Bakteerien translokaatiomarkkerit tarttuvien ja tulehduksellisten komplikaatioiden ennustajina akuutissa suolen tukkeutumisessa
Bakteerien translokaatiomarkkerien prognostinen merkitys infektio- ja tulehduksellisten komplikaatioiden ennustajana akuutissa mekaanisessa suolen tukkeutumassa
Huolimatta nykyaikaisista lähestymistavoista akuutin suolitukoksen (ABO) diagnosointiin ja hoitoon, leikkauksen jälkeinen kuolleisuus vaihtelee 5–32 prosentissa ja komplikaatioita esiintyy jopa 23 prosentissa tapauksista. Yksi ABO:n valtavista tarttuvista ja tulehduksellisista komplikaatioista on sepsis. ABO:n sepsiksen kehittymisen pääkomponentti on bakteerien translokaatio (BT). BT on suolistobakteerien tai niiden tuotteiden kulkeutuminen suoliston limakalvon kautta suoliliepeen imusolmukkeisiin ja edelleen normaalisti steriileihin kudoksiin ja elimiin.
Nykyään BT:n havaitsemiseen on useita menetelmiä:
- suora menetelmä - 16s rRNA:n (ribosomaalisen ribonukleiinihapon) havaitseminen suoliliepeen imusolmukkeissa (MLN);
- epäsuora menetelmä - seerumin lipopolysakkaridia sitovan proteiinin (LBP) ja presepsiinin (liukoinen CD14-alatyyppi tai sCD14-ST) havaitseminen.
Tämän tutkimuksen tavoitteena on määrittää bakteerien translokaation diagnostinen ja prognostinen merkitys komplikaatioiden kehittymisen ennustajana potilailla, joilla on pahanlaatuinen ja hyvänlaatuinen akuutti suolitukos arvioimalla biomarkkerien suhdetta systeemisessä verenkierrossa (LBP, sCD14-ST) mikro-organismigeenien (16s rRNA) havaitseminen suoliliepeen imusolmukkeissa.
Tutkimuksen yleiskatsaus
Tila
Ehdot
Interventio / Hoito
Yksityiskohtainen kuvaus
Infektio- ja tulehduksellisten komplikaatioiden varhaista diagnosointia varten on tarpeen tutkia LBP:tä, sCD-14:ää ja 16sRNA:ta bakteerien translokaatiomarkkereina potilailla, joilla on pahanlaatuinen ja hyvänlaatuinen akuutti suolen tukkeuma, sekä potilailla, joilla on suunniteltu paksusuolen kasvainten kirurginen toimenpide. Veriseerumin bakteerien translokaation biomarkkereissa tehtyjen muutosten perusteella on ehdotettu, että potilaat, joilla on tutkittu patologia, voidaan jakaa tarttuvien ja tulehduskomplikaatioiden kehittymisriskin mukaan.
Tutkimusmateriaalina ovat veriseerumi ja suoliliepeen imusolmukkeet (MLN). Laskimoverinäytteet otetaan 1 tunti ennen leikkausta, 24 ja 72 tuntia sen jälkeen. Laskimoveri kerätään 5 ml:n tyhjiöastioihin, joissa on hyytymisaktivaattori ja seerumigeelinerotin. Sitä sentrifugoidaan 20 minuuttia 1000 x g:ssä, minkä jälkeen geeli erottaa seerumin kokonaan hyytymisestä muodostaen tiukan esteen. ELISA Kit lipopolysakkaridia sitovalle proteiinille (LBP, ihminen) ja presepsiinille (sCD14-ST, ihminen), Cloud-Clone Corp.:lta käytetään LBP:n ja sCD14-ST:n esiintymisen määrittämiseen. Analyysi suoritetaan valmistajan ohjeiden mukaisesti BioRadin ELISA EVOLIS -robottijärjestelmälle.
Leikkauskirurgi suorittaa MLN-näytteenoton steriileissä olosuhteissa leikkauksen aikana sen jälkeen, kun suolen resektio bruttonäytteen suoliliepestä. MLN asetetaan steriiliin putkeen ilman täyteaineita. DNA uutetaan Thermo Fisher Scientificin, USA:n valmistamalla GeneJET Genomic DNA Purification Kitillä valmistajan ohjeiden mukaisesti. MLN:n 16s rRNA -bakteerit havaitaan käyttämällä reaaliaikaista PCR:ää ja BIO-RAD CFX96 -vahvistinta 16s rRNA:n eteenpäin ja käänteisalukkeilla (U16SRT-F FACTCCTACGGGAGGGAGGCAGGT ja U16SRT-R TATTACCGCGGCCTGCTGGGGGGG).
Toteutuksen aikana käytetään voittoa tavoittelemattoman tutkimuskeskuksen yhteiskäytön laboratorion "Karaganda Medical University" resursseja.
Tätä tutkimusta rahoittaa Kazakstanin tasavallan opetus- ja tiedeministeriön tiedekomitea (apuraha nro AP09260597).
Opintotyyppi
Ilmoittautuminen (Todellinen)
Yhteystiedot ja paikat
Opiskelupaikat
-
-
-
Karaganda, Kazakstan, 100000
- NJSC Karaganda Medical University
-
-
Osallistumiskriteerit
Kelpoisuusvaatimukset
Opintokelpoiset iät
Hyväksyy terveitä vapaaehtoisia
Näytteenottomenetelmä
Tutkimusväestö
Kuvaus
Sisällyttämiskriteerit:
- potilaat, joilla on pahanlaatuinen akuutti suolitukos,
- potilaat, joilla on hyvänlaatuinen akuutti suolitukos,
- kolorektaalisyöpäpotilaat, joilla ei ole akuuttia suolitukosta (suunnitellut leikkaukset).
Poissulkemiskriteerit:
- ikä alle 18,
- raskaus,
- potilaat, joilla on paralyyttinen akuutti suolitukos,
- potilaat, joilla on HIV-infektio, maksakirroosi,
- potilas, jolla on jonkin muun patologian aiheuttama tarttuva prosessi.
Opintosuunnitelma
Miten tutkimus on suunniteltu?
Suunnittelun yksityiskohdat
Kohortit ja interventiot
Ryhmä/Kohortti |
Interventio / Hoito |
|---|---|
|
Pahanlaatuinen ABO
60 potilasta, joilla on pahanlaatuinen akuutti suolitukos
|
Määritä LBP:n esiintyminen veren seerumissa ELISA-menetelmällä 1 tunti ennen leikkausta, 24 ja 72 tuntia sen jälkeen.
Määritä sCD14-ST:n esiintyminen veren seerumissa ELISA-menetelmällä 1 tunti ennen leikkausta, 24 ja 72 tuntia sen jälkeen.
Määritä 16s rRNA:n mahdollinen esiintyminen suoliliepeen imusolmukkeissa PCR-menetelmällä.
|
|
CRC ilman ABO:ta (ohjaus)
60 kolorektaalisyöpäpotilasta, joilla ei ole akuuttia suolen tukkeumaa (suunnitellut leikkaukset)
|
Määritä LBP:n esiintyminen veren seerumissa ELISA-menetelmällä 1 tunti ennen leikkausta, 24 ja 72 tuntia sen jälkeen.
Määritä sCD14-ST:n esiintyminen veren seerumissa ELISA-menetelmällä 1 tunti ennen leikkausta, 24 ja 72 tuntia sen jälkeen.
Määritä 16s rRNA:n mahdollinen esiintyminen suoliliepeen imusolmukkeissa PCR-menetelmällä.
|
|
Hyvänlaatuinen ABO
30 potilasta, joilla on hyvänlaatuinen akuutti suolitukos
|
Määritä LBP:n esiintyminen veren seerumissa ELISA-menetelmällä 1 tunti ennen leikkausta, 24 ja 72 tuntia sen jälkeen.
Määritä sCD14-ST:n esiintyminen veren seerumissa ELISA-menetelmällä 1 tunti ennen leikkausta, 24 ja 72 tuntia sen jälkeen.
Määritä 16s rRNA:n mahdollinen esiintyminen suoliliepeen imusolmukkeissa PCR-menetelmällä.
|
Mitä tutkimuksessa mitataan?
Ensisijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
Muutos niiden osallistujien lukumäärässä, joilla on leikkauksen jälkeisiä infektio- ja tulehduskomplikaatioita
Aikaikkuna: Kerran (jos sairaalahoidon aikana ilmenee komplikaatioita - 7 - 28 päivää)
|
Kaikki infektio- ja tulehdukselliset komplikaatiot leikkauksen jälkeen (haavan märkiminen, anastomoosivuoto, vatsan paiseet, vatsakalvontulehdus, sepsis jne.)
|
Kerran (jos sairaalahoidon aikana ilmenee komplikaatioita - 7 - 28 päivää)
|
Toissijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
LBP-taso seerumin veressä
Aikaikkuna: 1 tunti ennen leikkausta, 72 tuntia leikkauksen jälkeen
|
LBP-tasoja verrataan ryhmien/alaryhmien välillä ja jokaisessa ryhmässä/alaryhmässä dynaamisesti.
|
1 tunti ennen leikkausta, 72 tuntia leikkauksen jälkeen
|
|
sCD14-ST-taso seerumin veressä
Aikaikkuna: 1 tunti ennen leikkausta, 72 tuntia leikkauksen jälkeen
|
sCD14-ST-tasoja verrataan ryhmien/alaryhmien välillä ja kussakin ryhmässä/alaryhmässä dynaamisesti.
|
1 tunti ennen leikkausta, 72 tuntia leikkauksen jälkeen
|
|
16s rRNA suoliliepeen imusolmukkeissa
Aikaikkuna: Kerran (MLN-näytteenotto steriileissä olosuhteissa leikkauksen aikana)
|
16s rRNA:n läsnäoloa tai puuttumista suoliliepeen imusolmukkeissa verrataan ryhmien/alaryhmien välillä.
|
Kerran (MLN-näytteenotto steriileissä olosuhteissa leikkauksen aikana)
|
Yhteistyökumppanit ja tutkijat
Sponsori
Yhteistyökumppanit
Tutkijat
- Opintojen puheenjohtaja: Yemek Turgunov, Pr., NJSC Karaganda Medical University
- Päätutkija: Alina Ogizbayeva, PhD student, NJSC Karaganda Medical University
- Päätutkija: Lyudmila Akhmaltdinova, PhD, NJSC Karaganda Medical University
- Päätutkija: Kairat Shakeyev, Pr., NJSC Karaganda Medical University
- Päätutkija: Dmitry Matyushko, PhD, Multidisciplinary hospital No. 1 of Karaganda
- Päätutkija: Miras Mugazov, PhD, NJSC Karaganda Medical University
- Päätutkija: Asylbek Zhumakaev, Master, Multidisciplinary hospital No. 3 of Karaganda
- Päätutkija: Irina Kadyrova, PhD, NJSC Karaganda Medical University
Julkaisuja ja hyödyllisiä linkkejä
Yleiset julkaisut
- Stehle JR Jr, Leng X, Kitzman DW, Nicklas BJ, Kritchevsky SB, High KP. Lipopolysaccharide-binding protein, a surrogate marker of microbial translocation, is associated with physical function in healthy older adults. J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 2012 Nov;67(11):1212-8. doi: 10.1093/gerona/gls178. Epub 2012 Sep 7.
- Taylor MR, Lalani N. Adult small bowel obstruction. Acad Emerg Med. 2013 Jun;20(6):528-44. doi: 10.1111/acem.12150.
- Levy M, Kolodziejczyk AA, Thaiss CA, Elinav E. Dysbiosis and the immune system. Nat Rev Immunol. 2017 Apr;17(4):219-232. doi: 10.1038/nri.2017.7. Epub 2017 Mar 6.
- Gore RM, Silvers RI, Thakrar KH, Wenzke DR, Mehta UK, Newmark GM, Berlin JW. Bowel Obstruction. Radiol Clin North Am. 2015 Nov;53(6):1225-40. doi: 10.1016/j.rcl.2015.06.008.
- Roses RE, Folkert IW, Krouse RS. Malignant Bowel Obstruction: Reappraising the Value of Surgery. Surg Oncol Clin N Am. 2018 Oct;27(4):705-715. doi: 10.1016/j.soc.2018.05.010. Epub 2018 Jul 21.
- Shwaartz C, Fields AC, Prigoff JG, Aalberg JJ, Divino CM. Should patients With obstructing colorectal cancer have proximal diversion? Am J Surg. 2017 Apr;213(4):742-747. doi: 10.1016/j.amjsurg.2016.08.005. Epub 2016 Sep 2.
- Chiu HC, Lin YC, Hsieh HM, Chen HP, Wang HL, Wang JY. The impact of complications on prolonged length of hospital stay after resection in colorectal cancer: A retrospective study of Taiwanese patients. J Int Med Res. 2017 Apr;45(2):691-705. doi: 10.1177/0300060516684087. Epub 2017 Feb 7.
- Simillis C, Kalakouti E, Afxentiou T, Kontovounisios C, Smith JJ, Cunningham D, Adamina M, Tekkis PP. Primary Tumor Resection in Patients with Incurable Localized or Metastatic Colorectal Cancer: A Systematic Review and Meta-analysis. World J Surg. 2019 Jul;43(7):1829-1840. doi: 10.1007/s00268-019-04984-2.
- Wancata LM, Abdelsattar ZM, Suwanabol PA, Campbell DA Jr, Hendren S. Outcomes After Surgery for Benign and Malignant Small Bowel Obstruction. J Gastrointest Surg. 2017 Feb;21(2):363-371. doi: 10.1007/s11605-016-3307-8. Epub 2016 Oct 25.
- Stubljar D, Skvarc M. Effective Strategies for Diagnosis of Systemic Inflammatory Response Syndrome (SIRS) due to Bacterial Infection in Surgical Patients. Infect Disord Drug Targets. 2015;15(1):53-6. doi: 10.2174/1871526515666150320161804.
- Piton G, Capellier G. Biomarkers of gut barrier failure in the ICU. Curr Opin Crit Care. 2016 Apr;22(2):152-60. doi: 10.1097/MCC.0000000000000283.
- Tsujimoto H, Ono S, Mochizuki H. Role of translocation of pathogen-associated molecular patterns in sepsis. Dig Surg. 2009;26(2):100-9. doi: 10.1159/000206143. Epub 2009 Mar 2.
- MacFie J, Reddy BS, Gatt M, Jain PK, Sowdi R, Mitchell CJ. Bacterial translocation studied in 927 patients over 13 years. Br J Surg. 2006 Jan;93(1):87-93. doi: 10.1002/bjs.5184.
- Fang L, Xu Z, Wang GS, Ji FY, Mei CX, Liu J, Wu GM. Directed evolution of an LBP/CD14 inhibitory peptide and its anti-endotoxin activity. PLoS One. 2014 Jul 15;9(7):e101406. doi: 10.1371/journal.pone.0101406. eCollection 2014.
- Kell DB, Pretorius E. On the translocation of bacteria and their lipopolysaccharides between blood and peripheral locations in chronic, inflammatory diseases: the central roles of LPS and LPS-induced cell death. Integr Biol (Camb). 2015 Nov;7(11):1339-77. doi: 10.1039/c5ib00158g.
- Mussap M, Noto A, Fravega M, Fanos V. Soluble CD14 subtype presepsin (sCD14-ST) and lipopolysaccharide binding protein (LBP) in neonatal sepsis: new clinical and analytical perspectives for two old biomarkers. J Matern Fetal Neonatal Med. 2011 Oct;24 Suppl 2:12-4. doi: 10.3109/14767058.2011.601923.
- van Maldeghem I, Nusman CM, Visser DH. Soluble CD14 subtype (sCD14-ST) as biomarker in neonatal early-onset sepsis and late-onset sepsis: a systematic review and meta-analysis. BMC Immunol. 2019 Jun 3;20(1):17. doi: 10.1186/s12865-019-0298-8.
- Hosomi S, Yamagami H, Itani S, Yukawa T, Otani K, Nagami Y, Tanaka F, Taira K, Kamata N, Tanigawa T, Shiba M, Watanabe T, Fujiwara Y. Sepsis Markers Soluble IL-2 Receptor and Soluble CD14 Subtype as Potential Biomarkers for Complete Mucosal Healing in Patients With Inflammatory Bowel Disease. J Crohns Colitis. 2018 Jan 5;12(1):87-95. doi: 10.1093/ecco-jcc/jjx124.
- Endo S, Suzuki Y, Takahashi G, Shozushima T, Ishikura H, Murai A, Nishida T, Irie Y, Miura M, Iguchi H, Fukui Y, Tanaka K, Nojima T, Okamura Y. Presepsin as a powerful monitoring tool for the prognosis and treatment of sepsis: a multicenter prospective study. J Infect Chemother. 2014 Jan;20(1):30-4. doi: 10.1016/j.jiac.2013.07.005. Epub 2013 Dec 11.
Hyödyllisiä linkkejä
- Mierzchala M, Krzystek-Korpacka M, Gamian A, Durek G. Quantitative indices of dynamics in concentrations of lipopolysaccharide-binding protein (LBP) as prognostic factors in severe sepsis/septic shock patients - Comparison with CRP and procalcitonin /
- Masson S, Caironi P, Fanizza C, Thomae R, Bernasconi R, Noto A, Oggioni R, Pasetti GS, Romero M, Tognoni G, Latini R, Gattinoni L. Circulating presepsin (soluble CD14 subtype) as a marker of host response in patients with severe sepsis or septic shock
Opintojen ennätyspäivät
Opi tärkeimmät päivämäärät
Opiskelun aloitus (Todellinen)
Ensisijainen valmistuminen (Todellinen)
Opintojen valmistuminen (Todellinen)
Opintoihin ilmoittautumispäivät
Ensimmäinen lähetetty
Ensimmäinen toimitettu, joka täytti QC-kriteerit
Ensimmäinen Lähetetty (Todellinen)
Tutkimustietojen päivitykset
Viimeisin päivitys julkaistu (Todellinen)
Viimeisin lähetetty päivitys, joka täytti QC-kriteerit
Viimeksi vahvistettu
Lisää tietoa
Tähän tutkimukseen liittyvät termit
Avainsanat
Muita asiaankuuluvia MeSH-ehtoja
- Patologiset prosessit
- Neoplasmat sivustoittain
- Neoplasmat
- Suoliston sairaudet
- Ruoansulatuskanavan kasvaimet
- Ruoansulatuskanavan kasvaimet
- Ruoansulatuskanavan sairaudet
- Ruoansulatuskanavan sairaudet
- Kolorektaaliset kasvaimet
- Suoliston kasvaimet
- Tulehdus
- Paksusuolen sairaudet
- Shokki
- Paksusuolen kasvaimet
- Postoperatiiviset komplikaatiot
- Suolitukos
- Systeeminen tulehdusvasteen oireyhtymä
Muut tutkimustunnusnumerot
- BT-ABO
Yksittäisten osallistujien tietojen suunnitelma (IPD)
Aiotko jakaa yksittäisten osallistujien tietoja (IPD)?
Lääke- ja laitetiedot, tutkimusasiakirjat
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää lääkevalmistetta
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää laitetuotetta
Nämä tiedot haettiin suoraan verkkosivustolta clinicaltrials.gov ilman muutoksia. Jos sinulla on pyyntöjä muuttaa, poistaa tai päivittää tutkimustietojasi, ota yhteyttä register@clinicaltrials.gov. Heti kun muutos on otettu käyttöön osoitteessa clinicaltrials.gov, se päivitetään automaattisesti myös verkkosivustollemme .