L'électrochimiothérapie induit des modifications du microenvironnement tumoral des métastases cutanées et sous-cutanées chez les patients atteints de mélanome cutané

L'étude est prospective. L'objectif principal est d'évaluer les changements dans le microenvironnement tumoral des métastases de mélanome cutané et sous-cutané induites par électrochimiothérapie (ECT), sur la base de l'analyse histologique des métastases traitées et non traitées avant et après traitement. L'objectif secondaire est de déterminer si les modifications du microenvironnement tumoral diffèrent selon l'agent chimiothérapeutique utilisé.

Dans l'étude, 10 à 15 patients seront recrutés et répartis en deux bras, ECT avec bléomycine et ECT avec cysplatine.

L'ECT sera proposée aux patients atteints de mélanome cutané et d'au moins 5 métastases de mélanome cutané et/ou sous-cutané en transit ou à distance, quels que soient les traitements antérieurs. La décision sera prise au sein d’un comité multidisciplinaire des tumeurs. Le choix du médicament chimiothérapeutique dépendra de la taille et du nombre de lésions à traiter. L'inclusion dans l'étude n'a aucune influence sur la décision concernant le moment du traitement par immunothérapie. Le traitement par immunothérapie sera ultérieurement inclus comme facteur dans l'analyse statistique.

L'ECT sera réalisée selon les procédures opératoires standard pour le traitement des tumeurs cutanées et sous-cutanées par ECT. L'ECT sera réalisée dans les 8 à 28 minutes après l'administration en bolus intraveineux de bléomycine (15 000 UI/m2 de BSA) ou directement après l'administration intratumorale de cysplatine (0,5-2 mg/cm3 de tumeur). CliniporatorTM (IGEA S.P.A., Carpi, Italie) sera utilisé pour appliquer les impulsions (8 impulsions, 1300 V/cm, 100 μs, 5 kHz). Le déclenchement des impulsions électriques sera synchronisé avec les signaux ECG, via le dispositif de déclenchement ECG AccuSync pour éviter la délivrance d'impulsions dans la période vulnérable du cœur. Le type d'électrode utilisé sera choisi en fonction de la taille et de la localisation des tumeurs.

Une métastase cutanée/sous-cutanée sera excisée avant l'ECT. Une métastase cutanée/sous-cutanée traitée sera excisée 2 à 4 et 9 à 13 jours après l'intervention. Une métastase cutanée/sous-cutanée non traitée sera excisée aux jours 9-13. Les excisions seront réalisées sous anesthésie locale. Tous les patients seront inscrits à l'étude après que les procédures et l'étude leur auront été expliquées en détail et qu'ils auront signé un formulaire de consentement éclairé. Un échantillon de sang veineux sera prélevé aux mêmes moments (avant l'ECT, 2 à 4 jours et 9 à 13 jours après l'ECT).

L'examen histologique, l'évaluation du degré de régression et de la présence de lymphocytes infiltrant la tumeur (TIL) seront réalisés selon des procédures standardisées sur des coupes de tissus de 2 à 3 μm d'épaisseur, préalablement fixées au formol et incluses en paraffine (FFPE), colorées au méthode de coloration à l'hématoxyline-éosine (HE).

La caractérisation immunohistochimique du microenvironnement tumoral sera réalisée sur des coupes de tissus de 2 à 4 µm d'épaisseur pré-fixées dans du formol et incluses dans de la paraffine. Nous utiliserons des anticorps monoclonaux primaires disponibles dans le commerce pour définir l'infiltrat inflammatoire de la tumeur, le stroma et le système vasculaire. Nous utiliserons les anticorps suivants : CD3, CD4, CD8, CD56, CD163, FoxP3, ERG, PGM1, CD274 (PD-L1). Le choix des anticorps utilisés et la méthode d'analyse pathohistologique peuvent changer en fonction des résultats. La liaison spécifique des anticorps primaires sera visualisée à l’aide du système de détection en trois étapes recommandé OptiView DAB IHC Detection Kit (Cat. N° 760-700 ; fabriqué par Ventana ROCHE inc., Tucson, AZ, USA) selon les instructions du fabricant. L'analyse sera réalisée par deux pathologistes indépendants.

Nous collecterons également des informations sur les traitements antérieurs du mélanome cutané et une documentation photographique sur l'efficacité du traitement ECT. Les patients rempliront également des questionnaires de qualité de vie internationalement reconnus et validés (EORTC QLQ-C 30 et EQ-5D-5L) lors de l'inscription, après l'ECT, 3 mois, 6 mois et 12 mois après l'ECT, puis une fois par an pendant le suivi. -période de mise en place.