Transplantace myoblastů pacientům s Duchennovou svalovou dystrofií (DMD).

Duchennova svalová dystrofie (DMD) je degenerativní onemocnění genetického původu způsobené mutací genu kódujícího protein dystrofin. Tato mutace vede k nedostatku dystrofinu v svalových vláknech, což způsobuje progresivní svalovou degeneraci následujícím mechanismem: (1) nedostatek dystrofinu vede k tomu, že svalová vlákna jsou velmi zranitelná vůči svalové kontrakci-relaxaci, což způsobuje časté poškození a nekrózu svalových vláken; (2) po nekróze následuje regenerace svalových vláken, pokud není vyčerpána regenerační kapacita svalu; (3) když je regenerační kapacita svalu vyčerpána, svalová vlákna se stanou atrofickými a nakonec se ztratí; (4) fibróza a tuková infiltrace nahrazují ztracená svalová vlákna. Tato progresivní destrukce svalů probíhá ve většině svalů končetin a trupu, což vede k progresivní ztrátě svalové síly, muskulotendinózním kontrakturám, restriktivní respirační insuficienci a předčasné smrti mezi 17. a 30. rokem.

Transplantace myoblastů získaných od zdravého dárce je potenciální léčbou DMD. Po intramuskulární injekci se dárcovské myoblasty spojí s svalovými vlákny pacienta a vnesou do nich normální gen pro dystrofin. V předchozí klinické studii fáze 1A výzkumníci prokázali, že transplantace myoblastů vyrostlých ze svalové biopsie zdravého dárce zavedla normální dystrofinový gen do svalových vláken DMD s následnou expresí normální dystrofinové mRNA a obnovením dystrofinového proteinu v několik svalových vláken.

Cílem této fáze I/II klinické studie je zjistit, zda je transplantace normálních myoblastů do jednoho svalu (v tomto případě extensor carpi radialis) pacientů s DMD bezpečná a zlepší sílu tohoto svalu. Pacientům budou transplantovány myoblasty vyrostlé ze svalové biopsie zdravého dárce. Třicet milionů myoblastů bude injikováno na cm krychle do postupně většího objemu svalu (tj. krychle 3, 6 a 9 cm). Do kontralaterálního svalu bude injikován fyziologický roztok jako kontrola. Pacienti a vyšetřovatelé budou slepí ke straně, do které byly injikovány buňky. Síla obou svalů bude měřena 3 měsíce po transplantaci, aby se ověřilo, zda transplantace myoblastů zvýšila svalovou sílu. Pokud nedojde k významnému zvýšení síly, protokol bude pro daného pacienta okamžitě ukončen. Pokud dojde k významnému nárůstu síly, bude pacient udržován v imunosupresi do 6 měsíců a svalová síla bude přehodnocena.

Cíle této fáze I/II klinické studie s pacienty s DMD jsou tedy:

Primární cíl:

Vyhodnotit bezpečnost postupu vysokohustotních injekcí dárcovských myoblastů do celého svalu (při imunosupresi takrolimem).

Sekundární cíle:

1. Vyhodnotit, zda transplantace myoblastů vedla k přítomnosti dystrofin-pozitivních myovláknů dárcovského původu.

2. Vyhodnotit, zda transplantace myoblastu zlepšila svalovou sílu nebo zabránila či zpomalila progresi svalové slabosti, jak ukazují následující parametry:

   2.1) Zvýšení dobrovolné síly extenze zápěstí subjektu provedené extensor carpi radialis 12 nebo 24 týdnů po transplantaci myoblastu ve srovnání s předtransplantačními hodnotami stejného svalu.

   2.2) Snížení únavy dobrovolné síly extenze zápěstí subjektu provedené extensor carpi radialis 12 nebo 24 týdnů po transplantaci myoblastu ve srovnání s hodnotami předtransplantační únavy stejného svalu.

   2.3) Snížit progresi svalové slabosti ve svalu, kterému byl injikován myoblast, ve srovnání s kontrolním kontralaterálním svalem.

3. Ověřit dlouhodobou účinnost imunosuprese takrolimu ke kontrole akutní rejekce při transplantaci myoblastů (zkoumáním přítomnosti svalových vláken exprimujících normální dystrofin a nepřítomnosti specifických imunitních odpovědí)