Expresión génica en úlceras venosas crónicas de pierna (GECVELUS)
Th17- Perfil de expresión génica en pacientes con insuficiencia venosa crónica de piernas y úlceras: resultados clínicos y genéticos
Descripción general del estudio
Estado
Intervención / Tratamiento
Descripción detallada
La Enfermedad Venosa Crónica (ECV) es una condición clínica muy extendida en los países occidentales, con una prevalencia que va desde el 10% en adultos menores de 30 años hasta casi el 80% en personas mayores de 70 años. Las manifestaciones clínicas de ECV varían desde signos clínicos leves, incluidas las venas varicosas, hasta signos más avanzados y graves, como las úlceras venosas crónicas de las piernas (CVLU, por sus siglas en inglés), que afectan significativamente la calidad de vida (QoL) de los pacientes afectados. Hasta el momento se han estudiado varias alteraciones genéticas y moleculares para comprender el inicio, la progresión y las complicaciones de la ECV, incluidos los estados de insuficiencia venosa crónica (IVC) en los que se pueden desarrollar CVLU. La aparición de CVLU generalmente está precedida por cambios en la piel de las extremidades inferiores, como la lipodermatoesclerosis, que es una condición inflamatoria crónica debido a la IVC, caracterizada por una condición inflamatoria de la piel. Este evento patológico conduce a fibrosis subcutánea y endurecimiento de la piel afectada, lo que resulta en hipoxia tisular esencial para la ulceración venosa. Los estudios de perfiles de expresión génica, presentes en la literatura actual, permiten hipotetizar varios mecanismos que subyacen al desarrollo de CVLU, destacando una amplia variedad de las interconexiones genético-moleculares. Sin embargo, ninguno hasta la fecha es capaz de proporcionar un modelo genético y celular que vincule los eventos patogénicos que conducen a la aparición de CVLU o la progresión de estas lesiones. Las células T auxiliares 17 (Th-17) son un subtipo de células T auxiliares proinflamatorias. Células (CD4+) definidas por la producción de una firma de citoquinas de la cual IL-17 representa el progenitor. El desarrollo, diferenciación y expansión de Th-17 depende de factores de diferenciación (TGF-β), factores de crecimiento (IL-23/IL23R) y varios factores de transcripción (ROR-γt, STAT3).
Curiosamente, el eje Th-17 se ha implicado en varias enfermedades autoinmunes, incluida la artritis reumatoide, la esclerosis múltiple, la colitis ulcerosa, la enfermedad de Crohn, la psoriasis y la encefalitis autoinmune, entre otras. Además, recientemente está emergiendo un papel cada vez más fuerte del eje Th-17 en la resistencia a los fármacos tumorales y en la progresión y radicalización de la infección por VIH.
Nuestro estudio tiene como objetivo evaluar el perfil de expresión génica Th17- en pacientes con CVD y CVLU.
Tipo de estudio
Inscripción (Anticipado)
Contactos y Ubicaciones
Estudio Contacto
- Nombre: Raffaele Serra, M.D.,Ph.D.
- Número de teléfono: +3909613647380
- Correo electrónico: rserra@unicz.it
Ubicaciones de estudio
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Catanzaro, Italia, 880100
- Reclutamiento
- University Magna Graecia of Catanzaro
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Contacto:
- Raffaele Serra, M.D.
- Número de teléfono: +3909613647380
- Correo electrónico: rserra@unicz.it
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Sub-Investigador:
- Rosario Amato, M.D., Ph.D.
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Criterios de participación
Criterio de elegibilidad
Edades elegibles para estudiar
Acepta Voluntarios Saludables
Géneros elegibles para el estudio
Método de muestreo
Población de estudio
Descripción
Criterios de inclusión:
- pacientes con enfermedad venosa crónica con CEAP Clases clínicas (C) 2-6: C2: venas varicosas C3: edema C4: cambios en la piel C5: úlceras venosas curadas C6: úlceras venosas activas
Criterio de exclusión:
- pacientes con enfermedad arterial periférica
- pacientes con malignidad
Plan de estudios
¿Cómo está diseñado el estudio?
Detalles de diseño
Cohortes e Intervenciones
Grupo / Cohorte |
Intervención / Tratamiento |
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Grupo 1 - Pacientes con Enfermedad Venosa Crónica (ECV)
Se reclutarán pacientes con ECV en diferentes estadios, según la Clasificación CEAP de Trastornos Venosos Crónicos.
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Las muestras de sangre se recogerán en tubos vacutainer K3 EDTA de 3 ml.
Las células mononucleares de sangre periférica se aislarán mediante centrifugación en gradiente de densidad dentro de las 2 horas posteriores a la recolección de la muestra.
Los linfocitos T CD4+ primarios se purificarán a partir de los linfocitos de sangre periférica utilizando un kit de aislamiento de linfocitos T CD4+ de clasificación magnética, de acuerdo con las instrucciones del fabricante.
Se realizará la extracción de ARN.
Se cuantificará el ARN total y se evaluará la calidad del ARN mediante electroforesis en gel de agarosa con formaldehído y determinando la relación de absorbancia 260/280.
Un microgramo de ARN total de cada muestra se someterá a transcripción inversa.
Se amplificará un microlitro de ADNc mediante PCR en tiempo real y 10 pmol de cebadores específicos para IL23R, IL17, SGK1, RANBP1, TFGB.
Los ensayos de PCR en tiempo real se realizarán por triplicado. La especificidad de los productos de PCR se determinará mediante el análisis de la curva de fusión.
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Grupo 2 - Sujetos sanos sin Enfermedad Venosa Crónica (ECV)
Se reclutarán voluntarios sanos sin Enfermedad Venosa Crónica (ECV).
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Las muestras de sangre se recogerán en tubos vacutainer K3 EDTA de 3 ml.
Las células mononucleares de sangre periférica se aislarán mediante centrifugación en gradiente de densidad dentro de las 2 horas posteriores a la recolección de la muestra.
Los linfocitos T CD4+ primarios se purificarán a partir de los linfocitos de sangre periférica utilizando un kit de aislamiento de linfocitos T CD4+ de clasificación magnética, de acuerdo con las instrucciones del fabricante.
Se realizará la extracción de ARN.
Se cuantificará el ARN total y se evaluará la calidad del ARN mediante electroforesis en gel de agarosa con formaldehído y determinando la relación de absorbancia 260/280.
Un microgramo de ARN total de cada muestra se someterá a transcripción inversa.
Se amplificará un microlitro de ADNc mediante PCR en tiempo real y 10 pmol de cebadores específicos para IL23R, IL17, SGK1, RANBP1, TFGB.
Los ensayos de PCR en tiempo real se realizarán por triplicado. La especificidad de los productos de PCR se determinará mediante el análisis de la curva de fusión.
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¿Qué mide el estudio?
Medidas de resultado primarias
Medida de resultado |
Medida Descripción |
Periodo de tiempo |
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Th17- Perfil de expresión génica
Periodo de tiempo: 1 año
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Se evaluará el perfil genético en pacientes con Enfermedad Venosa Crónica y en sujetos sanos.
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1 año
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Colaboradores e Investigadores
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Publicaciones y enlaces útiles
Publicaciones Generales
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- Serra R, Ssempijja L, Provenzano M, Andreucci M. Genetic biomarkers in chronic venous disease. Biomark Med. 2020 Feb;14(2):75-80. doi: 10.2217/bmm-2019-0408. Epub 2020 Feb 13. No abstract available.
- Metzinger L, de Franciscis S, Serra R. The Management of Cardiovascular Risk through Epigenetic Biomarkers. Biomed Res Int. 2017;2017:9158572. doi: 10.1155/2017/9158572. Epub 2017 Jul 13.
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- Amato R, Dattilo V, Brescia C, D'Antona L, Iuliano R, Trapasso F, Perrotti N, Costa D, Ielapi N, Aiello F, Provenzano M, Bracale UM, Andreucci M, Serra R. Th17-Gene Expression Profile in Patients with Chronic Venous Disease and Venous Ulcers: Genetic Modulations and Preliminary Clinical Evidence. Biomolecules. 2022 Jun 28;12(7):902. doi: 10.3390/biom12070902.
Fechas de registro del estudio
Fechas importantes del estudio
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Finalización primaria (Anticipado)
Finalización del estudio (Anticipado)
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- E.R.ALL.2018.42
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