Bacteriële translocatiemarkers als voorspellers van infectieuze en inflammatoire complicaties bij acute darmobstructie
Prognostische betekenis van bacteriële translocatiemarkers als voorspellers van infectieuze en inflammatoire complicaties bij acute mechanische darmobstructie
Ondanks moderne benaderingen van de diagnose en behandeling van acute darmobstructie (ABO), varieert de postoperatieve mortaliteit van 5 tot 32% en treden complicaties op in 23% van de gevallen. Een van de formidabele infectieuze en inflammatoire complicaties van ABO is sepsis. Het belangrijkste onderdeel van de ontwikkeling van sepsis bij ABO is bacteriële translocatie (BT). BT is de migratie van darmbacteriën of hun producten door het darmslijmvlies naar de mesenteriale lymfeklieren en verder naar normaal steriele weefsels en organen.
Tegenwoordig zijn er verschillende methoden om BT te detecteren:
- directe methode - de detectie van 16s rRNA (ribosomaal ribonucleïnezuur) in mesenteriale lymfeklieren (MLN);
- indirecte methode - de detectie van serum lipopolysaccharide-bindend eiwit (LBP) en presepsine (oplosbaar CD14-subtype of sCD14-ST).
Het doel van deze studie is om de diagnostische en prognostische betekenis van bacteriële translocatie als voorspeller van de ontwikkeling van complicaties bij patiënten met maligne en goedaardige acute darmobstructie te bepalen door de relatie van biomarkers in de systemische circulatie (LBP, sCD14-ST) met de detectie van genen van micro-organismen (16s rRNA) in mesenteriale lymfeklieren.
Studie Overzicht
Toestand
Conditie
Interventie / Behandeling
Gedetailleerde beschrijving
Voor de vroege diagnose van infectieuze en inflammatoire complicaties is het noodzakelijk om LBP, sCD-14 en 16sRNA te bestuderen als bacteriële translocatiemarkers bij patiënten met kwaadaardige en goedaardige acute darmobstructie, evenals bij patiënten na geplande chirurgische ingreep voor colontumoren. Op basis van veranderingen in biomarkers voor bacteriële translocatie in het bloedserum, wordt gesuggereerd dat patiënten met onderzochte pathologie kunnen worden gestratificeerd volgens het risiconiveau van het ontwikkelen van infectieuze en inflammatoire complicaties.
De onderzoeksmaterialen zijn bloedserum en mesenterische lymfeklieren (MLN). Veneus bloed wordt 1 uur voor de operatie, 24 en 72 uur erna afgenomen. Veneus bloed wordt verzameld in vacutainers van 5 ml met een stollingsactivator en een serumgelseparator. Het wordt 20 minuten gecentrifugeerd bij 1000 x g, waarna de gel het serum volledig van het stolsel scheidt en een dichte barrière vormt. ELISA Kit voor Lipopolysaccharide Binding Protein (LBP, Human) en voor Presepsin (sCD14-ST, Human), van Cloud-Clone Corp. zal worden gebruikt om de aanwezigheid van LBP en sCD14-ST vast te stellen. De analyse wordt uitgevoerd volgens de instructies van de fabrikant voor een ELISA EVOLIS-robotsysteem van BioRad.
De opererende chirurg voert een MLN-bemonstering uit in steriele omstandigheden tijdens de operatie na resectie van de darm uit het mesenterium van het grove monster. MLN wordt in een steriele buis zonder vulstoffen geplaatst. Het DNA wordt geëxtraheerd met de GeneJET Genomic DNA Purification Kit, vervaardigd door Thermo Fisher Scientific, VS, in overeenstemming met de instructies van de fabrikant. De 16s rRNA-bacteriën in MLN zullen worden gedetecteerd met behulp van real-time PCR en BIO-RAD CFX96-versterker met 16s rRNA voorwaartse en achterwaartse primers (U16SRT-F FACTCCTACGGGAGGGAGGCAGGT en U16SRT-R TATTACCGCGGCTGCTGGGC).
Tijdens de implementatie zullen de middelen van het Collective Use Laboratory of Research Center Non-profit Joint Stock Company (NJSC) "Karaganda Medical University" worden gebruikt.
Dit onderzoek wordt gefinancierd door het Wetenschapscomité van het Ministerie van Onderwijs en Wetenschappen van de Republiek Kazachstan (Grant No. AP09260597).
Studietype
Inschrijving (Werkelijk)
Contacten en locaties
Studie Locaties
-
-
-
Karaganda, Kazachstan, 100000
- NJSC Karaganda Medical University
-
-
Deelname Criteria
Geschiktheidscriteria
Leeftijden die in aanmerking komen voor studie
Accepteert gezonde vrijwilligers
Bemonsteringsmethode
Studie Bevolking
Beschrijving
Inclusiecriteria:
- patiënten met kwaadaardige acute darmobstructie,
- patiënten met goedaardige acute darmobstructie,
- darmkankerpatiënten zonder acute darmobstructie (geplande operaties).
Uitsluitingscriteria:
- leeftijd jonger dan 18 jaar,
- zwangerschap,
- patiënten met paralytische acute darmobstructie,
- patiënten met HIV-infectie, levercirrose,
- patiënt met een infectieus proces als gevolg van een andere pathologie.
Studie plan
Hoe is de studie opgezet?
Ontwerpdetails
Cohorten en interventies
Groep / Cohort |
Interventie / Behandeling |
|---|---|
|
Kwaadaardige ABO
60 patiënten met kwaadaardige acute darmobstructie
|
Bepaal elke aanwezigheid van LBP in het bloedserum met behulp van de ELISA-methode 1 uur vóór de operatie, 24 en 72 uur erna.
Bepaal de aanwezigheid van sCD14-ST in het bloedserum met behulp van de ELISA-methode 1 uur vóór de operatie, 24 en 72 uur erna.
Bepaal de aanwezigheid van 16s-rRNA in mesenteriale lymfeklieren met de PCR-methode.
|
|
CRC zonder ABO (controle)
60 darmkankerpatiënten zonder acute darmobstructie (geplande operaties)
|
Bepaal elke aanwezigheid van LBP in het bloedserum met behulp van de ELISA-methode 1 uur vóór de operatie, 24 en 72 uur erna.
Bepaal de aanwezigheid van sCD14-ST in het bloedserum met behulp van de ELISA-methode 1 uur vóór de operatie, 24 en 72 uur erna.
Bepaal de aanwezigheid van 16s-rRNA in mesenteriale lymfeklieren met de PCR-methode.
|
|
Goedaardig ABO
30 patiënten met goedaardige acute darmobstructie
|
Bepaal elke aanwezigheid van LBP in het bloedserum met behulp van de ELISA-methode 1 uur vóór de operatie, 24 en 72 uur erna.
Bepaal de aanwezigheid van sCD14-ST in het bloedserum met behulp van de ELISA-methode 1 uur vóór de operatie, 24 en 72 uur erna.
Bepaal de aanwezigheid van 16s-rRNA in mesenteriale lymfeklieren met de PCR-methode.
|
Wat meet het onderzoek?
Primaire uitkomstmaten
Uitkomstmaat |
Maatregel Beschrijving |
Tijdsspanne |
|---|---|---|
|
Verandering in het aantal deelnemers met postoperatieve infectieuze en inflammatoire complicaties
Tijdsspanne: Eenmaal (als er een complicatie optreedt tijdens de ziekenhuisopname - van 7 tot 28 dagen)
|
Veel infectieuze en inflammatoire complicaties in de postoperatieve periode (wondettering, anastomotische lekkage, abcessen in de buik, peritonitis, sepsis, enz.)
|
Eenmaal (als er een complicatie optreedt tijdens de ziekenhuisopname - van 7 tot 28 dagen)
|
Secundaire uitkomstmaten
Uitkomstmaat |
Maatregel Beschrijving |
Tijdsspanne |
|---|---|---|
|
LBP-niveau in serumbloed
Tijdsspanne: 1 uur vóór de operatie, 72 uur na de operatie
|
LBP-niveaus zullen tussen groepen/subgroepen en in elke groep/subgroep dynamisch worden vergeleken.
|
1 uur vóór de operatie, 72 uur na de operatie
|
|
sCD14-ST-niveau in serumbloed
Tijdsspanne: 1 uur vóór de operatie, 72 uur na de operatie
|
sCD14-ST-niveaus zullen dynamisch worden vergeleken tussen groepen/subgroepen en in elke groep/subgroep.
|
1 uur vóór de operatie, 72 uur na de operatie
|
|
16s rRNA in mesenteriale lymfeklieren
Tijdsspanne: Eenmaal (MLN-bemonstering onder steriele omstandigheden tijdens de operatie)
|
Aanwezigheid of afwezigheid van 16s-rRNA in mesenteriale lymfeklieren zal tussen groepen/subgroepen worden vergeleken.
|
Eenmaal (MLN-bemonstering onder steriele omstandigheden tijdens de operatie)
|
Medewerkers en onderzoekers
Sponsor
Onderzoekers
- Studie stoel: Yemek Turgunov, Pr., NJSC Karaganda Medical University
- Hoofdonderzoeker: Alina Ogizbayeva, PhD student, NJSC Karaganda Medical University
- Hoofdonderzoeker: Lyudmila Akhmaltdinova, PhD, NJSC Karaganda Medical University
- Hoofdonderzoeker: Kairat Shakeyev, Pr., NJSC Karaganda Medical University
- Hoofdonderzoeker: Dmitry Matyushko, PhD, Multidisciplinary hospital No. 1 of Karaganda
- Hoofdonderzoeker: Miras Mugazov, PhD, NJSC Karaganda Medical University
- Hoofdonderzoeker: Asylbek Zhumakaev, Master, Multidisciplinary hospital No. 3 of Karaganda
- Hoofdonderzoeker: Irina Kadyrova, PhD, NJSC Karaganda Medical University
Publicaties en nuttige links
Algemene publicaties
- Stehle JR Jr, Leng X, Kitzman DW, Nicklas BJ, Kritchevsky SB, High KP. Lipopolysaccharide-binding protein, a surrogate marker of microbial translocation, is associated with physical function in healthy older adults. J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 2012 Nov;67(11):1212-8. doi: 10.1093/gerona/gls178. Epub 2012 Sep 7.
- Taylor MR, Lalani N. Adult small bowel obstruction. Acad Emerg Med. 2013 Jun;20(6):528-44. doi: 10.1111/acem.12150.
- Levy M, Kolodziejczyk AA, Thaiss CA, Elinav E. Dysbiosis and the immune system. Nat Rev Immunol. 2017 Apr;17(4):219-232. doi: 10.1038/nri.2017.7. Epub 2017 Mar 6.
- Gore RM, Silvers RI, Thakrar KH, Wenzke DR, Mehta UK, Newmark GM, Berlin JW. Bowel Obstruction. Radiol Clin North Am. 2015 Nov;53(6):1225-40. doi: 10.1016/j.rcl.2015.06.008.
- Roses RE, Folkert IW, Krouse RS. Malignant Bowel Obstruction: Reappraising the Value of Surgery. Surg Oncol Clin N Am. 2018 Oct;27(4):705-715. doi: 10.1016/j.soc.2018.05.010. Epub 2018 Jul 21.
- Shwaartz C, Fields AC, Prigoff JG, Aalberg JJ, Divino CM. Should patients With obstructing colorectal cancer have proximal diversion? Am J Surg. 2017 Apr;213(4):742-747. doi: 10.1016/j.amjsurg.2016.08.005. Epub 2016 Sep 2.
- Chiu HC, Lin YC, Hsieh HM, Chen HP, Wang HL, Wang JY. The impact of complications on prolonged length of hospital stay after resection in colorectal cancer: A retrospective study of Taiwanese patients. J Int Med Res. 2017 Apr;45(2):691-705. doi: 10.1177/0300060516684087. Epub 2017 Feb 7.
- Simillis C, Kalakouti E, Afxentiou T, Kontovounisios C, Smith JJ, Cunningham D, Adamina M, Tekkis PP. Primary Tumor Resection in Patients with Incurable Localized or Metastatic Colorectal Cancer: A Systematic Review and Meta-analysis. World J Surg. 2019 Jul;43(7):1829-1840. doi: 10.1007/s00268-019-04984-2.
- Wancata LM, Abdelsattar ZM, Suwanabol PA, Campbell DA Jr, Hendren S. Outcomes After Surgery for Benign and Malignant Small Bowel Obstruction. J Gastrointest Surg. 2017 Feb;21(2):363-371. doi: 10.1007/s11605-016-3307-8. Epub 2016 Oct 25.
- Stubljar D, Skvarc M. Effective Strategies for Diagnosis of Systemic Inflammatory Response Syndrome (SIRS) due to Bacterial Infection in Surgical Patients. Infect Disord Drug Targets. 2015;15(1):53-6. doi: 10.2174/1871526515666150320161804.
- Piton G, Capellier G. Biomarkers of gut barrier failure in the ICU. Curr Opin Crit Care. 2016 Apr;22(2):152-60. doi: 10.1097/MCC.0000000000000283.
- Tsujimoto H, Ono S, Mochizuki H. Role of translocation of pathogen-associated molecular patterns in sepsis. Dig Surg. 2009;26(2):100-9. doi: 10.1159/000206143. Epub 2009 Mar 2.
- MacFie J, Reddy BS, Gatt M, Jain PK, Sowdi R, Mitchell CJ. Bacterial translocation studied in 927 patients over 13 years. Br J Surg. 2006 Jan;93(1):87-93. doi: 10.1002/bjs.5184.
- Fang L, Xu Z, Wang GS, Ji FY, Mei CX, Liu J, Wu GM. Directed evolution of an LBP/CD14 inhibitory peptide and its anti-endotoxin activity. PLoS One. 2014 Jul 15;9(7):e101406. doi: 10.1371/journal.pone.0101406. eCollection 2014.
- Kell DB, Pretorius E. On the translocation of bacteria and their lipopolysaccharides between blood and peripheral locations in chronic, inflammatory diseases: the central roles of LPS and LPS-induced cell death. Integr Biol (Camb). 2015 Nov;7(11):1339-77. doi: 10.1039/c5ib00158g.
- Mussap M, Noto A, Fravega M, Fanos V. Soluble CD14 subtype presepsin (sCD14-ST) and lipopolysaccharide binding protein (LBP) in neonatal sepsis: new clinical and analytical perspectives for two old biomarkers. J Matern Fetal Neonatal Med. 2011 Oct;24 Suppl 2:12-4. doi: 10.3109/14767058.2011.601923.
- van Maldeghem I, Nusman CM, Visser DH. Soluble CD14 subtype (sCD14-ST) as biomarker in neonatal early-onset sepsis and late-onset sepsis: a systematic review and meta-analysis. BMC Immunol. 2019 Jun 3;20(1):17. doi: 10.1186/s12865-019-0298-8.
- Hosomi S, Yamagami H, Itani S, Yukawa T, Otani K, Nagami Y, Tanaka F, Taira K, Kamata N, Tanigawa T, Shiba M, Watanabe T, Fujiwara Y. Sepsis Markers Soluble IL-2 Receptor and Soluble CD14 Subtype as Potential Biomarkers for Complete Mucosal Healing in Patients With Inflammatory Bowel Disease. J Crohns Colitis. 2018 Jan 5;12(1):87-95. doi: 10.1093/ecco-jcc/jjx124.
- Endo S, Suzuki Y, Takahashi G, Shozushima T, Ishikura H, Murai A, Nishida T, Irie Y, Miura M, Iguchi H, Fukui Y, Tanaka K, Nojima T, Okamura Y. Presepsin as a powerful monitoring tool for the prognosis and treatment of sepsis: a multicenter prospective study. J Infect Chemother. 2014 Jan;20(1):30-4. doi: 10.1016/j.jiac.2013.07.005. Epub 2013 Dec 11.
Nuttige links
- Mierzchala M, Krzystek-Korpacka M, Gamian A, Durek G. Quantitative indices of dynamics in concentrations of lipopolysaccharide-binding protein (LBP) as prognostic factors in severe sepsis/septic shock patients - Comparison with CRP and procalcitonin /
- Masson S, Caironi P, Fanizza C, Thomae R, Bernasconi R, Noto A, Oggioni R, Pasetti GS, Romero M, Tognoni G, Latini R, Gattinoni L. Circulating presepsin (soluble CD14 subtype) as a marker of host response in patients with severe sepsis or septic shock
Studie record data
Bestudeer belangrijke data
Studie start (Werkelijk)
Primaire voltooiing (Werkelijk)
Studie voltooiing (Werkelijk)
Studieregistratiedata
Eerst ingediend
Eerst ingediend dat voldeed aan de QC-criteria
Eerst geplaatst (Werkelijk)
Updates van studierecords
Laatste update geplaatst (Werkelijk)
Laatste update ingediend die voldeed aan QC-criteria
Laatst geverifieerd
Meer informatie
Termen gerelateerd aan deze studie
Trefwoorden
Aanvullende relevante MeSH-voorwaarden
- Pathologische processen
- Neoplasmata per site
- Neoplasmata
- Darmziekten
- Gastro-intestinale neoplasmata
- Neoplasmata van het spijsverteringsstelsel
- Ziekten van het spijsverteringsstelsel
- Gastro-intestinale aandoeningen
- Colorectale neoplasmata
- Intestinale neoplasmata
- Ontsteking
- Colon Ziekten
- Schok
- Koloniale neoplasmata
- Postoperatieve complicaties
- Darmobstructie
- Systemisch ontstekingsreactiesyndroom
Andere studie-ID-nummers
- BT-ABO
Plan Individuele Deelnemersgegevens (IPD)
Bent u van plan om gegevens van individuele deelnemers (IPD) te delen?
Informatie over medicijnen en apparaten, studiedocumenten
Bestudeert een door de Amerikaanse FDA gereguleerd geneesmiddel
Bestudeert een door de Amerikaanse FDA gereguleerd apparaatproduct
Deze informatie is zonder wijzigingen rechtstreeks van de website clinicaltrials.gov gehaald. Als u verzoeken heeft om uw onderzoeksgegevens te wijzigen, te verwijderen of bij te werken, neem dan contact op met register@clinicaltrials.gov. Zodra er een wijziging wordt doorgevoerd op clinicaltrials.gov, wordt deze ook automatisch bijgewerkt op onze website .