Et søk etter Helicobacter Pylori i lokalisert Vulvodynia

Etterfølgende seksjoner fra parafinblokkene ble fremstilt og farget av modifisert Giemsa. Immunfarging for H. pylori ble utført som beskrevet. Kort fortalt ble vevssnitt avparafinisert i xylen, rehydrert gjennom synkende konsentrasjoner av alkohol som ender i fosfatbufret saltvann (PBS), og utsatt for forbehandling med Proteinase K (8 minutter). Seksjonene ble stoppet med 3 % hydrogenperoksidase, inkubert med proteinblokk i 15 minutter ved romtemperatur og vasket i PBS. Vev ble deretter inkubert med polyklonalt kanin-anti-H pylori-antistoff (fortynning, 1:10; klon ch-20 429, DAKO, Carpinteria, CA). Til slutt ble seksjoner vasket i 0,05 % polysorbat 20 i PBS, pH 7,4, og det bundne antistoffet ble påvist ved bruk av streptavidin og biotinylert sekundært antistoff med diaminobenzidin som kromogen. Seksjoner ble motfarget med hematoxylin, dehydrert og montert. Negative kontroller ble seksjoner behandlet som ovenfor, men i stedet for inkubasjon med det primære antistoffet, ble de inkubert med 1 % bovint serumalbumin i PBS.

Vulvarbiopsier av syv andre kvinner uten lokalisert vulvodyni fungerte som sunne kontroller.

De positive og negative kontrollmavevevet for den immunhistokjemiske flekken av H. pylori-mikroorganismene ble hentet fra arkivene til patologisk avdeling.