Proteiinien vaikutus karotenoidien biologiseen hyötyosuuteen (CAROPROT)

Osallistujat, jotka suostuvat allekirjoittamaan tietoisen suostumuslomakkeen ja katsotaan osallistumiskelpoisiksi, ajoitetaan ensimmäiselle ja lyhyelle seulontakäynnille ilmoittautumiskäynnille, jossa otetaan talteen virtsa- ja verinäyte (20 ml), joiden tarkoituksena on tarkistaa koehenkilön aneeminen ja analysoida sokeritasoja sekä plasman lipidejä, kuten triglyseridejä, jotta voidaan seuloa mikä tahansa epänormaali terveystila (esim. diabeteksen puhkeaminen), joista he eivät ehkä olleet tietoisia tiedotustilaisuuden ajankohtana ja jotka eivät välttämättä tee heistä kelvollisia osallistumaan tähän tutkimukseen.

Jos osallistujat katsotaan tässä vaiheessa vielä kelvollisiksi tutkimukseen, osallistujat aloittavat 4 viikon koevaiheen, joka sisältää 3 pesujaksoa, 1 lyhyen seulontakäynnin ja 3 koko päivää (ts. 10,5 tuntia) kliiniset käynnit. Seulontakäynti, jota kutsutaan esikäynniksi, tehdään koevaiheen alussa. Verinäyte kerätään triglyseridien ja plasman karotenoidien perustason määrittämiseksi kokeen alussa, ennen ensimmäistä pesuvaihetta.

Ensimmäinen pesuviikko alkaa 1. päivänä alustavan käynnin jälkeen ja kestää 14 päivää, jonka aikana osallistujia pyydetään noudattamaan vähäkarotenoidista ruokavaliota (eli välttämään värillisten hedelmien ja vihannesten syöntiä) veressä kiertävien karotenoidien perustasot.

Clinical and Epidemiological Investigation Centerin (CIEC) 1-päiväisten tapaamisten aikana osallistujille annetaan yksi kolmesta testiateriasta kuudessa eri tilauksessa, jolloin tehdään 6 hoitomallia. Olettaen, että kaikki 24 osallistujaa rekrytoidaan onnistuneesti, meillä on 4 satunnaisesti jaettua osallistujaa mallia kohden.

Kliinisinä käyntipäivinä osallistujia pyydetään ilmoittautumaan CIEC:n tiloihin klo 7.30 alkaen, ja lähtötilanteen verinäyte (20 ml) otetaan 0 tunnin kohdalla. Koulutettu sairaanhoitaja asettaa osallistujan kyynärvarteen kanyylin, joka jätetään paikalleen koko oleskelun ajan osallistujan hyödykkeelle.

Välittömästi perusverenoton jälkeen koe-ateria, joka koostuu porkkana-tomaattimehun seoksesta (yhteensä 350 ml), johon lisätään 5 ml maapähkinäöljyä, 40 g paahdettua leipää (valkovehnää, 10 g margariinia) plus 20 g kermajuustoa) ja lasillinen vettä (n. 300 ml), joka voi sisältää tai ei sisällä 30 g proteiineja (joko kasviperäistä proteiinia tai maitopohjaista proteiineja). Koko testiateria tulee syödä 30 minuutin sisällä valvonnassa.

Aterian jälkeisiä verinäytteitä (20 ml kukin) kerätään määrätyin väliajoin (ennen, 2h, 3h, 4h, 5h). 6h, 8h ja 10h koeaterian jälkeen). Osallistujat saavat standardoidun lounaan 4 tuntia testiaterian nauttimisen jälkeen (n. klo 12.00), joka koostuu paahdetusta voileivästä (valkoinen vehnäleipä, n. 60 g), n. 60 g kalkkunaa ja margariinia leivän päälle levitettäväksi (n. 10 g), kreikkalainen jogurtti (140 g) ja pieni omena. Kohteliaisuusateria 10 tuntia testiaterian nauttimisen jälkeen päivällisellä ja käynnin lopussa. Muita ruokia tai juomia, paitsi vettä (ad libitum), ei sallita päivän aikana (mukaan lukien aamiaisen ja lounaan aikana, jos halutaan).

Tätä ensimmäistä kliinistä käyntiä seuraa 1 viikon pesujakso, jonka aikana hän jatkaa vähäkarotenoidista ruokavaliota (3. viikko pesudieettiä). Kolmannen pesuviikon lopussa järjestetään toinen vastaanotto LIH:n kliinisessä keskuksessa. Tämän päivän menettely on sama kuin edellä. Toista vastaanottoa seuraa neljäs ja viimeinen pesuviikko, ja lopussa osallistujalla on kolmas ja viimeinen vastaanotto Luxembourg Institute of Healthin (LIH) kliinisessä keskuksessa, joka on identtinen muiden käyntien kanssa. Kaikilta poistumisjaksoilta osallistujia pyydetään täyttämään päivittäin tarjottu ruokapäiväkirja, johon he kirjaavat päivän aikana syömänsä. Tämän avulla tarkistetaan huuhtoutumisajan noudattaminen ja henkilötietojen parempi tulkinta.

Ulosteiden kerääminen: Rajatusta määrästä koehenkilöitä (n = 6) näytteet otetaan kaikkien kolmen testiaterian jälkeen. Tätä tarkoitusta varten osallistujille luovutetaan keräysastiat ja muoviset clip-pussit ja -kassit. Myös jäähdytyselementeillä varustettuja laatikoita jakkarakeräystä varten toimitetaan. Osallistujille jaetaan myös kuusi ulosteen värimerkkiä. Jokaista kliinistä käyntiä kohden tarvitaan kaksi ulostemerkkiainetta. Keräys aloitetaan ensimmäisen ulosteen värimarkkerin (kirkassininen) erittymisestä, joka otetaan paastojakson alussa eli jokaista kliinistä päivää edeltävänä päivänä. Keräystä jatketaan toisen ulosteen merkkiaineen erittymiseen, joka tulee ottaa jokaista kliinistä käyntiä seuraavan päivän aamuna (ennen aamiaista). Näytteet palautetaan kliinisen testipäivän jälkeen heti, kun viimeinen ulostemerkkiaine on erittynyt (jolloin saadaan tavallisesti 2–3 päivän täydellisiä ulostenäytteitä), ja LIH:n henkilökunta voi tarvittaessa kerätä ne kerran välissä.