Influência das Proteínas na Biodisponibilidade dos Carotenóides (CAROPROT)

Os participantes que concordarem em assinar o Termo de Consentimento Livre e Esclarecido e forem considerados elegíveis para participação serão agendados para uma primeira e breve visita de triagem (visita de inscrição) para coletar uma amostra pontual de urina e sangue (20 ml) destinada a verificar o estado anêmico do indivíduo e analisar os níveis de açúcar, bem como os lipídios plasmáticos, como triglicerídeos, a fim de rastrear qualquer condição de saúde anormal (por exemplo, início do diabetes) que eles podem não estar cientes na data da sessão de informações e que podem não torná-los elegíveis para este estudo.

Se nesta fase ainda forem considerados elegíveis para o estudo, os participantes iniciarão a fase experimental de 4 semanas, que inclui 3 períodos de washout, 1 visita de triagem curta e 3 dias completos (ou seja, 10,5 horas) visitas clínicas. A visita de triagem, denominada visita preliminar, ocorrerá no início da fase experimental. Uma amostra de sangue será coletada para determinar os níveis basais de triglicerídeos e carotenóides plasmáticos no início do teste, antes da primeira fase de lavagem.

A primeira semana de washout começa no dia 1 após a visita preliminar e terá uma duração de 14 dias durante os quais os participantes serão solicitados a manter uma dieta pobre em carotenóides (ou seja, evitar a ingestão de frutas e vegetais coloridos), para reduzir o níveis basais de carotenóides circulantes no sangue.

Durante as consultas de 1 dia no Centro de Investigação Clínica e Epidemiológica (CIEC), será dada aos participantes uma das três refeições de teste em 6 ordens diferentes, perfazendo 6 padrões de tratamento. Supondo que todos os 24 participantes sejam recrutados com sucesso, teremos 4 participantes alocados aleatoriamente por padrão.

Nos dias de visita clínica, os participantes serão convidados a se apresentar nas instalações do CIEC, a partir das 7h30, e uma amostra de sangue basal (20 ml) será coletada às 0h. Uma enfermeira treinada irá inserir uma cânula no antebraço do participante que será deixada no local durante toda a estadia para comodidade do participante.

Imediatamente após a coleta de sangue basal, uma refeição teste composta por uma mistura de suco de cenoura e tomate (350 mL no total), à qual serão adicionados 5 mL de óleo de amendoim, 40 g de pão torrado (trigo branco, com 10 g de margarina mais 20 g de queijo creme) e um copo de água (aprox. 300 mL) que pode ou não conter 30 g de proteínas (uma proteína vegetal ou uma proteína láctea). Toda a refeição teste deve ser ingerida em até 30 minutos, sob supervisão.

Amostras de sangue pós-prandial (20 ml cada) serão coletadas em intervalos cronometrados (antes, 2h, 3h, 4h, 5h. 6h, 8h e 10h após ingestão da refeição teste). Os participantes receberão um almoço padronizado 4 horas após a ingestão da refeição de teste (c.a. 12h00), composta por uma tosta (pão de trigo branco, ca 60 g), com ca. 60 g de peru com um pouco de margarina para passar no pão (cerca de 10 g), um iogurte grego (140 g) e uma maçã pequena. Uma refeição de cortesia 10 horas após a ingestão da refeição teste para o jantar e no final da visita. Nenhum outro alimento ou bebida exceto água (ad libitum) será permitido durante o dia (inclusive durante o café da manhã e almoço, se desejado).

Esta primeira consulta clínica será seguida por um período de washout de 1 semana, durante o qual ele/ela continuará com uma dieta pobre em carotenóides (3ª semana de dieta washout). Ao final da 3ª semana de washout, será realizada a segunda consulta no centro clínico do LIH. O procedimento para este dia é o mesmo mencionado acima. À segunda consulta segue-se a 4ª e última semana de washout e no final o participante terá a 3ª e última consulta no centro clínico do Luxembourg Institute of Health (LIH), que será idêntico às restantes consultas. Durante todos os períodos de washout será solicitado aos participantes o preenchimento diário de um diário alimentar fornecido, onde anotarão o que comeram durante o dia. Isso será usado para verificar o cumprimento do período de washout e interpretar melhor os dados pessoais.

Coleta de fezes: Para um número limitado de indivíduos (n=6), as amostras serão coletadas após a ingestão de todas as 3 refeições de teste. Para o efeito, serão entregues aos participantes Contentores de recolha e clip-bags e sacos de plástico. Da mesma forma, serão fornecidas caixas com elementos de resfriamento para coleta de fezes. Além disso, seis marcadores fecais serão fornecidos aos participantes. Para cada visita clínica, são necessários dois marcadores fecais. As coletas terão início a partir da excreção do primeiro marcador de cor fecal (azul brilhante) que será colhido no início do período de jejum, ou seja, na véspera de cada dia clínico. A coleta seguirá para a excreção do segundo marcador fecal que deverá ser colhido na manhã do dia seguinte a cada consulta clínica (antes do café da manhã). As amostras serão devolvidas após o dia do teste clínico, assim que o último marcador fecal for excretado (normalmente resultando em amostras fecais completas de 2 a 3 dias) e podem ser coletadas uma vez pelo pessoal do LIH, se necessário.