT nos parâmetros do esperma (vitalidade, motilidade e morfologia)
Prazo: 01/01/2018-01/01/2022
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Todas as medições são feitas em amostras excedentes de homens submetidos à análise de sêmen de rotina no Centro de Medicina Reprodutiva, após receberem seu consentimento informado por escrito. Amostras de sêmen serão coletadas e subdivididas em 3 braços para analisar a qualidade do esperma após:
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01/01/2018-01/01/2022
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Medir in vitro o impacto da criopreservação na qualidade nuclear do esperma, nomeadamente no STL, na organização da cromatina e na morfologia do núcleo
Prazo: 01/01/2018-01/01/2022
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Todas as medições são feitas em amostras excedentes de homens submetidos à análise de sêmen de rotina no Centro de Medicina Reprodutiva, após receberem seu consentimento informado por escrito. Amostras de sêmen serão coletadas e subdivididas em 3 braços para analisar a qualidade do esperma após:
Antes (estado fresco) e após cada tratamento iremos analisar:
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01/01/2018-01/01/2022
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avaliar o impacto do RAT em espermatozóides humanos em comparação com a criopreservação
Prazo: 01/01/2018-01/01/2022
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Iremos comparar os efeitos induzidos por RAT e criopreservação em cada amostra de esperma.
Para limitar o viés, para cada tratamento de irradiação, uma amostra de espermatozoides (controle criopreservado) será tratada em condições idênticas.
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01/01/2018-01/01/2022
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avaliar o impacto de diferentes doses e tipos de irradiação em espermatozóides humanos
Prazo: 01/01/2018-01/01/2022
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Todas as medições são feitas em amostras excedentes de homens submetidos à análise de sêmen de rotina no Centro de Medicina Reprodutiva, após receberem seu consentimento informado por escrito. Amostras de sêmen serão coletadas e subdivididas em 3 braços para analisar a qualidade do esperma após:
A exposição à radiação será realizada sob 3 condições:
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01/01/2018-01/01/2022
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estabelecer relações entre potenciais alterações dos parâmetros padrões do esperma (vitalidade, motilidade e morfologia) e dos parâmetros nucleares do esperma (fragmentação e oxidação do ADN, condensação e organização da cromatina, morfologia do núcleo e STL).
Prazo: 01/01/2018-01/01/2022
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Iremos correlacionar os efeitos induzidos por na vitalidade, motilidade e morfologia e parâmetros nucleares do esperma (fragmentação e oxidação do DNA, condensação e organização da cromatina, morfologia do núcleo e STL.
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01/01/2018-01/01/2022
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Colaboradores e Investigadores
Patrocinador
Colaboradores
Investigadores
- Cadeira de estudo: Hanae PONS-REJRAJI, PhD, CHU de Clermont-Ferrand
Datas de registro do estudo
Datas Principais do Estudo
Início do estudo (REAL)
Conclusão Primária (ANTECIPADO)
Conclusão do estudo (ANTECIPADO)
Datas de inscrição no estudo
Enviado pela primeira vez
Enviado pela primeira vez que atendeu aos critérios de CQ
Primeira postagem (REAL)
Atualizações de registro de estudo
Última Atualização Postada (REAL)
Última atualização enviada que atendeu aos critérios de controle de qualidade
Última verificação
Mais Informações
Termos relacionados a este estudo
Palavras-chave
Outros números de identificação do estudo
- 2020 PONS-REJRAJI
Plano para dados de participantes individuais (IPD)
Planeja compartilhar dados de participantes individuais (IPD)?
Informações sobre medicamentos e dispositivos, documentos de estudo
Estuda um medicamento regulamentado pela FDA dos EUA
Estuda um produto de dispositivo regulamentado pela FDA dos EUA
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