Benefícios do reparo epitelial na DPOC por células-tronco pluripotentes induzidas (iPS) (RepCOPDiPS)
O objetivo deste estudo experimental intervencionista, transversal e fisiopatológico é avaliar o potencial das células-tronco pluripotentes induzidas (iPS) de um paciente, usadas antes da etapa de rediferenciação, para permitir o reparo ex vivo do epitélio lesionado em pacientes com doença pulmonar obstrutiva crônica (DPOC), fumantes sem DPOC e controles não fumantes.
As principais questões que pretende responder são:
- avaliar a capacidade de reparo do epitélio brônquico em indivíduos com DPOC, utilizando um modelo de epitélio brônquico reconstituído em cultura de interface ar/líquido e o modelo iPS.
- capacidades de reparo de epitélios em situações normais ou aberrantes, bem como o tempo necessário para esse reparo, e para determinar o envolvimento de células iPS enxertadas no reparo de epitélios em cultura de indivíduos controle, fumantes sem DPOC e pacientes com DPOC.
Os pesquisadores irão comparar 3 grupos de participantes (pacientes com DPOC, fumantes sem DPOC e não fumantes sem DPOC) quanto à eficácia do reparo epitelial entre culturas de ALI não enxertadas e culturas de ALI enxertadas com células iPS, a fim de avaliar sua contribuição para o reparo epitelial.
Os participantes serão submetidos a fibroscopia brônquica (para indicações clínicas) com duas biópsias adicionais específicas para o estudo.
Esta investigação poderá levar a avanços nas terapias baseadas em células para a DPOC, com implicações a longo prazo para tratamentos epigenéticos e aplicações in vivo.
Visão geral do estudo
Status
Condições
Intervenção / Tratamento
Descrição detalhada
Recentemente, a equipa de investigação conseguiu demonstrar que existe uma deficiência num determinado subtipo de células club destinadas a tornarem-se ciliadas na DPOC, o que explicaria a inversão da relação célula ciliada/célula caliciforme e, portanto, na formação dos tampões mucosos. envolvido na obstrução bronquiolar.
As iPS (células-tronco pluripotentes induzidas) representam um grande avanço biológico que recebeu o Prêmio Nobel. Oferecem a vantagem de serem pluripotentes, capazes de se multiplicarem infinitamente e, portanto, de se diferenciarem em qualquer outro tipo de célula, ou mesmo órgão, em suma, embriogênese. Os pesquisadores desenvolveram um protocolo para diferenciar células iPS em epitélios brônquicos, com sucesso interessante. Esses epitélios reconstituídos em interface ar-líquido (iALI) reproduzem todas as características dos epitélios in vivo, principalmente com a presença de todos os subtipos celulares.
A equipa de investigação levanta a hipótese de que as células iPS de um paciente, utilizadas antes da fase de rediferenciação, permitirão a reparação ex vivo do seu epitélio danificado.
Os resultados esperados deste projeto serão validar o modelo in vitro de agressão de células epiteliais em culturas de interface ar-líquido (ALI) e determinar a viabilidade de semeadura de células epiteliais derivadas de iPS. Os epitélios de LPA de pacientes com DPOC seriam reparados melhor ou mesmo normalmente graças ao iPS.
Em última análise, este projeto poderia ser uma terapia potencial direcionada à epigenética e, por que não, uma terapia celular.
Tipo de estudo
Inscrição (Estimado)
Estágio
- Não aplicável
Contactos e Locais
Contato de estudo
- Nome: Isabelle VACHIER, PhD
- Número de telefone: +33 (0)467042020
- E-mail: isabelle.vachier@medbiomed.fr
Locais de estudo
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Hérault
-
Montpellier, Hérault, França, 34295
- Recrutamento
- University Hospital of Montpellier, Arnaud de Villeneuve Hospital
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Contato:
- Mathilde VOLPATO, MD
- Número de telefone: +33 (0) 4 67 04.20.20
- E-mail: m-volpato@chu-montpellier.fr
-
-
Critérios de participação
Critérios de elegibilidade
Idades elegíveis para estudo
- Adulto
- Adulto mais velho
Aceita Voluntários Saudáveis
Descrição
Critérios Gerais de Inclusão
- Participantes do sexo masculino e feminino com idade igual ou superior a 18 anos.
- Participantes com indicação de broncoscopia determinada por pneumologista (por exemplo, exploração de acompanhamento, investigação de nódulos, hemoptise, tosse, produção de escarro, bronquite recorrente ou diagnóstico diferencial).
Critérios de inclusão do Grupo 1: DPOC
- Fumantes atuais ou ex-fumantes (≥10 maços-ano).
- Diagnosticado com DPOC: VEF1/CVF < 0,7 (confirmado por espirometria disponível no prontuário do último ano).
Critérios de inclusão do Grupo 2: Fumantes sem DPOC (n=10)
- Fumantes atuais ou ex-fumantes (≥10 maços-ano).
- Nenhum distúrbio ventilatório obstrutivo identificado por exame clínico e/ou (VEF1/CVF > 0,7 e VEF1 > 70% dos valores previstos) confirmado por espirometria no último ano.
Critérios de inclusão do Grupo 3: controles não fumantes (n=10)
- Nunca fumantes ou ex-fumantes que pararam há mais de 10 anos (<10 maços-ano).
- Nenhum distúrbio ventilatório obstrutivo identificado por exame clínico e/ou (VEF1/CVF > 0,7 e VEF1 > 70% dos valores previstos) confirmado por espirometria no último ano.
Critérios de exclusão:
- Participante com doença neoplásica extensa.
- Participante com outra condição pulmonar progressiva (por exemplo, asma, tuberculose, doença pulmonar intersticial, infecção pulmonar ativa ou recente).
- Participante consumindo drogas ilícitas ou álcool.
- Indivíduo privado de liberdade (por decisão judicial ou administrativa, ou sob internação involuntária).
- Indivíduo atualmente inscrito em outro estudo de pesquisa com período de exclusão contínuo.
- Participante com transtornos psiquiátricos recentes (por exemplo, hospitalização involuntária, problemas de saúde mental que impedem o consentimento informado ou que requerem intervenção médica imediata).
- Adulto sob proteção legal (por exemplo, tutela, curadoria ou proteção judicial).
- Participante incapaz de fornecer consentimento informado.
- Participante não fluente em francês e sem pessoa de confiança para auxiliar na compreensão.
- Participante não filiado ou abrangido por sistema de segurança social.
- Mulheres grávidas ou amamentando.
- Participante recusando-se a fornecer consentimento após ser informado.
- Participante incapaz ou incapaz de expressar consentimento.
Plano de estudo
Como o estudo é projetado?
Detalhes do projeto
- Finalidade Principal: Ciência básica
- Alocação: Não randomizado
- Modelo Intervencional: Atribuição Paralela
- Mascaramento: Nenhum (rótulo aberto)
Armas e Intervenções
Grupo de Participantes / Braço |
Intervenção / Tratamento |
|---|---|
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Experimental: fumante com DPOC
Biópsia brônquica realizada durante uma fibroscopia brônquica planejada como parte do tratamento da doença.
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2 biópsias brônquicas serão realizadas durante a fibroscopia brônquica
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Comparador Ativo: fumante sem DPOC
Biópsia brônquica realizada durante uma fibroscopia brônquica planejada como parte do tratamento da doença.
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2 biópsias brônquicas serão realizadas durante a fibroscopia brônquica
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Comparador Ativo: sujeito saudável não fumante
Biópsia brônquica realizada durante uma fibroscopia brônquica planejada como parte do tratamento da doença.
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2 biópsias brônquicas serão realizadas durante a fibroscopia brônquica
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O que o estudo está medindo?
Medidas de resultados primários
Medida de resultado |
Descrição da medida |
Prazo |
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O objetivo principal é avaliar a capacidade de reparo do epitélio brônquico de indivíduos com DPOC utilizando o modelo de epitélio brônquico reconstituído em cultura de interface ar/líquido e o modelo iPS.
Prazo: Dia 1
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Porcentagem de reparo 24 horas após a lesão de culturas de LPA versus as mesmas culturas de LPA "enxertadas com iPS".
Esta porcentagem será determinada pela área superficial da cultura reconstruída após a raspagem dividida pela área superficial inicialmente arranhada.
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Dia 1
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Medidas de resultados secundários
Medida de resultado |
Descrição da medida |
Prazo |
|---|---|---|
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comparação da % de reparo de culturas pós-arranhões na presença ou ausência de IPS entre os 3 grupos
Prazo: Dia 2, Dia 3 e Dia 7
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Cálculo da percentagem de reparação às 48 horas, 72 horas e 7 dias pós-risco.
Esta porcentagem será determinada pela área superficial da cultura reconstruída após a raspagem dividida pela área superficial inicialmente arranhada.
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Dia 2, Dia 3 e Dia 7
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Comparação das resistências elétricas transepiteliais entre os grupos
Prazo: Dia 2, Dia 3 e Dia 7
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Verificação da integridade do epitélio brônquico obtida pela medição da resistência elétrica transepitelial.
(expresso como Ω/cm2 em cada ponto de tempo).
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Dia 2, Dia 3 e Dia 7
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Determinando a proporção de células iPS marcadas com GFP versus células nativas no reparo de lesões:
Prazo: Dia 2, Dia 3 e Dia 7
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Medições de densidade celular (% células GFP/células totais) por microscopia em cada ponto de tempo
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Dia 2, Dia 3 e Dia 7
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Fenotipagem de populações iPS nativas e GFP+ por marcação imunofluorescente de diferentes tipos de células (células ciliadas, células mucosas, células club, células basais)
Prazo: Dia 2, Dia 3 e Dia 7
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a imunofluorescência será utilizada para avaliar a densidade de células basais, clavas, ciliadas e caliciformes; a liberação das principais citocinas pró-inflamatórias classicamente implicadas na DPOC será avaliada no sobrenadante dessas culturas.
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Dia 2, Dia 3 e Dia 7
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Comparação do perfil transcriptômico para cada subtipo celular obtido após classificação de células nativas e células GFP+ iPS por citometria de fluxo.
Prazo: Dia 2, Dia 3 e Dia 7
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Comparação do perfil transcriptômico por análise ANOVA dos 10 genes mais altamente expressos entre células nativas e células IPS.
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Dia 2, Dia 3 e Dia 7
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Comparação do perfil transcriptômico entre LPA não enxertada e enxertada.
Prazo: Dia 2, Dia 3 e Dia 7
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Comparação do perfil transcriptômico por análise ANOVA dos 10 genes mais expressos
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Dia 2, Dia 3 e Dia 7
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relação célula ciliada/caliciforme para verificar se o subtipo de célula club deficiente é restaurado por esta técnica
Prazo: Dia 2, Dia 3 e Dia 7
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a relação célula ciliada/caliciforme
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Dia 2, Dia 3 e Dia 7
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Colaboradores e Investigadores
Patrocinador
Colaboradores
Investigadores
- Investigador principal: Mathilde VOLPATO, MD, University Hospital, Montpellier
Datas de registro do estudo
Datas Principais do Estudo
Início do estudo (Real)
Conclusão Primária (Estimado)
Conclusão do estudo (Estimado)
Datas de inscrição no estudo
Enviado pela primeira vez
Enviado pela primeira vez que atendeu aos critérios de CQ
Primeira postagem (Real)
Atualizações de registro de estudo
Última Atualização Postada (Real)
Última atualização enviada que atendeu aos critérios de controle de qualidade
Última verificação
Mais Informações
Termos relacionados a este estudo
Palavras-chave
Termos MeSH relevantes adicionais
Outros números de identificação do estudo
- RECHMPL24_0012
Plano para dados de participantes individuais (IPD)
Planeja compartilhar dados de participantes individuais (IPD)?
Informações sobre medicamentos e dispositivos, documentos de estudo
Estuda um medicamento regulamentado pela FDA dos EUA
Estuda um produto de dispositivo regulamentado pela FDA dos EUA
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