Bakterietranslokationsmarkörer som prediktorer för infektions- och inflammatoriska komplikationer vid akut tarmobstruktion

För tidig diagnos av infektiösa och inflammatoriska komplikationer är det nödvändigt att studera LBP, sCD-14 och 16sRNA som bakteriella translokationsmarkörer hos patienter med malign och benign akut tarmobstruktion, samt hos patienter efter planerat kirurgiskt ingrepp för kolontumörer. Baserat på förändringar i bakteriella translokationsbiomarkörer i blodserumet, föreslås det att patienter med undersökt patologi kan stratifieras enligt risknivån för att utveckla infektions- och inflammatoriska komplikationer.

Studiematerialen är blodserum och mesenteriska lymfkörtlar (MLN). Venös blodprovtagning kommer att utföras 1 timme före operationen, 24 och 72 timmar efter den. Venöst blod kommer att samlas upp i 5 ml vacutainers med en koagulationsaktivator och en serumgel-separator. Den kommer att centrifugeras i 20 minuter vid 1000 x g, varefter gelén helt separerar serumet från koaglet och bildar en tät barriär.ELISA Kit för Lipopolysaccharide Binding Protein (LBP, Human) och för Preresepsin (sCD14-ST, Human), från Cloud-Clone Corp. kommer att användas för att fastställa eventuell närvaro av LBP och sCD14-ST. Analysen kommer att utföras enligt tillverkarens instruktioner för ett ELISA EVOLIS robotsystem från BioRad.

Den opererande kirurgen kommer att utföra en MLN-provtagning under sterila förhållanden under operationen efter resektion av tarmen från mesenteriet på bruttoprovet. MLN kommer att placeras i ett sterilt rör utan några fyllmedel. DNA:t kommer att extraheras av GeneJET Genomic DNA Purification Kit tillverkat av Thermo Fisher Scientific, USA, i enlighet med tillverkarens instruktioner. 16s rRNA-bakterierna i MLN kommer att detekteras genom att använda realtids-PCR och BIO-RAD CFX96-förstärkare med 16s rRNA framåt och bakåt primers (U16SRT-F FACTCCTACGGGAGGGAGGCAGGT och U16SRT-R TATTACCGCGGCTGCTGGGC).

Under implementeringen kommer resurserna från Collective Use Laboratory of Research Center Non-profit Joint Stock Company (NJSC) "Karaganda Medical University" att användas.

Denna forskning finansieras av vetenskapskommittén vid ministeriet för utbildning och vetenskap i Republiken Kazakstan (bidrag nr AP09260597).