Porovnání hladin aquaporinu -4, -5, -9 a IL -8 ve vzorcích GCF, dentinu a buničiny

Do studie bude zahrnuta do studie, s minimálně 35 účastníky, kteří podstoupí rutinní léčbu kořenového kanálu na Kırıkkale University, celkem 70 zdravých (skupiny 1) a symptomatické nevratné pulpitidy (skupina 2) ve věku 18-64 let, kteří podstoupí rutinní léčbu kořenového kanálu na Kırıkkale University. Před zahájením léčby budou vzorky GCF odebírány ze zdravých, symptomatických, nevratných zubů diagnostikovaných pulpitis a zuby kontralaterálními těmito zuby. Zub, ze kterého bude vzorek GCF odebrán, bude izolován bavlněnými peletami. Poté, co je supragigivální plak pečlivě odstraněn s kuretou, aniž by se dotkl dásní, bude zub sušen tlakem světlého vzduchu po dobu 10 sekund a periopaperové proužky budou umístěny do dásního sulkusu, dokud nebude pociťován odpor. Periopaperové proužky budou po 1 minutě odstraněny z dásového sulku. Při užívání vzorků by se mělo být věnováno, aby se nekryt krví a sliny; Opakované vzorky se opakují. Množství GCF bude měřeno a zaznamenáno pomocí periotronového zařízení. Budou zaznamenány ekvivalenty mikrolitrů hodnot měřených na zařízení Periotron. Periopaperové proužky budou umístěny do 1,5 ccm sterilních trubek Eppendorf. Měření gingiválního indexu a hloubky kapsy budou provedeny poté, co budou provedeny vzorky GCF, aby se zabránilo podráždění periodontálních tkání a kontaminace krve. Ze studie budou vyloučeni pacienti s hloubkou kapsy více než 4 mm.

Po anestezii s 1,8 ml articaine HC1 obsahujícího 1: 100 000 epinefrinu budou zuby izolovány s gumovou DAM dezinfikovanou 70% alkoholem. Po dezinfekci zubních korun a okolí 30% peroxidem vodíku a 2,5% NAOCL, kazu a stávající výplně, pokud existují, budou odstraněny. U zubů s normální buničinou budou vzorky dentinové tekutiny odebírány z dentinové dutiny přibližně 2 mm od buničiny, jak se vypočítalo na rentgenových snímcích. Vystavený povrch tvrdého dentinu bude sušen stlačeným vzduchem. Pomocí sterilního lisu bude na exponovaný dentin aplikována 1 membrána na zub po dobu 1 minuty a 1,5 ml bude přenesena do sterilní trubice Eppendorf.

Strop komory buničiny bude odstraněn s řezačkou ocelového rondu č. 14 pomocí mikromotoru. Pomocí sterilního rypadu a tirnerfu budou zdravé a zanícené vzorky buničiny odstraněny a přeneseny do sterilních trubek Eppendorf, do kterých bude přidáno 200 ul fosfátového pufru (PBS) pH: 7,2.

Při sběru vzorků by se mělo věnovat pozornost tomu, aby je nebyla kontaminována krví a slinami; Vzorky tekutiny GCF a dentinové s podezřením na kontaminaci se opakují. Ze studie budou vyloučeni pacienti se vzorky kontaminací tkáně buničiny nebo zhoršením v podmínkách skladování. Vzorky GCF, dentinové tekutiny a tkáně buničiny přeneseny do 1,5 ml sterilní trubice Eppendorf značené kódem přiřazeným pacientovi s diagnózou a datem, s nízkou vazbou bílkovin, okamžitě udržovány na ledu, přeneseny do mrazničky a udržovány při -20 ° C. Vzorky budou přepravovány z kliniky do mrazničky při -80 ° C a uloženy v mrazáku při -80 ° C, aby se zabránilo denaturace až do další analýzy.

Proces léčby bude dokončen použitím postupů rutinního kořenového kanálu na zuby. Po odevzdání vzorků budou extrahovány zuby ve skupině zdravé buničiny s indikací pro extrakci, podrobeny normálním extrakčním postupům.

Hladiny aquaporin -4, -5, -9 a IL -8 vzorků budou analyzovány specifickým enzymově vázaným imunosorbentem (ELISA).

Data budou analyzována v počítačovém prostředí se statistickým balíčkem SPSS 28.0 (Statistický balíček pro sociální vědy, NY, USA). Výsledky budou vyhodnoceny v 95% intervalu spolehlivosti a úrovně p <0,05.