Influencia de las proteínas en la biodisponibilidad de los carotenoides (CAROPROT)

A los participantes que acepten firmar el Formulario de consentimiento informado y se consideren elegibles para participar se les programará una primera y breve visita de selección (visita de inscripción) para recolectar una muestra de orina y sangre (20 ml) destinadas a verificar el estado anémico de los sujetos y analizar los niveles de azúcar, así como los lípidos plasmáticos, como los triglicéridos, para detectar cualquier condición de salud anormal (p. aparición de diabetes) que quizás no conozcan en la fecha de la sesión informativa y que quizás no los haga elegibles para este estudio.

Si en esta etapa todavía se consideran elegibles para el estudio, los participantes comenzarán la fase de prueba de 4 semanas que incluye 3 períodos de lavado, 1 visita de selección corta y 3 días completos (es decir, 10,5 horas) visitas clínicas. La visita de selección, denominada visita preliminar, tendrá lugar al inicio de la fase de prueba. Se recolectará una muestra de sangre para determinar los niveles de referencia de triglicéridos y carotenoides en plasma al comienzo de la prueba, antes de la primera fase de lavado.

La primera semana de lavado comienza el día 1 después de la visita preliminar y tendrá una duración de 14 días durante los cuales se pedirá a los participantes que sigan una dieta baja en carotenoides (es decir, evitar la ingesta de frutas y verduras de colores), para reducir la niveles basales de carotenoides circulantes en la sangre.

Durante las citas de 1 día en el Centro de Investigaciones Clínicas y Epidemiológicas (CIEC), se les dará a los participantes una de las tres comidas de prueba en 6 órdenes diferentes, haciendo 6 patrones de tratamiento. Suponiendo que los 24 participantes se recluten con éxito, tendremos 4 participantes asignados al azar por patrón.

En los días de visita clínica, se solicitará a los participantes que se presenten en las instalaciones del CIEC, a partir de las 7:30 a. m., y se tomará una muestra de sangre inicial (20 ml) a las 0 h. Una enfermera capacitada insertará una cánula en el antebrazo del participante que se dejará colocada durante toda la estadía para comodidad del participante.

Inmediatamente después de la extracción de sangre basal, se realizará una comida de prueba compuesta por una mezcla de zumo de zanahoria y tomate (350 mL en total), a la que se le añadirán 5 mL de aceite de cacahuete, 40 g de pan tostado (trigo blanco, con 10 g de margarina más 20 g de queso crema) y un vaso de agua (aprox. Se servirán 300 ml) que pueden o no contener 30 g de proteínas (ya sea una proteína de origen vegetal o proteínas de origen lácteo). La comida de prueba completa debe consumirse dentro de los 30 minutos, bajo supervisión.

Las muestras de sangre posprandiales (20 ml cada una) se recogerán a intervalos de tiempo (antes, 2h, 3h, 4h, 5h. 6h, 8h y 10h después de la ingesta de comida de prueba). Los participantes recibirán un almuerzo estandarizado 4 horas después de la ingesta de comida de prueba (aprox. 12:00 h), consistente en un bocadillo tostado (pan de trigo blanco, ca 60 g), con ca. 60 g de pavo con un poco de margarina para untar en el pan (aprox. 10 g), un yogur griego (140 g) y una manzana pequeña. Una comida de cortesía 10 horas después de la ingesta de la comida de prueba para la cena y al final de la visita. No se permitirán otros alimentos o bebidas excepto agua (ad libitum) durante el día (incluso durante el desayuno y el almuerzo si se desea).

A esta primera cita clínica le seguirá un período de lavado de 1 semana, durante el cual continuará con una dieta baja en carotenoides (tercera semana de dieta de lavado). Al final de la 3ra semana de lavado, se realizará la segunda cita en el centro clínico LIH. El procedimiento para este día es el mismo que se mencionó anteriormente. A la segunda cita le sigue la cuarta y última semana de lavado y, al final, el participante tendrá la tercera y última cita en el centro clínico del Instituto de Salud de Luxemburgo (LIH), que será idéntica a las otras visitas. Para todos los períodos de lavado, se les pedirá a los participantes que llenen diariamente un diario de alimentos proporcionado, donde anotarán lo que han comido durante el día. Esto se utilizará para verificar el cumplimiento del período de lavado e interpretar mejor los datos personales.

Recolección de heces: para un número limitado de sujetos (n = 6), las muestras se recolectarán después de la ingesta de las 3 comidas de prueba. Para ello, se entregarán a los participantes Contenedores para la recogida y bolsas y bolsas de plástico. Asimismo, se entregarán cajas con elementos refrigerantes para la recogida de heces. Además, se proporcionarán seis marcadores de colores fecales a los participantes. Para cada visita clínica, se necesitan dos marcadores fecales. Las recolecciones comenzarán a partir de la excreción del primer marcador de color fecal (azul brillante) que se tomará al inicio del período de ayuno, es decir, el día anterior a cada día clínico. La recolección continuará hasta la excreción del segundo marcador fecal que deberá tomarse en la mañana del día siguiente a cada visita clínica (antes del desayuno). Las muestras se devolverán después del día de la prueba clínica tan pronto como se haya excretado el último marcador fecal (lo que normalmente resulta en muestras fecales completas de 2 a 3 días), y el personal del LIH podría recolectarlas una vez en el medio si es necesario.