Циркулирующие иммунные маркеры для прогностической оценки у послеоперационных пациентов с раком легкого

Немелкоклеточный рак лёгкого (НМРЛ) остаётся основной причиной смертности, связанной с раком, во всём мире, при этом хирургическая резекция служит радикальным методом лечения на ранних и промежуточных стадиях. Однако показатели послеоперационного рецидива высоки на стадиях от IB (с признаками высокого риска, такими как опухоль >4 см, низкая дифференцировка, инвазия висцеральной плевры, сосудистая инвазия или краевая резекция) до IIIB, что требует улучшения прогностических инструментов помимо стадирования по системе TNM для оптимизации адъювантной терапии, такой как химиотерапия или иммунотерапия.

Это исследование изучает иммунные маркеры периферической крови как неинвазивные прогностические индикаторы. Антиген-специфические эффекторные Т-клетки (ЭТК) идентифицируются с помощью мультипараметрической проточной цитометрии, коэкспрессируя CD137 (маркер активации Т-клеток) и IFN-γ (эффекторный цитокин) после ex vivo стимуляции опухолеассоциированными антигенами. Соотношение эффекторных Т-клеток к регуляторным Т-клеткам (ЭТК/Трег) отражает системный иммунный гомеостаз, при этом дисбалансы способствуют уклонению опухоли от иммунного ответа.

Образцы крови (примерно 10 мл) собираются предоперационно путём венепункции и обрабатываются в течение 4 часов. Мононуклеарные клетки периферической крови (МКПК) выделяются с использованием центрифугирования в градиенте плотности фиколла. Для детекции ЭТК МКПК подвергаются стимуляции пулом пептидов общих антигенов НМРЛ (например, NY-ESO-1, MAGE-A3) в течение 6 часов в присутствии брефельдина А, с последующим внутриклеточным окрашиванием и анализом на проточном цитометре BD FACSCanto II. Эффекторные Т-клетки определяются как CD4+ или CD8+ Т-клетки, экспрессирующие IFN-γ, TNF-α или IL-2; регуляторные Т-клетки — как CD4+CD25+FoxP3+. Сбор данных нацелен на минимум 100 000 событий на образец, с анализом с использованием программного обеспечения FlowJo.

Наблюдение включает клинические оценки каждые 3 месяца в первые 2 года, затем каждые 6 месяцев до 3 лет, с мониторингом рецидива с помощью КТ, ПЭТ-КТ при показаниях, и регистрацией конечных точек по выживаемости. Разведочные анализы могут включать секвенирование нового поколения для драйверных мутаций (например, EGFR, ALK) из опухолевой ткани для корреляции с иммунными профилями.

Этические соображения отдают приоритет безопасности участников, все процедуры одобрены институциональным наблюдательным советом. Данные обезличены и хранятся безопасно, соответствуя стандартам GCP.