Маркеры бактериальной транслокации как предикторы инфекционно-воспалительных осложнений при острой кишечной непроходимости
Прогностическое значение маркеров бактериальной транслокации как предикторов инфекционно-воспалительных осложнений при острой механической кишечной непроходимости
Несмотря на современные подходы к диагностике и лечению острой кишечной непроходимости (ОКН), послеоперационная летальность колеблется от 5 до 32%, а осложнения возникают до 23% случаев. Одним из грозных инфекционно-воспалительных осложнений АВО является сепсис. Основным компонентом развития сепсиса при АВО является бактериальная транслокация (БТ). БТ представляет собой миграцию кишечных бактерий или их продуктов через слизистую оболочку кишечника в мезентериальные лимфатические узлы и далее в стерильные в норме ткани и органы.
На сегодняшний день существует несколько методов обнаружения БТ:
- прямой метод - обнаружение 16s рРНК (рибосомальной рибонуклеиновой кислоты) в мезентериальных лимфатических узлах (МЛУ);
- непрямой метод - определение сывороточного липополисахарид-связывающего белка (LBP) и пресепсина (подтип Soluble CD14 или sCD14-ST).
Цель настоящего исследования — определить диагностическую и прогностическую значимость бактериальной транслокации как предиктора развития осложнений у больных со злокачественной и доброкачественной острой кишечной непроходимостью путем оценки взаимосвязи биомаркеров в системном кровотоке (БСБ, sCD14-ST) с обнаружение генов микроорганизмов (16s рРНК) в мезентериальных лимфатических узлах.
Обзор исследования
Статус
Условия
Вмешательство/лечение
Подробное описание
Для ранней диагностики инфекционно-воспалительных осложнений необходимо изучение LBP, sCD-14 и 16sРНК как маркеров бактериальной транслокации у больных со злокачественной и доброкачественной острой кишечной непроходимостью, а также у больных после планового оперативного вмешательства по поводу опухолей толстой кишки. На основании изменения биомаркеров бактериальной транслокации в сыворотке крови предложено стратифицировать больных с исследуемой патологией по степени риска развития инфекционно-воспалительных осложнений.
Материалом исследования являются сыворотка крови и мезентериальные лимфатические узлы (МЛУ). Забор венозной крови будет производиться за 1 час до операции, через 24 и 72 часа после нее. Венозная кровь будет собираться в вакутейнеры на 5 мл с активатором свертывания крови и сепаратором сывороточного геля. Его центрифугируют в течение 20 минут при 1000 x g, после чего гель полностью отделяет сыворотку от сгустка, образуя плотный барьер. Набор ELISA для липополисахарид-связывающего белка (LBP, человек) и пресепсина (sCD14-ST, человек), от Cloud-Clone Corp., будет использоваться для определения присутствия LBP и sCD14-ST. Анализ будет проводиться в соответствии с инструкциями производителя роботизированной системы ELISA EVOLIS от BioRad.
Оперирующий хирург выполнит забор MLN в стерильных условиях во время операции после резекции кишечника из брыжейки макроскопического образца. MLN будет помещен в стерильную пробирку без каких-либо наполнителей. ДНК будет извлечена с помощью набора для очистки геномной ДНК GeneJET производства Thermo Fisher Scientific, США, в соответствии с инструкциями производителя. Бактерии 16s рРНК в MLN будут обнаружены с помощью ПЦР в реальном времени и усилителя BIO-RAD CFX96 с прямым и обратным праймерами 16s рРНК (U16SRT-F FACTCCTACGGGAGGGAGGCAGGT и U16SRT-R TATTACCGCGGCTGCTGGGC).
При реализации будут использованы ресурсы Лаборатории коллективного пользования Научно-исследовательского центра Некоммерческого акционерного общества (НАО) «Карагандинский медицинский университет».
Данное исследование финансируется Комитетом науки Министерства образования и науки Республики Казахстан (грант № AP09260597).
Тип исследования
Регистрация (Действительный)
Контакты и местонахождение
Места учебы
-
-
-
Karaganda, Казахстан, 100000
- NJSC Karaganda Medical University
-
-
Критерии участия
Критерии приемлемости
Возраст, подходящий для обучения
Принимает здоровых добровольцев
Метод выборки
Исследуемая популяция
Описание
Критерии включения:
- больные со злокачественной острой кишечной непроходимостью,
- больные с доброкачественной острой кишечной непроходимостью,
- больные колоректальным раком без острой кишечной непроходимости (плановые операции).
Критерий исключения:
- возраст менее 18 лет,
- беременность,
- больные с паралитической острой кишечной непроходимостью,
- больных ВИЧ-инфекцией, циррозом печени,
- больной с инфекционным процессом вследствие другой патологии.
Учебный план
Как устроено исследование?
Детали дизайна
Когорты и вмешательства
Группа / когорта |
Вмешательство/лечение |
|---|---|
|
Злокачественный АВО
60 пациентов со злокачественной острой кишечной непроходимостью
|
Определяют наличие БСБ в сыворотке крови методом ИФА за 1 ч до операции, через 24 и 72 ч после нее.
Определяют наличие sCD14-ST в сыворотке крови методом ИФА за 1 час до операции, через 24 и 72 часа после нее.
Определите наличие 16s рРНК в брыжеечных лимфатических узлах методом ПЦР.
|
|
CRC без АВО (контроль)
60 больных колоректальным раком без острой кишечной непроходимости (плановые операции)
|
Определяют наличие БСБ в сыворотке крови методом ИФА за 1 ч до операции, через 24 и 72 ч после нее.
Определяют наличие sCD14-ST в сыворотке крови методом ИФА за 1 час до операции, через 24 и 72 часа после нее.
Определите наличие 16s рРНК в брыжеечных лимфатических узлах методом ПЦР.
|
|
Доброкачественная АВО
30 пациентов с доброкачественной острой кишечной непроходимостью
|
Определяют наличие БСБ в сыворотке крови методом ИФА за 1 ч до операции, через 24 и 72 ч после нее.
Определяют наличие sCD14-ST в сыворотке крови методом ИФА за 1 час до операции, через 24 и 72 часа после нее.
Определите наличие 16s рРНК в брыжеечных лимфатических узлах методом ПЦР.
|
Что измеряет исследование?
Первичные показатели результатов
Мера результата |
Мера Описание |
Временное ограничение |
|---|---|---|
|
Изменение количества участников с послеоперационными инфекционно-воспалительными осложнениями
Временное ограничение: Однократно (при возникновении осложнений во время госпитализации – от 7 до 28 дней)
|
Любые инфекционно-воспалительные осложнения в послеоперационном периоде (нагноение раны, несостоятельность анастомоза, абсцессы брюшной полости, перитонит, сепсис и др.)
|
Однократно (при возникновении осложнений во время госпитализации – от 7 до 28 дней)
|
Вторичные показатели результатов
Мера результата |
Мера Описание |
Временное ограничение |
|---|---|---|
|
Уровень LBP в сыворотке крови
Временное ограничение: За 1 час до операции, через 72 часа после операции
|
Уровни БНС будут сравниваться между группами/подгруппами и в каждой группе/подгруппе в динамике.
|
За 1 час до операции, через 72 часа после операции
|
|
Уровень sCD14-ST в сыворотке крови
Временное ограничение: За 1 час до операции, через 72 часа после операции
|
Уровни sCD14-ST будут сравниваться между группами/подгруппами и в каждой группе/подгруппе в динамике.
|
За 1 час до операции, через 72 часа после операции
|
|
16s рРНК в мезентериальных лимфатических узлах
Временное ограничение: Однократно (забор проб МЛН в стерильных условиях во время операции)
|
Наличие или отсутствие 16s рРНК в мезентериальных лимфатических узлах будет сравниваться между группами/подгруппами.
|
Однократно (забор проб МЛН в стерильных условиях во время операции)
|
Соавторы и исследователи
Спонсор
Следователи
- Учебный стул: Yemek Turgunov, Pr., NJSC Karaganda Medical University
- Главный следователь: Alina Ogizbayeva, PhD student, NJSC Karaganda Medical University
- Главный следователь: Lyudmila Akhmaltdinova, PhD, NJSC Karaganda Medical University
- Главный следователь: Kairat Shakeyev, Pr., NJSC Karaganda Medical University
- Главный следователь: Dmitry Matyushko, PhD, Multidisciplinary hospital No. 1 of Karaganda
- Главный следователь: Miras Mugazov, PhD, NJSC Karaganda Medical University
- Главный следователь: Asylbek Zhumakaev, Master, Multidisciplinary hospital No. 3 of Karaganda
- Главный следователь: Irina Kadyrova, PhD, NJSC Karaganda Medical University
Публикации и полезные ссылки
Общие публикации
- Stehle JR Jr, Leng X, Kitzman DW, Nicklas BJ, Kritchevsky SB, High KP. Lipopolysaccharide-binding protein, a surrogate marker of microbial translocation, is associated with physical function in healthy older adults. J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 2012 Nov;67(11):1212-8. doi: 10.1093/gerona/gls178. Epub 2012 Sep 7.
- Taylor MR, Lalani N. Adult small bowel obstruction. Acad Emerg Med. 2013 Jun;20(6):528-44. doi: 10.1111/acem.12150.
- Levy M, Kolodziejczyk AA, Thaiss CA, Elinav E. Dysbiosis and the immune system. Nat Rev Immunol. 2017 Apr;17(4):219-232. doi: 10.1038/nri.2017.7. Epub 2017 Mar 6.
- Gore RM, Silvers RI, Thakrar KH, Wenzke DR, Mehta UK, Newmark GM, Berlin JW. Bowel Obstruction. Radiol Clin North Am. 2015 Nov;53(6):1225-40. doi: 10.1016/j.rcl.2015.06.008.
- Roses RE, Folkert IW, Krouse RS. Malignant Bowel Obstruction: Reappraising the Value of Surgery. Surg Oncol Clin N Am. 2018 Oct;27(4):705-715. doi: 10.1016/j.soc.2018.05.010. Epub 2018 Jul 21.
- Shwaartz C, Fields AC, Prigoff JG, Aalberg JJ, Divino CM. Should patients With obstructing colorectal cancer have proximal diversion? Am J Surg. 2017 Apr;213(4):742-747. doi: 10.1016/j.amjsurg.2016.08.005. Epub 2016 Sep 2.
- Chiu HC, Lin YC, Hsieh HM, Chen HP, Wang HL, Wang JY. The impact of complications on prolonged length of hospital stay after resection in colorectal cancer: A retrospective study of Taiwanese patients. J Int Med Res. 2017 Apr;45(2):691-705. doi: 10.1177/0300060516684087. Epub 2017 Feb 7.
- Simillis C, Kalakouti E, Afxentiou T, Kontovounisios C, Smith JJ, Cunningham D, Adamina M, Tekkis PP. Primary Tumor Resection in Patients with Incurable Localized or Metastatic Colorectal Cancer: A Systematic Review and Meta-analysis. World J Surg. 2019 Jul;43(7):1829-1840. doi: 10.1007/s00268-019-04984-2.
- Wancata LM, Abdelsattar ZM, Suwanabol PA, Campbell DA Jr, Hendren S. Outcomes After Surgery for Benign and Malignant Small Bowel Obstruction. J Gastrointest Surg. 2017 Feb;21(2):363-371. doi: 10.1007/s11605-016-3307-8. Epub 2016 Oct 25.
- Stubljar D, Skvarc M. Effective Strategies for Diagnosis of Systemic Inflammatory Response Syndrome (SIRS) due to Bacterial Infection in Surgical Patients. Infect Disord Drug Targets. 2015;15(1):53-6. doi: 10.2174/1871526515666150320161804.
- Piton G, Capellier G. Biomarkers of gut barrier failure in the ICU. Curr Opin Crit Care. 2016 Apr;22(2):152-60. doi: 10.1097/MCC.0000000000000283.
- Tsujimoto H, Ono S, Mochizuki H. Role of translocation of pathogen-associated molecular patterns in sepsis. Dig Surg. 2009;26(2):100-9. doi: 10.1159/000206143. Epub 2009 Mar 2.
- MacFie J, Reddy BS, Gatt M, Jain PK, Sowdi R, Mitchell CJ. Bacterial translocation studied in 927 patients over 13 years. Br J Surg. 2006 Jan;93(1):87-93. doi: 10.1002/bjs.5184.
- Fang L, Xu Z, Wang GS, Ji FY, Mei CX, Liu J, Wu GM. Directed evolution of an LBP/CD14 inhibitory peptide and its anti-endotoxin activity. PLoS One. 2014 Jul 15;9(7):e101406. doi: 10.1371/journal.pone.0101406. eCollection 2014.
- Kell DB, Pretorius E. On the translocation of bacteria and their lipopolysaccharides between blood and peripheral locations in chronic, inflammatory diseases: the central roles of LPS and LPS-induced cell death. Integr Biol (Camb). 2015 Nov;7(11):1339-77. doi: 10.1039/c5ib00158g.
- Mussap M, Noto A, Fravega M, Fanos V. Soluble CD14 subtype presepsin (sCD14-ST) and lipopolysaccharide binding protein (LBP) in neonatal sepsis: new clinical and analytical perspectives for two old biomarkers. J Matern Fetal Neonatal Med. 2011 Oct;24 Suppl 2:12-4. doi: 10.3109/14767058.2011.601923.
- van Maldeghem I, Nusman CM, Visser DH. Soluble CD14 subtype (sCD14-ST) as biomarker in neonatal early-onset sepsis and late-onset sepsis: a systematic review and meta-analysis. BMC Immunol. 2019 Jun 3;20(1):17. doi: 10.1186/s12865-019-0298-8.
- Hosomi S, Yamagami H, Itani S, Yukawa T, Otani K, Nagami Y, Tanaka F, Taira K, Kamata N, Tanigawa T, Shiba M, Watanabe T, Fujiwara Y. Sepsis Markers Soluble IL-2 Receptor and Soluble CD14 Subtype as Potential Biomarkers for Complete Mucosal Healing in Patients With Inflammatory Bowel Disease. J Crohns Colitis. 2018 Jan 5;12(1):87-95. doi: 10.1093/ecco-jcc/jjx124.
- Endo S, Suzuki Y, Takahashi G, Shozushima T, Ishikura H, Murai A, Nishida T, Irie Y, Miura M, Iguchi H, Fukui Y, Tanaka K, Nojima T, Okamura Y. Presepsin as a powerful monitoring tool for the prognosis and treatment of sepsis: a multicenter prospective study. J Infect Chemother. 2014 Jan;20(1):30-4. doi: 10.1016/j.jiac.2013.07.005. Epub 2013 Dec 11.
Полезные ссылки
- Mierzchala M, Krzystek-Korpacka M, Gamian A, Durek G. Quantitative indices of dynamics in concentrations of lipopolysaccharide-binding protein (LBP) as prognostic factors in severe sepsis/septic shock patients - Comparison with CRP and procalcitonin /
- Masson S, Caironi P, Fanizza C, Thomae R, Bernasconi R, Noto A, Oggioni R, Pasetti GS, Romero M, Tognoni G, Latini R, Gattinoni L. Circulating presepsin (soluble CD14 subtype) as a marker of host response in patients with severe sepsis or septic shock
Даты записи исследования
Изучение основных дат
Начало исследования (Действительный)
Первичное завершение (Действительный)
Завершение исследования (Действительный)
Даты регистрации исследования
Первый отправленный
Впервые представлено, что соответствует критериям контроля качества
Первый опубликованный (Действительный)
Обновления учебных записей
Последнее опубликованное обновление (Действительный)
Последнее отправленное обновление, отвечающее критериям контроля качества
Последняя проверка
Дополнительная информация
Термины, связанные с этим исследованием
Ключевые слова
Дополнительные соответствующие термины MeSH
- Патологические процессы
- Новообразования по локализации
- Новообразования
- Кишечные заболевания
- Желудочно-кишечные новообразования
- Новообразования пищеварительной системы
- Заболевания пищеварительной системы
- Желудочно-кишечные заболевания
- Колоректальные новообразования
- Новообразования кишечника
- Воспаление
- Заболевания толстой кишки
- Шок
- Новообразования толстой кишки
- Послеоперационные осложнения
- Кишечная непроходимость
- Синдром системного воспалительного ответа
Другие идентификационные номера исследования
- BT-ABO
Планирование данных отдельных участников (IPD)
Планируете делиться данными об отдельных участниках (IPD)?
Информация о лекарствах и устройствах, исследовательские документы
Изучает лекарственный продукт, регулируемый FDA США.
Изучает продукт устройства, регулируемый Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США.
Эта информация была получена непосредственно с веб-сайта clinicaltrials.gov без каких-либо изменений. Если у вас есть запросы на изменение, удаление или обновление сведений об исследовании, обращайтесь по адресу register@clinicaltrials.gov. Как только изменение будет реализовано на clinicaltrials.gov, оно будет автоматически обновлено и на нашем веб-сайте. .