Elektrokjemoterapi induserer endringer i tumormikromiljøet av kutane og subkutane metastaser hos pasienter med kutant melanom

Studien er prospektiv. Hovedmålet er å evaluere endringene i tumormikromiljøet av kutane og subkutane melanommetastaser indusert av elektrokjemoterapi (ECT), basert på histologisk analyse av behandlede og ubehandlede metastaser før og etter behandling. Det sekundære målet er å finne ut om endringene i tumormikromiljøet varierer avhengig av kjemoterapeutisk middel som brukes.

I studien vil 10-15 pasienter bli registrert og delt i to armer, ECT med bleomycin og ECT med cysplatin.

ECT vil bli tilbudt pasienter med kutan melanom og minst 5 in-transit eller fjernt kutane og/eller subkutane melanommetastaser uavhengig av tidligere behandlinger. Avgjørelsen vil bli tatt i et tverrfaglig svulstnemnd. Valget av kjemoterapeutisk medikament vil avhenge av størrelsen og antallet lesjoner som skal behandles. Inkludering i studien har ingen innflytelse på beslutningen om tidspunkt for behandling med immunterapi. Behandling med immunterapi vil senere inngå som en faktor i den statistiske analysen.

ECT vil bli utført i henhold til standard operasjonsprosedyrer for behandling av kutane og subkutane svulster med ECT. ECT vil bli utført innen 8 - 28 minutter etter intravenøs bolusadministrasjon av bleomycin (15.000 IE/m2 BSA) eller direkte etter intratumoral administrering av cysplatin (0,5-2 mg/cm3 tumor). CliniporatorTM (IGEA S.P.A., Carpi, Italia) vil bli brukt til å påføre pulsene (8 pulser, 1300 V/cm, 100 μs, 5 kHz). Utløsning av de elektriske pulsene vil bli synkronisert med EKG-signaler, gjennom EKG-triggerenheten AccuSync for å unngå levering av pulser i sårbare perioder av hjertet. Typen elektrode som brukes vil bli valgt i henhold til størrelsen og plasseringen av svulstene.

En kutan/subkutan metastase vil bli fjernet før ECT. En behandlet kutan/subkutan metastase vil bli fjernet 2-4 og 9-13 dager etter inngrepet. En ubehandlet kutan/subkutan metastase vil bli fjernet på dag 9-13. Eksisjonene vil bli utført under lokalbedøvelse. Alle pasienter vil bli registrert i studien etter at prosedyrene og studien har blitt forklart dem i detalj og de har signert et informert samtykkeskjema. Det vil bli tatt en venøs blodprøve på samme tidspunkt (før ECT, 2-4 dager og 9-13 dager etter ECT).

Histologisk undersøkelse, vurdering av grad av regresjon og tilstedeværelse av tumorinfiltrerende lymfocytter (TIL) vil bli utført i henhold til standardiserte prosedyrer på 2-3 μm tykke vevssnitt, tidligere fiksert i formalin og innebygd i parafin (FFPE), farget med hematoxylin-eosin (HE) fargemetode.

Immunhistokjemisk karakterisering av tumormikromiljøet vil bli utført på 2-4 μm tykke vevssnitt prefiksert i formalin og innebygd i parafin. Vi vil bruke kommersielt tilgjengelige primære monoklonale antistoffer for å definere tumorinflammatorisk infiltrat, stroma og vaskulatur. Vi vil bruke følgende antistoffer: CD3, CD4, CD8, CD56, CD163, FoxP3, ERG, PGM1, CD274 (PD-L1). Valget av antistoffer som brukes og metoden for patohistologisk analyse kan endres avhengig av resultatene. Spesifikk binding av primære antistoffer vil bli visualisert ved å bruke det anbefalte tre-trinns deteksjonssystemet OptiView DAB IHC Detection Kit (Kat. nr. 760-700; produsert av Ventana ROCHE inc., Tucson, AZ, USA) i henhold til produsentens instruksjoner. Analysen vil bli utført av to uavhengige patologer.

Vi vil også samle informasjon om tidligere behandlinger for hudmelanom og fotografisk dokumentasjon av effektiviteten av ECT-behandling. Pasienter vil også fylle ut internasjonalt anerkjente, validerte livskvalitetsspørreskjemaer (EORTC QLQ-C 30 og EQ-5D-5L) ved innskriving, etter ECT, 3 måneder, 6 måneder og 12 måneder etter ECT og deretter en gang i året under oppfølgingen. -opp periode.