Comparación de los niveles de acuaporina -4, -5, -9 e IL -8 en muestras de GCF, fluido de dentina y pulpa

Un total de 70 pacientes con pulpitis irreversible sano (1) e sintomático (grupo 2) de 18 a 64 años, que se someterán a tratamiento de conducto radicular de rutina en la Universidad Kırıkkale, Facultad de Odontología, Departamento de Endodoncia, se incluirán en el estudio, con un mínimo de 35 participantes para cada grupo. Antes de comenzar el tratamiento, las muestras de GCF se tomarán de los dientes sanos, sintomáticos e irreversibles diagnosticados con pulpitis y dientes contralaterales a estos dientes. El diente del que se tomará la muestra GCF se aislará con gránulos de algodón. Después de que la placa supragingival se retira cuidadosamente con una cureta sin tocar las encías, el diente se secará con presión de aire ligero durante 10 segundos y las tiras periopáper se colocarán en el surco gingival hasta que se sienta la resistencia. Las tiras de periopáper se eliminarán del surco gingival después de 1 minuto. Mientras toma las muestras, se debe tener cuidado para no contaminar con sangre y saliva; Las muestras contaminadas se repetirán. La cantidad de GCF se medirá y registrará utilizando el dispositivo de periotrón. Se registrarán los equivalentes de microlitros de los valores medidos en el dispositivo periotrón. Las tiras periopáper se colocarán en tubos Eppendorf estériles de 1,5 cc. Se realizarán mediciones de índice gingival y profundidad de bolsillo después de que se tomen muestras de GCF para evitar la irritación de los tejidos periodontales y la contaminación de la sangre. Los pacientes con una profundidad de bolsillo de más de 4 mm serán excluidos del estudio.

Después de la anestesia con 1,8 ml de articé de HCl que contiene epinefrina 1: 100000, los dientes se aislarán con Dam de caucho desinfectado con 70% de alcohol. Después de la desinfección de las coronas de dientes y el área circundante con peróxido de hidrógeno al 30% y al 2.5% de NAOCL, la caries y las restauraciones existentes, si las hay, se eliminarán. En los dientes con pulpa normal, se tomarán muestras de fluido de dentina de la cavidad de la dentina a aproximadamente 2 mm de la pulpa calculada en radiografías. La superficie de dentina dura expuesta se secará con aire comprimido. Usando una prensa estéril, se aplicará 1 membrana por diente a la dentina expuesta durante 1 minuto y se transferirán 1,5 ml a un tubo de Eppendorf estéril.

El techo de la cámara de pulpa se eliminará con un cortador de fresado de acero No. 14 con un micromotor. Usando una excavadora estéril y tirnerf, se eliminarán las muestras de pulpa sanas e inflamadas y se transferirán a tubos Eppendorf estériles a los que se agregarán 200 μl de tampón fosfato (PBS) pH: 7.2.

Al recoger las muestras, se debe tener cuidado para no contaminarlas con sangre y saliva; Se repetirán muestras de fluido GCF y dentina con sospecha de contaminación. Los pacientes con muestras con contaminación del tejido de la pulpa o deterioro en las condiciones de almacenamiento serán excluidos del estudio. Las muestras de GCF, líquido de dentina y tejido de pulpa se transfirieron a un tubo Eppendorf estéril de 1.5 ml marcado con un código asignado al paciente con diagnóstico y fecha, con baja unión de proteínas, mantenido inmediatamente sobre hielo, transferido a un congelador y se mantiene a -20 ° C. Las muestras se transportarán desde la clínica a la congeladora a -80 ° C y se almacenarán en un congelador a -80 ° C para evitar la desnaturalización hasta un análisis posterior.

El proceso de tratamiento se completará aplicando procedimientos de conducto radicular de rutina a los dientes. Los dientes en el grupo de pulpa sana con una indicación de extracción se extraerán después de tomar las muestras, sometidas a procedimientos de extracción normales.

Los niveles de acuaporina -4, -5, -9 e IL -8 de las muestras se analizarán mediante un ensayo inmunosorbente ligado a enzimas específico (ELISA).

Los datos se analizarán en el entorno informático con el programa de paquete estadístico SPSS 28.0 (Paquete estadístico para Social Sciences, NY, EE. UU.). Los resultados se evaluarán en un intervalo de confianza del 95% y un nivel de significancia P <0.05.