Comparação dos níveis de aquaporina -4, -5, -9 e IL -8 em amostras de gcf, líquido de dentina e polpa

Um total de 70 pacientes saudáveis ​​(Grupo 1) e sintomática irreversível (Grupo 2), com idades entre 18 e 64 anos, que passarão por tratamento de canal radicular de rotina na Universidade de Kırıkkale, Faculdade de Odontologia, Departamento de Endodontia, será incluída no estudo, com um mínimo de 35 participantes para cada grupo. Antes de iniciar o tratamento, as amostras de GCF serão coletadas de dentes e dentes diagomáticos e irreversíveis e dentes diagomáticos e irreversíveis contra esses dentes. O dente do qual a amostra do GCF será coletada será isolada com pellets de algodão. Depois que a placa supragengival é cuidadosamente removida com uma cureta sem tocar nas gengivas, o dente será seco com pressão de ar leve por 10 segundos e as tiras do periopaper serão colocadas no sulco gengival até que a resistência seja sentida. As tiras do periopaper serão removidas do sulco gengival após 1 minuto. Ao levar as amostras, deve -se tomar cuidado para não contaminar com sangue e saliva; Amostras contaminadas serão repetidas. A quantidade de GCF será medida e registrada usando o dispositivo periotron. Os equivalentes do microlitro dos valores medidos no dispositivo periotron serão registrados. As tiras de periopaper serão colocadas em tubos Eppendorf estéril de 1,5 cc. O índice gengival e as medições de profundidade da bolsa serão realizados após a realização de amostras de GCF para evitar a irritação dos tecidos periodontais e a contaminação do sangue. Pacientes com profundidade de bolso superior a 4 mm serão excluídos do estudo.

Após anestesia com 1,8 ml de articaína HCl contendo 1: 100000 epinefrina, os dentes serão isolados com barragem de borracha desinfetada com álcool a 70%. Após a desinfecção das coroas dentárias e a área circundante, com 30% de peróxido de hidrogênio e 2,5% de NaOCl, cárie e restaurações existentes, se houver, serão removidas. Nos dentes com polpa normal, as amostras de líquido de dentina serão retiradas da cavidade da dentina a aproximadamente 2 mm da polpa, conforme calculado em radiografias. A superfície da dentina dura exposta será seca com ar comprimido. Usando uma prensa estéril, 1 membrana por dente será aplicada à dentina exposta por 1 minuto e 1,5 mL será transferida para um tubo Eppendorf estéril.

O teto da câmara de celulose será removido com um cortador de moagem de aço nº 14 usando um micromotor. Usando uma escavadeira estéril e Tirnerf, amostras de polpa saudáveis ​​e inflamadas serão removidas e transferidas para tubos Eppendorf estéreis aos quais serão adicionados 200 μl de tampão de fosfato (PBS) pH: 7.2.

Ao coletar as amostras, deve -se tomar cuidado para não contaminá -las com sangue e saliva; As amostras de gcf e líquido de dentina com suspeita de contaminação serão repetidas. Pacientes com amostras com contaminação do tecido polpa ou deterioração em condições de armazenamento serão excluídos do estudo. GCF, amostras de líquido de dentina e tecidos polpa transferidos para um tubo Eppendorf estéril de 1,5 ml marcado com um código atribuído ao paciente com diagnóstico e data, com baixa ligação de proteínas, mantido imediatamente no gelo, transferido para um freezer e mantido a -20 ° C. As amostras serão transportadas da clínica para o freezer a -80 ° C e armazenadas em um freezer a -80 ° C para evitar a desnaturação até análise adicional.

O processo de tratamento será concluído aplicando procedimentos de canal radicular de rotina aos dentes. Os dentes no grupo de polpa saudáveis ​​com uma indicação de extração serão extraídos após a coleta das amostras, sujeita a procedimentos de extração normal.

Os níveis de aquaporin -4, -5, -9 e IL -8 das amostras serão analisados ​​por ensaio imunossorvente específico ligado a enzimas (ELISA).

Os dados serão analisados ​​no ambiente do computador com o programa de pacotes estatísticos SPSS 28.0 (Pacote Estatístico para as Ciências Sociais, NY, EUA). Os resultados serão avaliados em intervalo de confiança de 95% e p <0,05 nível de significância.