Marcadores Inmunológicos Circulantes para la Evaluación Pronóstica en Pacientes Postoperatorios de Cáncer de Pulmón

El cáncer de pulmón de células no pequeñas (CPCNP) sigue siendo la principal causa de mortalidad relacionada con el cáncer en todo el mundo, siendo la resección quirúrgica el enfoque curativo para las etapas tempranas a intermedias. Sin embargo, las tasas de recurrencia posoperatoria son altas en los estadios IB (con características de alto riesgo como tumor >4 cm, mala diferenciación, invasión de la pleura visceral, invasión vascular o resección en cuña) a IIIB, lo que requiere herramientas pronósticas mejoradas más allá de la estadificación TNM para optimizar terapias adyuvantes como quimioterapia o inmunoterapia.

Este estudio investiga marcadores inmunes en sangre periférica como indicadores pronósticos no invasivos. Las células T efectoras específicas de antígeno (ETAST) se identifican mediante citometría de flujo multiparamétrica, coexpresando CD137 (un marcador de activación de células T) e IFN-γ (una citocina efectora) tras la estimulación ex vivo con antígenos asociados a tumores. La proporción de células T efectoras a células T reguladoras (Teff/Treg) refleja la homeostasis inmune sistémica, con desequilibrios que promueven la evasión inmune del tumor.

Las muestras de sangre (aproximadamente 10 mL) se recogen preoperatoriamente mediante venopunción y se procesan en 4 horas. Las células mononucleares de sangre periférica (PBMC) se aíslan mediante centrifugación en gradiente de densidad Ficoll. Para la detección de ETAST, las PBMC se someten a estimulación con un grupo de péptidos de antígenos comunes de CPCNP (p. ej., NY-ESO-1, MAGE-A3) durante 6 horas en presencia de brefeldina A, seguido de tinción intracelular y análisis en un citómetro de flujo BD FACSCanto II. Las células Teff se definen como células T CD4+ o CD8+ que expresan IFN-γ, TNF-α o IL-2; las células Treg como CD4+CD25+FoxP3+. La adquisición de datos apunta a al menos 100.000 eventos por muestra, con análisis usando el software FlowJo.

El seguimiento incluye evaluaciones clínicas cada 3 meses durante los primeros 2 años, luego cada 6 meses hasta 3 años, monitoreando la recurrencia mediante tomografías computarizadas, PET-TC si está indicado, y puntos finales de supervivencia. Los análisis exploratorios pueden incorporar secuenciación de próxima generación para mutaciones conductoras (p. ej., EGFR, ALK) de tejido tumoral para correlacionar con perfiles inmunes.

Las consideraciones éticas priorizan la seguridad de los participantes, con todos los procedimientos aprobados por la junta de revisión institucional. Los datos se anonimizan y almacenan de forma segura, cumpliendo con los estándares BPC.