Myoblastien siirto Duchennen lihasdystrofiaa (DMD) sairastaville potilaille

Duchennen lihasdystrofia (DMD) on geneettistä alkuperää oleva rappeuttava sairaus, joka johtuu dystrofiiniproteiinia koodaavan geenin mutaatiosta. Tämä mutaatio johtaa dystrofiinin puutteeseen myofibereissa, mikä aiheuttaa progressiivista lihasten rappeutumista seuraavan mekanismin avulla: (1) dystrofiinin puutos johtaa siihen, että lihassäikeet ovat erittäin herkkiä lihasten supistumiselle-relaksaatiolle, mikä aiheuttaa toistuvia myofiberien vaurioita ja nekroosia; (2) nekroosia seuraa myofiber regeneraatio niin kauan kuin lihasten regeneraatiokyky ei ole loppunut; (3) kun lihaksen regeneratiivisuus on lopussa, lihassäikeistä tulee atrofisia ja ne lopulta menetetään; (4) fibroosi ja rasvainfiltraatio korvaavat menetetyt myofiberit. Tämä progressiivinen lihasten tuhoutuminen tapahtuu useimmissa raajojen ja vartalon lihaksissa, mikä johtaa asteittaiseen lihasvoiman menettämiseen, lihasten ja nivelten kontraktuureihin, rajoittavaan hengitysvajaukseen ja ennenaikaiseen kuolemaan 17–30 vuoden välillä.

Terveeltä luovuttajalta saatujen myoblastien siirto on mahdollinen DMD:n hoito. Lihaksensisäisen injektion jälkeen luovuttajan myoblastit fuusioituvat potilaan myofiberien kanssa ja tuovat niihin normaalin dystrofiinigeenin. Edellisessä vaiheen 1A kliinisessä tutkimuksessa tutkijat osoittivat, että terveen luovuttajan lihasbiopsiasta kasvatettujen myoblastien siirto toi normaalin dystrofiinigeenin DMD-lihaskuituihin, minkä seurauksena normaalin dystrofiinin mRNA:n ilmentyminen ja dystrofiiniproteiinin palautuminen useita myofibereja.

Tämän kliinisen tutkimuksen vaiheen I/II tavoitteena on tutkia, onko normaalien myoblastien siirto DMD-potilaiden yhteen lihakseen (tässä tapauksessa extensor carpi radialis) turvallista ja parantaako se kyseisen lihaksen voimaa. Potilaille siirretään myoblasteja, jotka on kasvatettu terveen luovuttajan lihaskoepalasta. Kolmekymmentä miljoonaa myoblastia injektoidaan kuutio senttimetriä kohti asteittain suurempaan lihastilavuuteen (eli 3, 6 ja 9 cm:n kuutioon). Vastapuoliseen lihakseen ruiskutetaan suolaliuosta kontrollina. Potilaat ja tutkijat ovat sokeita sille puolelle, jolle soluja injektoidaan. Molempien lihasten voima mitataan 3 kuukautta siirron jälkeen sen varmistamiseksi, lisäsikö myoblastisiirto lihasvoimaa. Jos voimakkuus ei kasva merkittävästi, protokolla lopetetaan välittömästi kyseiselle potilaalle. Jos voima kasvaa merkittävästi, potilasta pidetään immunosuppression alaisena 6 kuukauden ajan ja lihasvoima arvioidaan uudelleen.

Tämän DMD-potilaiden vaiheen I/II kliinisen tutkimuksen tavoitteet ovat näin:

Ensisijainen tavoite:

Luovuttajien myoblastien suuritiheyksisten injektioiden turvallisuuden arviointi koko lihakseen (takrolimuusin aiheuttaman immunosuppression alaisena).

Toissijaiset tavoitteet:

1. Arvioida, johtuiko myoblastisiirto luovuttajaalkuperää olevien dystrofiinipositiivisten myofiberien läsnäoloon.

2. Arvioida, paransiko myoblastisiirto lihasvoimaa tai esti tai hidasti lihasheikkouden etenemistä seuraavien parametrien osoittamalla tavalla:

   2.1) Extensor carpi radialisin tekemän koehenkilön ranteen pidennyksen vapaaehtoisen voiman lisäys 12 tai 24 viikkoa myoblastisiirron jälkeen verrattuna saman lihaksen siirtoa edeltäviin arvoihin.

   2.2) Koehenkilön extensor carpi radialisin tekemän vapaaehtoisen voiman väsymisen vähentäminen 12 tai 24 viikkoa myoblastisiirron jälkeen verrattuna saman lihaksen siirtoa edeltäviin väsymysarvoihin.

   2.3) Vähentää lihasheikkouden etenemistä myoblastin injektoidussa lihaksessa verrattuna kontralateraaliseen kontrollilihakseen.

3. Takrolimuusi-immunosuppression pitkäaikaisen tehokkuuden varmistaminen myoblastisiirron akuutin hylkimisen hallinnassa (tutkimalla normaalia dystrofiinia ilmentävien lihassäikeiden läsnäoloa ja spesifisten immuunivasteiden puuttumista)