Влияние ионизирующей обработки на ядерную структуру сперматозоидов человека.
Дифференцированный рак щитовидной железы является третьей причиной онкологических заболеваний у молодых мужчин детородного возраста. Его лечение облучением радиоактивным йодом 131 (RAT) может изменить сперматогенез и привести к азооспермии и необратимому бесплодию. Перед РАТ было рекомендовано профилактическое криоконсервирование гамет, но без упоминания о периоде тератогенного риска, передающегося потомству. На сегодняшний день влияние RAT на ядро спермы человека мало известно или даже неизвестно, особенно на длину теломер.
Наша цель состоит в том, чтобы определить влияние RAT на ядро спермы человека путем облучения in vitro сперматозоидов человека, имитирующего воздействие на гонады в контексте облучения йодом131, используемого для лечения рака щитовидной железы. Мы проанализируем стандартные параметры сперматозоидов, основные изменения ДНК и длину теломер с помощью молекулярного и клеточного анализа. Морфология ядра и организация хроматина также будут проанализированы с использованием 3D-биовизуализации. Данное исследование позволит оптимизировать показания к сохранению фертильности.
Обзор исследования
Статус
Условия
Подробное описание
Нашей основной целью является измерение воздействия облучения in vitro на качество ядра спермы, такое как фрагментация и окисление ДНК, конденсация и организация хроматина, морфология ядра и, в частности, длина теломер спермы (STL).
Второстепенными целями являются:
- для измерения влияния RAT на параметры сперматозоидов (жизнеспособность, подвижность и морфология)
- для измерения влияния криоконсервации на организацию хроматина и морфологию ядра
- оценить влияние РАТ на сперматозоиды человека в сравнении с криоконсервацией
- оценить влияние различных доз и видов облучения на сперматозоиды человека
- установить взаимосвязь между потенциальными изменениями стандартных параметров сперматозоидов (жизнеспособность, подвижность и морфология) и параметров ядерных сперматозоидов (фрагментация и окисление ДНК, конденсация и организация хроматина, морфология ядра и STL.
Наша конечная цель — обеспечить значительное улучшение диагностики мужской фертильности и оптимизировать наши методы сохранения фертильности.
С этой целью мы будем подвергать эякулированные сперматозоиды человека (n = 90) различными (низкими и умеренными) дозами гамма- или X-фотонов для имитации облучения половых желез. Поглощенные дозы образцами рассчитывались с использованием платформы GATE Monte Carlo (версия 8.2). Настройки геометрии эксперимента были смоделированы в виде трехмерных вокселизированных объемов внутри программного обеспечения путем задания формы, размера, расстояния и плотности для всех созданных объемов. Все измерения будут проводиться на избыточных образцах от мужчин, проходящих плановый анализ спермы в Центре репродуктивной медицины, после получения их письменного информированного согласия. Образцы спермы собираются и разделяются на 3 группы для анализа качества спермы после:
- облучение (3 условия);
- цикл замораживания-оттаивания;
- свежее состояние: отрицательный контроль без обработки.
До (свежее состояние) и после каждой обработки мы будем анализировать:
- стандартные параметры спермы (жизнеспособность, подвижность и морфология) в соответствии с ВОЗ, 2010 г.;
- STL с использованием Flow FISH, q-PCR и q-FISH;
- конденсация хроматина (хромомицин А3);
- окисление ДНК (остатки 8-OHdG);
- фрагментация ДНК (TUNEL);
- Трехмерная структура ядра с использованием трехмерной биовизуализации.
Тип исследования
Регистрация (Ожидаемый)
Контакты и местонахождение
Места учебы
-
-
-
Clermont-Ferrand, Франция, 63000
- Рекрутинг
- CHU de Clermont-Ferrand
-
Контакт:
- Lise Laclautre, PharmD
- Номер телефона: 33 04 73 75 49 62
- Электронная почта: promo_interne_drci@chu-clermontferrand.fr
-
Главный следователь:
- Hanaé PONS-REJRAJI, PhD
-
Младший исследователь:
- Florence BRUGNON, MD, PhD
-
Младший исследователь:
- Cyril BOUCHE, PhD
-
Младший исследователь:
- Aurélie VEGA, PhD
-
Младший исследователь:
- Philippe VAGO, MD, PhD
-
Младший исследователь:
- Andreï TCHIRKOV, MD, PhD
-
Младший исследователь:
- Céline PEBREL-RICHARD, MD
-
Младший исследователь:
- Gaëlle SALAUN, MD, PhD
-
Младший исследователь:
- Lauren VERONESE, MD, PhD
-
Младший исследователь:
- Laetitia GOUAS, MD, PhD
-
Младший исследователь:
- Carole GOUMY, MD, PhD
-
-
Критерии участия
Критерии приемлемости
Возраст, подходящий для обучения
Принимает здоровых добровольцев
Полы, имеющие право на обучение
Метод выборки
Исследуемая популяция
Описание
Критерии включения:
- Мужчина моложе 45 лет
- Мужчина, проходящий плановый анализ спермы в Центре репродуктивной медицины, принявший протокол исследования и подписавший соответствующее согласие, будет включен в протокол без различия физических критериев.
Критерий исключения:
-
Учебный план
Как устроено исследование?
Детали дизайна
Когорты и вмешательства
Группа / когорта |
Вмешательство/лечение |
|---|---|
|
рычаг "свежий"
Свежая сперма, обработанная без облучения перед криоконсервацией
|
сперму замораживают в криопротекторной среде Cryosperm® (Origio).
Образцы будут упакованы в заранее определенные соломинки с высоким уровнем безопасности (Криобиосистема).
Медленное замораживание соломинок будет осуществляться с помощью программируемого устройства Nanodigicool® (Криобиосистема).
|
|
Рычаг "криоконсервированный"
криоконсервированная сперма без облучения (n=60)
|
сперму замораживают в криопротекторной среде Cryosperm® (Origio).
Образцы будут упакованы в заранее определенные соломинки с высоким уровнем безопасности (Криобиосистема).
Медленное замораживание соломинок будет осуществляться с помощью программируемого устройства Nanodigicool® (Криобиосистема).
|
|
острое облучение в малых дозах
Сканирование таза: острое облучение (1 или 2 секунды) с использованием низкой дозы (n = 30),
|
Образец спермы будет помещен на рабочий стол сканера для экспонирования в течение 1-2 секунд.
Затем будет сделано несколько уровней дозы, чтобы ограничить значение 17 мГр.
|
|
длительное облучение в малых дозах
Сцинтиграфия костей: длительное облучение (3 часа) с низкой дозой (n=30),
|
Образец спермы подвергают воздействию гамма-излучения путем добавления раствора Tc99m в течение 3 часов.
|
|
длительное облучение в средней дозе
Терапия радиоактивным йодом 131 (RAT), применяемая при раке щитовидной железы: длительное облучение (3 часа) со средней дозой (n = 60),
|
Образец спермы подвергается воздействию гамма-излучения путем добавления раствора I131 в течение 3 часов.
|
Что измеряет исследование?
Первичные показатели результатов
Мера результата |
Мера Описание |
Временное ограничение |
|---|---|---|
|
Измерить in vitro влияние лечения ионизирующим излучением на качество ядер сперматозоидов и, в частности, на размер теломер.
Временное ограничение: 01.01.2018-01.01.2022
|
Для достижения этой цели мы будем подвергать человеческую сперму дозе облучения I131, чтобы имитировать облучение половых желез и сперматозоидов. Реликват спермы подвергается криоконсервации (контрольное состояние). После размораживания тот же образец будет разделен на 2 группы для анализа качества спермы:
|
01.01.2018-01.01.2022
|
Вторичные показатели результатов
Мера результата |
Мера Описание |
Временное ограничение |
|---|---|---|
|
Измерить in vitro влияние дозы облучения I131 на качество ядер сперматозоидов, особенно на STL.
Временное ограничение: 01.01.2018-01.01.2022
|
Все измерения проводятся на избыточных образцах от мужчин, проходящих плановый анализ спермы в Центре репродуктивной медицины, после получения их письменного информированного согласия. Образцы спермы будут собраны и разделены на 3 группы для анализа качества спермы после:
До (свежее состояние) и после каждой обработки мы будем анализировать:
|
01.01.2018-01.01.2022
|
|
для измерения влияния RAT на параметры сперматозоидов (жизнеспособность, подвижность и морфология)
Временное ограничение: 01.01.2018-01.01.2022
|
Все измерения проводятся на избыточных образцах от мужчин, проходящих плановый анализ спермы в Центре репродуктивной медицины, после получения их письменного информированного согласия. Образцы спермы будут собраны и разделены на 3 группы для анализа качества спермы после:
|
01.01.2018-01.01.2022
|
|
Измерить in vitro влияние криоконсервации на качество ядра спермы, особенно на STL, организацию хроматина и морфологию ядра.
Временное ограничение: 01.01.2018-01.01.2022
|
Все измерения проводятся на избыточных образцах от мужчин, проходящих плановый анализ спермы в Центре репродуктивной медицины, после получения их письменного информированного согласия. Образцы спермы будут собраны и разделены на 3 группы для анализа качества спермы после:
До (свежее состояние) и после каждой обработки мы будем анализировать:
|
01.01.2018-01.01.2022
|
|
оценить влияние РАТ на сперматозоиды человека в сравнении с криоконсервацией
Временное ограничение: 01.01.2018-01.01.2022
|
Мы сравним эффекты, вызванные RAT и криоконсервацией, на каждом образце спермы.
Чтобы ограничить систематическую ошибку, для каждой обработки облучением образец сперматозоидов (криоконсервированный контроль) будет обрабатываться в идентичных условиях.
|
01.01.2018-01.01.2022
|
|
оценить влияние различных доз и видов облучения на сперматозоиды человека
Временное ограничение: 01.01.2018-01.01.2022
|
Все измерения проводятся на избыточных образцах от мужчин, проходящих плановый анализ спермы в Центре репродуктивной медицины, после получения их письменного информированного согласия. Образцы спермы будут собраны и разделены на 3 группы для анализа качества спермы после:
Облучение будет осуществляться при соблюдении 3-х условий:
|
01.01.2018-01.01.2022
|
|
установить взаимосвязь между потенциальными изменениями стандартных параметров сперматозоидов (жизнеспособность, подвижность и морфология) и параметров ядерных сперматозоидов (фрагментация и окисление ДНК, конденсация и организация хроматина, морфология ядра и STL.
Временное ограничение: 01.01.2018-01.01.2022
|
Мы сопоставим эффекты, вызванные на жизнеспособность, подвижность и морфологию, и параметры ядерных сперматозоидов (фрагментация и окисление ДНК, конденсация и организация хроматина, морфология ядра и STL.
|
01.01.2018-01.01.2022
|
Соавторы и исследователи
Соавторы
Следователи
- Учебный стул: Hanae PONS-REJRAJI, PhD, CHU de Clermont-Ferrand
Даты записи исследования
Изучение основных дат
Начало исследования (ДЕЙСТВИТЕЛЬНЫЙ)
Первичное завершение (ОЖИДАЕТСЯ)
Завершение исследования (ОЖИДАЕТСЯ)
Даты регистрации исследования
Первый отправленный
Впервые представлено, что соответствует критериям контроля качества
Первый опубликованный (ДЕЙСТВИТЕЛЬНЫЙ)
Обновления учебных записей
Последнее опубликованное обновление (ДЕЙСТВИТЕЛЬНЫЙ)
Последнее отправленное обновление, отвечающее критериям контроля качества
Последняя проверка
Дополнительная информация
Термины, связанные с этим исследованием
Ключевые слова
Другие идентификационные номера исследования
- 2020 PONS-REJRAJI
Планирование данных отдельных участников (IPD)
Планируете делиться данными об отдельных участниках (IPD)?
Информация о лекарствах и устройствах, исследовательские документы
Изучает лекарственный продукт, регулируемый FDA США.
Изучает продукт устройства, регулируемый Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США.
Эта информация была получена непосредственно с веб-сайта clinicaltrials.gov без каких-либо изменений. Если у вас есть запросы на изменение, удаление или обновление сведений об исследовании, обращайтесь по адресу register@clinicaltrials.gov. Как только изменение будет реализовано на clinicaltrials.gov, оно будет автоматически обновлено и на нашем веб-сайте. .