L'elettrochemioterapia induce cambiamenti nel microambiente tumorale delle metastasi cutanee e sottocutanee in pazienti con melanoma cutaneo

Lo studio è prospettico. L'obiettivo primario è valutare i cambiamenti nel microambiente tumorale delle metastasi di melanoma cutaneo e sottocutaneo indotte dall'elettrochemioterapia (ECT), sulla base dell'analisi istologica delle metastasi trattate e non trattate prima e dopo il trattamento. Lo scopo secondario è determinare se i cambiamenti nel microambiente tumorale differiscono a seconda dell'agente chemioterapico utilizzato.

Nello studio verranno arruolati 10-15 pazienti divisi in due bracci, ECT con bleomicina ed ECT con cisplatino.

L'ECT sarà offerta ai pazienti con melanoma cutaneo e almeno 5 metastasi di melanoma cutaneo e/o sottocutaneo in transito o a distanza, indipendentemente dai trattamenti precedenti. La decisione sarà presa da un comitato multidisciplinare sui tumori. La scelta del farmaco chemioterapico dipenderà dalla dimensione e dal numero delle lesioni da trattare. L'inclusione nello studio non ha alcuna influenza sulla decisione riguardante i tempi del trattamento con immunoterapia. Il trattamento con immunoterapia verrà successivamente incluso come fattore nell'analisi statistica.

L'ECT verrà eseguita secondo le procedure operative standard per il trattamento dei tumori cutanei e sottocutanei con ECT. L'ECT verrà eseguito entro 8 - 28 minuti dalla somministrazione in bolo endovenoso di bleomicina (15.000 UI/m2 BSA) o direttamente dopo la somministrazione intratumorale di cisplatino (0,5-2 mg/cm3 tumore). Per applicare gli impulsi verrà utilizzato CliniporatorTM (IGEA S.P.A., Carpi, Italia) (8 impulsi, 1300 V/cm, 100 μs, 5 kHz). L'attivazione degli impulsi elettrici sarà sincronizzata con i segnali ECG, attraverso il dispositivo di attivazione ECG AccuSync per evitare l'erogazione di impulsi nei periodi vulnerabili del cuore. Il tipo di elettrodo utilizzato verrà selezionato in base alla dimensione e alla posizione dei tumori.

Una metastasi cutanea/sottocutanea verrà asportata prima dell'ECT. Una metastasi cutanea/sottocutanea trattata verrà asportata 2-4 e 9-13 giorni dopo la procedura. Una metastasi cutanea/sottocutanea non trattata verrà asportata nei giorni 9-13. Le escissioni verranno eseguite in anestesia locale. Tutti i pazienti verranno arruolati nello studio dopo che le procedure e lo studio saranno stati loro spiegati in dettaglio e avranno firmato un modulo di consenso informato. Verrà prelevato un campione di sangue venoso negli stessi momenti (prima dell'ECT, 2-4 giorni e 9-13 giorni dopo l'ECT).

L'esame istologico, la valutazione del grado di regressione e la presenza di linfociti infiltranti il ​​tumore (TIL) saranno eseguiti secondo procedure standardizzate su sezioni di tessuto dello spessore di 2-3 μm, precedentemente fissate in formalina e incluse in paraffina (FFPE), colorate con il metodo di colorazione con ematossilina-eosina (HE).

La caratterizzazione immunoistochimica del microambiente tumorale sarà eseguita su sezioni di tessuto spesse 2-4 μm prefissate in formalina e incluse in paraffina. Utilizzeremo anticorpi monoclonali primari disponibili in commercio per definire l'infiltrato infiammatorio, lo stroma e il sistema vascolare del tumore. Utilizzeremo i seguenti anticorpi: CD3, CD4, CD8, CD56, CD163, FoxP3, ERG, PGM1, CD274 (PD-L1). La scelta degli anticorpi utilizzati e il metodo dell'analisi istopatologica possono cambiare a seconda dei risultati. Il legame specifico degli anticorpi primari verrà visualizzato utilizzando il sistema di rilevamento in tre fasi consigliato OptiView DAB IHC Detection Kit (Cat. N. 760-700; prodotto da Ventana ROCHE inc., Tucson, AZ, USA) secondo le istruzioni del produttore. L'analisi sarà eseguita da due patologi indipendenti.

Raccoglieremo anche le informazioni sui precedenti trattamenti per il melanoma cutaneo e la documentazione fotografica dell'efficacia del trattamento ECT. I pazienti compileranno inoltre questionari sulla qualità della vita validati e riconosciuti a livello internazionale (EORTC QLQ-C 30 e EQ-5D-5L) al momento dell'arruolamento, dopo l'ECT, 3 mesi, 6 mesi e 12 mesi dopo l'ECT ​​e poi una volta all'anno durante il follow-up. periodo di up.