Confronto dei livelli di acquaporina -4, -5, -9 e IL -8 in GCF, fluido dentina e campioni di polpa

Un totale di 70 pazienti sani (gruppo 1) e sintomatica irreversibile (gruppo 2) di età compresa tra 18 e 64 anni, che sottoposti a un trattamento di routine del canale radicolare presso la Kırıkkale University, Facoltà di Odontoiatria, Dipartimento di Endodonzia, saranno inclusi nello studio, con un minimo di 35 partecipanti per ciascun gruppo. Prima di iniziare il trattamento, i campioni GCF saranno prelevati da denti e denti sani, sintomatici e irreversibili diagnosti e controlaterali a questi denti. Il dente da cui verrà prelevato il campione GCF sarà isolato con pellet di cotone. Dopo che la placca supragingival è stata attentamente rimossa con una curetta senza toccare le gengive, il dente verrà essiccato con pressione dell'aria leggera per 10 secondi e le strisce periopaper verranno posizionate nel solco gengivale fino a quando non sarà avvertita la resistenza. Le strisce periopaper verranno rimosse dal solco gengivale dopo 1 minuto. Mentre preleva i campioni, si dovrebbe fare attenzione a non contaminare con sangue e saliva; I campioni contaminati verranno ripetuti. La quantità di GCF verrà misurata e registrata utilizzando il dispositivo Peroton. Verranno registrati gli equivalenti microlitri dei valori misurati sul dispositivo Periotron. Le strisce periopaper verranno posizionate in tubi Eppendorf sterili da 1,5 cc. Verranno eseguite misurazioni dell'indice gengivale e della profondità tascabile dopo che vengono prelevati campioni GCF per prevenire l'irritazione dei tessuti parodontali e della contaminazione del sangue. I pazienti con una profondità tascabile di oltre 4 mm saranno esclusi dallo studio.

Dopo l'anestesia con l'articolo HCL da 1,8 ml contenente epinefrina 1: 100000, i denti saranno isolati con una diga in gomma disinfettata con alcol al 70%. Dopo la disinfezione delle corone dei denti e l'area circostante con perossido di idrogeno al 30% e 2,5% di NaOCl, carie e restauri esistenti, se presenti, se presenti verranno rimossi. Nei denti con polpa normale, i campioni di fluido dentina saranno prelevati dalla cavità dentina a circa 2 mm di distanza dalla polpa come calcolato sulle radiografie. La superficie della dentina dura esposta verrà essiccata con aria compressa. Usando una pressa sterile, 1 membrana per dente verrà applicata alla dentina esposta per 1 minuto e 1,5 ml verranno trasferiti in un tubo Eppendorf sterile.

Il soffitto della camera di polpa verrà rimosso con una fresa di fresatura Rond in acciaio n. 14 usando un micromotore. Usando un escavatore sterile e tirnerf, i campioni di polpa sana e infiammati verranno rimossi e trasferiti su tubi Eppendorf sterili a cui verranno aggiunti 200 μL di pH del tampone fosfato (PBS): 7,2.

Durante la raccolta dei campioni, si dovrebbe fare attenzione a non contaminarli con sangue e saliva; Verranno ripetuti campioni di fluido GCF e dentina con sospetta contaminazione. I pazienti con campioni con contaminazione del tessuto polpa o deterioramento in condizioni di conservazione saranno esclusi dallo studio. GCF, fluido dentina e campioni di tessuto polpa trasferiti in un tubo Eppendorf sterile da 1,5 ml etichettato con un codice assegnato al paziente con diagnosi e data, con basso legame proteico, mantenuto immediatamente su ghiaccio, trasferito su un congelatore e mantenuto a -20 ° C. I campioni verranno trasportati dalla clinica al congelatore a -80 ° C e conservati in un congelatore a -80 ° C per prevenire la denaturazione fino a ulteriori analisi.

Il processo di trattamento verrà completato applicando le procedure di routine del canale radicolare ai denti. I denti nel gruppo della polpa sana con un'indicazione per l'estrazione verranno estratti dopo che i campioni sono stati prelevati, sottoposti a normali procedure di estrazione.

I livelli di Aquaporin -4, -5, -9 e IL -8 dei campioni saranno analizzati da specifici test immunosorbenti con enzimi (ELISA).

I dati saranno analizzati in ambiente informatico con il programma di pacchetto statistico SPSS 28.0 (Pacchetto statistico per le scienze sociali, NY, USA). I risultati saranno valutati con un intervallo di confidenza al 95% e un livello di significatività di P <0,05.