Beneficios de la reparación epitelial en la EPOC mediante células madre pluripotentes inducidas (iPS) (RepCOPDiPS)
El objetivo de este estudio experimental intervencionista, transversal y fisiopatológico es evaluar el potencial de las células madre pluripotentes inducidas (iPS) de un paciente, utilizadas antes de la etapa de rediferenciación, para permitir la reparación ex vivo del epitelio lesionado en pacientes con enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC), fumadores sin EPOC y controles no fumadores.
Las principales preguntas que pretende responder son:
- evaluar la capacidad de reparación del epitelio bronquial en sujetos con EPOC, utilizando un modelo de epitelio bronquial reconstituido en cultivo de interfaz aire/líquido y el modelo iPS.
- capacidades de reparación del epitelio en situaciones normales o aberrantes, así como el tiempo necesario para dicha reparación, y determinar la implicación de las células iPS injertadas en la reparación del epitelio en sujetos control en cultivo, fumadores sin EPOC y pacientes con EPOC.
Los investigadores compararán 3 grupos de participantes (pacientes con EPOC, fumadores sin EPOC y no fumadores sin EPOC) para determinar la eficacia de la reparación epitelial entre cultivos de ALI no injertados y cultivos de ALI injertados con células iPS, para evaluar su contribución a la reparación epitelial.
Los participantes se someterán a una fibroscopia bronquial (para indicaciones clínicas) con dos biopsias adicionales específicas del estudio.
Esta investigación podría conducir a avances en las terapias celulares para la EPOC, con implicaciones a largo plazo para los tratamientos epigenéticos y las aplicaciones in vivo.
Descripción general del estudio
Estado
Condiciones
Intervención / Tratamiento
Descripción detallada
Recientemente, el equipo de investigación ha podido demostrar que existe una deficiencia en un subtipo particular de células club destinadas a ciliarse en la EPOC, lo que explicaría la inversión de la relación células ciliadas/células caliciformes y por tanto en la formación de los tapones mucosos. Implicado en la obstrucción bronquiolar.
Las iPS (células madre pluripotentes inducidas) representan un importante avance biológico que ha merecido el Premio Nobel. Ofrecen la ventaja de ser pluripotentes, capaces de multiplicarse infinitamente y, por tanto, de diferenciarse en cualquier otro tipo de célula, o incluso de órgano, en definitiva, embriogénesis. Los investigadores han desarrollado un protocolo para diferenciar las células iPS en epitelios bronquiales, con un éxito interesante. Estos epitelios reconstituidos en una interfaz aire-líquido (iALI) reproducen todas las características de los epitelios in vivo, en particular con la presencia de todos los subtipos celulares.
El equipo de investigación plantea la hipótesis de que las células iPS de un paciente, utilizadas antes de la etapa de rediferenciación, permitirán la reparación ex vivo de su epitelio dañado.
Los resultados esperados de este proyecto serán validar el modelo in vitro de agresión de células epiteliales en cultivos de interfaz aire-líquido (ALI) y determinar la viabilidad de sembrar células epiteliales derivadas de iPS. Los epitelios ALI de pacientes con EPOC se repararían mejor o incluso normalmente gracias a iPS.
En última instancia, este proyecto podría ser una terapia potencial dirigida a la epigenética y, por qué no, una terapia celular.
Tipo de estudio
Inscripción (Estimado)
Fase
- No aplica
Contactos y Ubicaciones
Estudio Contacto
- Nombre: Isabelle VACHIER, PhD
- Número de teléfono: +33 (0)467042020
- Correo electrónico: isabelle.vachier@medbiomed.fr
Ubicaciones de estudio
-
-
Hérault
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Montpellier, Hérault, Francia, 34295
- Reclutamiento
- University Hospital of Montpellier, Arnaud de Villeneuve Hospital
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Contacto:
- Mathilde VOLPATO, MD
- Número de teléfono: +33 (0) 4 67 04.20.20
- Correo electrónico: m-volpato@chu-montpellier.fr
-
-
Criterios de participación
Criterio de elegibilidad
Edades elegibles para estudiar
- Adulto
- Adulto Mayor
Acepta Voluntarios Saludables
Descripción
Criterios generales de inclusión
- Participantes masculinos y femeninos de 18 años o más.
- Participantes con indicación de broncoscopia determinada por un neumólogo (p. ej., exploración de seguimiento, investigación de nódulos, hemoptisis, tos, producción de esputo, bronquitis recurrente o diagnóstico diferencial).
Criterios de inclusión del grupo 1: EPOC
- Fumadores actuales o exfumadores (≥10 paquetes-año).
- Diagnosticado con EPOC: FEV1/FVC < 0,7 (confirmado por espirometría disponible en el expediente médico en el último año).
Criterios de inclusión del grupo 2: fumadores sin EPOC (n=10)
- Fumadores actuales o exfumadores (≥10 paquetes-año).
- No se identificó ningún trastorno ventilatorio obstructivo mediante examen clínico y/o (FEV1/FVC > 0,7 y FEV1 > 70 % de los valores previstos) confirmado mediante espirometría en el último año.
Criterios de inclusión del grupo 3: controles de no fumadores (n=10)
- Nunca fumadores o exfumadores que dejaron de fumar hace más de 10 años (<10 paquetes-año).
- No se identificó ningún trastorno ventilatorio obstructivo mediante examen clínico y/o (FEV1/FVC > 0,7 y FEV1 > 70 % de los valores previstos) confirmado mediante espirometría en el último año.
Criterios de exclusión:
- Participante con enfermedad neoplásica extensa.
- Participante con otra afección pulmonar progresiva (p. ej., asma, tuberculosis, enfermedad pulmonar intersticial, infección pulmonar activa o reciente).
- Participante que consume drogas ilícitas o alcohol.
- Persona privada de libertad (por decisión judicial o administrativa, o bajo hospitalización involuntaria).
- Individuo actualmente inscrito en otro estudio de investigación con un período de exclusión en curso.
- Participante con trastornos psiquiátricos recientes (p. ej., hospitalización involuntaria, condiciones de salud mental que impiden el consentimiento informado o que requieren intervención médica inmediata).
- Adulto bajo protección legal (por ejemplo, tutela, curaduría o protección judicial).
- El participante no puede dar su consentimiento informado.
- El participante no domina el francés y no cuenta con una persona de confianza que le ayude con la comprensión.
- Participante no afiliado ni cubierto por un sistema de seguridad social.
- Mujeres embarazadas o en período de lactancia.
- El participante se niega a dar su consentimiento después de haber sido informado.
- Participante incapaz o incapaz de expresar su consentimiento.
Plan de estudios
¿Cómo está diseñado el estudio?
Detalles de diseño
- Propósito principal: Ciencia básica
- Asignación: No aleatorizado
- Modelo Intervencionista: Asignación paralela
- Enmascaramiento: Ninguno (etiqueta abierta)
Armas e Intervenciones
Grupo de participantes/brazo |
Intervención / Tratamiento |
|---|---|
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Experimental: fumador con EPOC
Biopsia bronquial realizada durante una fibroscopia bronquial planificada como parte del manejo de su enfermedad.
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Se tomarán 2 biopsias bronquiales durante la fibroscopia bronquial.
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Comparador activo: fumador sin EPOC
Biopsia bronquial realizada durante una fibroscopia bronquial planificada como parte del manejo de su enfermedad.
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Se tomarán 2 biopsias bronquiales durante la fibroscopia bronquial.
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Comparador activo: sujeto sano no fumador
Biopsia bronquial realizada durante una fibroscopia bronquial planificada como parte del manejo de su enfermedad.
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Se tomarán 2 biopsias bronquiales durante la fibroscopia bronquial.
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¿Qué mide el estudio?
Medidas de resultado primarias
Medida de resultado |
Medida Descripción |
Periodo de tiempo |
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El objetivo principal es evaluar la capacidad de reparación del epitelio bronquial de sujetos con EPOC utilizando el modelo de epitelio bronquial reconstituido en cultivo de interfaz aire/líquido y el modelo iPS.
Periodo de tiempo: Día 1
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Porcentaje de reparación a las 24 horas post-lesión de cultivos de ALI versus los mismos cultivos de ALI "injertados con iPS".
Este porcentaje vendrá determinado por la superficie del cultivo reconstruido tras el rayado dividida por la superficie inicialmente rayada.
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Día 1
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Medidas de resultado secundarias
Medida de resultado |
Medida Descripción |
Periodo de tiempo |
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comparación del % de reparación de cultivos post-scratch en presencia o ausencia de IPS entre los 3 grupos
Periodo de tiempo: Día 2, Día 3 y Día 7
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Cálculo del porcentaje de reparación a las 48 horas, 72 horas y 7 días post-scratch.
Este porcentaje vendrá determinado por la superficie del cultivo reconstruido tras el rayado dividida por la superficie inicialmente rayada.
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Día 2, Día 3 y Día 7
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Comparación de resistencias eléctricas transepiteliales entre grupos.
Periodo de tiempo: Día 2, Día 3 y Día 7
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Verificación de la integridad del epitelio bronquial obtenida midiendo la resistencia eléctrica transepitelial.
(expresado como Ω/cm2 en cada punto de tiempo).
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Día 2, Día 3 y Día 7
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Determinación de la proporción de células iPS marcadas con GFP frente a células nativas en la reparación de lesiones:
Periodo de tiempo: Día 2, Día 3 y Día 7
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Mediciones de densidad celular (% de células GFP / células totales) mediante microscopía en cada momento
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Día 2, Día 3 y Día 7
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Fenotipado de poblaciones de iPS nativas y GFP+ mediante marcaje inmunofluorescente de diferentes tipos de células (células ciliadas, células mucosas, células club, células basales)
Periodo de tiempo: Día 2, Día 3 y Día 7
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se utilizará inmunofluorescencia para evaluar la densidad de células basales, club, ciliadas y caliciformes; La liberación de citocinas proinflamatorias clave clásicamente implicadas en la EPOC se analizará en el sobrenadante de estos cultivos.
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Día 2, Día 3 y Día 7
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Comparación del perfil transcriptómico para cada subtipo celular obtenido tras clasificar células nativas y células iPS GFP+ mediante citometría de flujo.
Periodo de tiempo: Día 2, Día 3 y Día 7
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Comparación del perfil transcriptómico mediante análisis ANOVA de los 10 genes más expresados entre células nativas y células IPS.
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Día 2, Día 3 y Día 7
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Comparación del perfil transcriptómico entre ALI injertado y no injertado.
Periodo de tiempo: Día 2, Día 3 y Día 7
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Comparación del perfil transcriptómico mediante análisis ANOVA de los 10 genes más expresados
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Día 2, Día 3 y Día 7
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Relación de células ciliadas/caliciformes para comprobar si el subtipo de células del club deficiente se restablece mediante esta técnica.
Periodo de tiempo: Día 2, Día 3 y Día 7
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la proporción de células ciliadas/caliciformes
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Día 2, Día 3 y Día 7
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Colaboradores e Investigadores
Patrocinador
Colaboradores
Investigadores
- Investigador principal: Mathilde VOLPATO, MD, University Hospital, Montpellier
Fechas de registro del estudio
Fechas importantes del estudio
Inicio del estudio (Actual)
Finalización primaria (Estimado)
Finalización del estudio (Estimado)
Fechas de registro del estudio
Enviado por primera vez
Primero enviado que cumplió con los criterios de control de calidad
Publicado por primera vez (Actual)
Actualizaciones de registros de estudio
Última actualización publicada (Actual)
Última actualización enviada que cumplió con los criterios de control de calidad
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Términos relacionados con este estudio
Palabras clave
Términos MeSH relevantes adicionales
Otros números de identificación del estudio
- RECHMPL24_0012
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Estudia un producto farmacéutico regulado por la FDA de EE. UU.
Estudia un producto de dispositivo regulado por la FDA de EE. UU.
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