Trapianto di mioblasti in pazienti affetti da distrofia muscolare di Duchenne (DMD).

La distrofia muscolare di Duchenne (DMD) è una malattia degenerativa di origine genetica, dovuta a una mutazione del gene che codifica per la proteina distrofina. Questa mutazione porta alla carenza di distrofina nelle miofibre, causando una progressiva degenerazione muscolare mediante il seguente meccanismo: (1) la carenza di distrofina rende le miofibre molto vulnerabili alla contrazione-rilassamento muscolare, causando frequenti danni e necrosi delle miofibre; (2) la necrosi è seguita dalla rigenerazione delle miofibre, purché la capacità rigenerativa del muscolo non sia esaurita; (3) quando la capacità rigenerativa del muscolo è esaurita, le miofibre diventano atrofiche e alla fine vengono perse; (4) la fibrosi e l'infiltrazione di grasso sostituiscono le miofibre perdute. Questa progressiva distruzione muscolare avviene nella maggior parte dei muscoli degli arti e del tronco, portando a progressiva perdita di forza muscolare, contratture muscolotendinee, insufficienza respiratoria restrittiva e morte prematura tra i 17 ei 30 anni.

Il trapianto di mioblasti ottenuti da un donatore sano è un potenziale trattamento della DMD. Dopo l'iniezione intramuscolare, i mioblasti del donatore si fondono con le miofibre del paziente, introducendo in esse il normale gene della distrofina. In un precedente studio clinico di Fase 1A, i ricercatori hanno dimostrato che il trapianto di mioblasti cresciuti dalla biopsia muscolare di un donatore sano ha introdotto il normale gene della distrofina nelle miofibre DMD, con la conseguente espressione del normale mRNA della distrofina e il ripristino della proteina della distrofina in diverse miofibre.

Lo scopo di questa fase I/II della sperimentazione clinica è di indagare se il trapianto di mioblasti normali in un muscolo (in questo caso, l'estensore radiale del carpo) di pazienti affetti da DMD è sicuro e migliorerà la forza di quel muscolo. I pazienti saranno trapiantati con mioblasti cresciuti dalla biopsia muscolare di un donatore sano. Trenta milioni di mioblasti saranno iniettati per cm cubo in un volume muscolare progressivamente più alto (cioè 3, 6 e 9 cm cubo). Il muscolo controlaterale verrà iniettato con soluzione salina come controllo. I pazienti e gli investigatori saranno ciechi al lato iniettato di cellule. La forza di entrambi i muscoli sarà misurata 3 mesi dopo il trapianto per verificare se il trapianto di mioblasti ha aumentato la forza muscolare. Se non vi è un aumento significativo della forza, il protocollo verrà interrotto immediatamente per quel paziente. Se c'è un aumento significativo della forza, il paziente sarà mantenuto sotto immunosoppressione fino a 6 mesi e la forza muscolare sarà rivalutata.

Gli obiettivi di questo studio clinico di Fase I/II con pazienti affetti da DMD sono quindi:

Obiettivo primario:

Per valutare la sicurezza di una procedura di iniezioni ad alta densità di mioblasti donatori in tutto un muscolo (sotto immunosoppressione da tacrolimus).

Obiettivi secondari:

1. Valutare se il trapianto di mioblasti ha portato alla presenza di miofibre distrofina-positive di origine donatore.

2. Valutare se il trapianto di mioblasti ha migliorato la forza muscolare o prevenuto o rallentato la progressione della debolezza muscolare come mostrato dai seguenti parametri:

   2.1) Aumento della forza volontaria dell'estensione del polso del soggetto effettuata dall'estensore radiale del carpo 12 o 24 settimane dopo il trapianto di mioblasti rispetto ai valori pre-trapianto dello stesso muscolo.

   2.2) Riduzione dell'affaticamento della forza volontaria dell'estensione del polso del soggetto effettuata dall'estensore radiale del carpo 12 o 24 settimane dopo il trapianto di mioblasti rispetto ai valori di affaticamento pre-trapianto dello stesso muscolo.

   2.3) Ridurre la progressione della debolezza muscolare nel muscolo mioblastico iniettato rispetto al muscolo controlaterale di controllo.

3. Verificare l'efficacia a lungo termine dell'immunosoppressione del tacrolimus nel controllo del rigetto acuto nel trapianto di mioblasti (esaminando la presenza di fibre muscolari che esprimono la normale distrofina e l'assenza di risposte immunitarie specifiche)