Une recherche d'Helicobacter Pylori dans la vulvodynie localisée

Les sections suivantes des blocs de paraffine ont été préparées et colorées par Giemsa modifié. L'immunomarquage pour H. pylori a été effectué comme décrit. En bref, des coupes de tissus ont été déparaffinées dans du xylène, réhydratées par des concentrations décroissantes d'alcool se terminant par une solution saline tamponnée au phosphate (PBS) et soumises à un prétraitement avec de la protéinase K (8 minutes). Les coupes ont été trempées avec de la peroxydase d'hydrogène à 3 %, incubées avec un bloc de protéines pendant 15 minutes à température ambiante et lavées dans du PBS. Les tissus ont ensuite été incubés avec un anticorps polyclonal de lapin anti-H pylori (dilution, 1:10; clone ch-20 429, DAKO, Carpinteria, CA). Enfin, les sections ont été lavées dans du polysorbate 20 à 0, 05% dans du PBS, pH 7, 4, et l'anticorps lié a été détecté en utilisant de la streptavidine et un anticorps secondaire biotinylé avec de la diaminobenzidine comme chromogène. Les coupes ont été contre-colorées avec de l'hématoxyline, déshydratées et montées. Les contrôles négatifs étaient des sections traitées comme ci-dessus, mais au lieu d'une incubation avec l'anticorps primaire, elles ont été incubées avec de l'albumine de sérum bovin à 1 % dans du PBS.

Les biopsies vulvaires de sept autres femmes sans vulvodynie localisée ont servi de témoins sains.

Les tissus gastriques témoins positifs et négatifs pour la coloration immunohistochimique des micro-organismes H. pylori ont été obtenus à partir des archives du Département de pathologie.