Transplantation de myoblastes à des patients atteints de dystrophie musculaire de Duchenne (DMD)

La Dystrophie Musculaire de Duchenne (DMD) est une maladie dégénérative d'origine génétique, due à une mutation du gène codant pour la protéine dystrophine. Cette mutation conduit à une déficience en dystrophine dans les myofibres, provoquant une dégénérescence musculaire progressive par le mécanisme suivant : (1) une déficience en dystrophine rend les myofibres très vulnérables à la contraction-relaxation musculaire, provoquant des dommages fréquents et une nécrose des myofibres ; (2) la nécrose est suivie d'une régénération des myofibres, tant que la capacité de régénération du muscle n'est pas épuisée ; (3) lorsque la capacité de régénération du muscle est épuisée, les myofibres s'atrophient et finissent par disparaître ; (4) la fibrose et l'infiltration graisseuse remplacent les myofibres perdues. Cette destruction musculaire progressive a lieu dans la plupart des muscles des membres et du tronc, entraînant une perte progressive de la force musculaire, des contractures musculo-tendineuses, une insuffisance respiratoire restrictive et une mort prématurée entre 17 et 30 ans.

La greffe de myoblastes provenant d'un donneur sain est un traitement potentiel de la DMD. Après injection intramusculaire, les myoblastes du donneur fusionnent avec les myofibres du patient, y introduisant le gène normal de la dystrophine. Dans un précédent essai clinique de phase 1A, les chercheurs ont prouvé que la transplantation de myoblastes issus de la biopsie musculaire d'un donneur sain a introduit le gène normal de la dystrophine dans les myofibres DMD, avec pour conséquence l'expression de l'ARNm normal de la dystrophine et la restauration de la protéine dystrophine dans plusieurs myofibres.

L'objectif de cette phase I/II de l'essai clinique est d'étudier si la transplantation de myoblastes normaux dans un muscle (dans ce cas, l'extenseur radial du carpe) de patients atteints de DMD est sûre et améliorera la force de ce muscle. Les patients seront transplantés avec des myoblastes issus de la biopsie musculaire d'un donneur sain. Trente millions de myoblastes seront injectés par cm3 dans un volume musculaire progressivement plus important (c'est-à-dire 3, 6 et 9 cm3). Le muscle controlatéral sera injecté avec une solution saline comme contrôle. Les patients et les enquêteurs seront aveugles du côté injecté de cellules. La force des deux muscles sera mesurée 3 mois après la greffe pour vérifier si la greffe de myoblastes a augmenté la force musculaire. S'il n'y a pas d'augmentation significative de la force, le protocole sera immédiatement interrompu pour ce patient. En cas d'augmentation significative de la force, le patient sera maintenu sous immunosuppression jusqu'à 6 mois et la force musculaire sera réévaluée.

Les objectifs de cet essai clinique de Phase I/II avec des patients DMD sont donc :

Objectif principal:

Évaluer la sécurité d'une procédure d'injections à haute densité de myoblastes donneurs dans tout un muscle (sous immunosuppression par le tacrolimus).

Objectifs secondaires :

1. Évaluer si la transplantation de myoblastes a entraîné la présence de myofibres positives à la dystrophine provenant d'un donneur.

2. Évaluer si la greffe de myoblastes améliorait la force musculaire ou prévenait ou ralentissait la progression de la faiblesse musculaire comme le montrent les paramètres suivants :

   2.1) Augmentation de la force volontaire de l'extension du poignet du sujet effectuée par l'extenseur radial du carpe 12 ou 24 semaines après la transplantation de myoblastes par rapport aux valeurs pré-transplantation du même muscle.

   2.2) Réduction de la fatigue de la force volontaire d'extension du poignet du sujet réalisée par l'extenseur radial du carpe 12 ou 24 semaines après la greffe de myoblastes par rapport aux valeurs de fatigue pré-greffe du même muscle.

   2.3) Réduire la progression de la faiblesse musculaire dans le muscle injecté par le myoblaste par rapport au muscle controlatéral témoin.

3. Vérifier l'efficacité à long terme de l'immunosuppression du tacrolimus pour contrôler le rejet aigu dans la transplantation de myoblastes (en examinant la présence de fibres musculaires exprimant la dystrophine normale et l'absence de réponses immunitaires spécifiques)