Электрохимиотерапия вызывает изменения микроокружения опухоли при кожных и подкожных метастазах у больных меланомой кожи

Исследование является проспективным. Основная цель - оценить изменения в опухолевом микроокружении кожных и подкожных метастазов меланомы, вызванные электрохимиотерапией (ЭСТ), на основе гистологического анализа леченных и нелеченных метастазов до и после лечения. Вторичная цель — определить, различаются ли изменения микроокружения опухоли в зависимости от используемого химиотерапевтического агента.

В исследование будут включены 10-15 пациентов, которые будут разделены на две группы: ЭСТ с блеомицином и ЭСТ с цисплатином.

ЭСТ будет предлагаться пациентам с кожной меланомой и не менее 5 транзитными или отдаленными кожными и/или подкожными метастазами меланомы независимо от предыдущего лечения. Решение будет принято на многопрофильной онкологической консилиуме. Выбор химиотерапевтического препарата будет зависеть от размера и количества поражений, подлежащих лечению. Включение в исследование не влияет на решение о сроках лечения иммунотерапией. Лечение иммунотерапией позже будет включено в статистический анализ в качестве фактора.

ЭСТ будет проводиться в соответствии со стандартными операционными процедурами лечения кожных и подкожных опухолей с помощью ЭСТ. ЭСТ будет проводиться в течение 8–28 минут после внутривенного болюсного введения блеомицина (15 000 МЕ/м2 БСА) или непосредственно после внутриопухолевого введения цисплатина (0,5-2 мг/см3 опухоли). Для подачи импульсов будет использоваться CliniporatorTM (IGEA S.P.A., Карпи, Италия) (8 импульсов, 1300 В/см, 100 мкс, 5 кГц). Запуск электрических импульсов будет синхронизирован с сигналами ЭКГ с помощью устройства запуска ЭКГ AccuSync, чтобы избежать доставки импульсов в уязвимый период сердца. Тип используемого электрода будет выбран в зависимости от размера и расположения опухолей.

Перед ЭСТ будет иссечен один кожный/подкожный метастаз. Один обработанный кожный/подкожный метастаз будет удален через 2–4 и 9–13 дней после процедуры. Необработанные кожные/подкожные метастазы будут иссечены на 9-13 день. Иссечения будут проводиться под местной анестезией. Все пациенты будут включены в исследование после того, как им будут подробно объяснены процедуры, суть исследования и они подпишут форму информированного согласия. Образец венозной крови будет взят в одни и те же сроки (до ЭСТ, через 2–4 дня и через 9–13 дней после ЭСТ).

Гистологическое исследование, оценка степени регрессии и наличия инфильтрирующих опухоль лимфоцитов (TIL) будет проводиться по стандартизированным процедурам на срезах ткани толщиной 2-3 мкм, предварительно зафиксированных в формалине и залитых в парафин (FFPE), окрашенных метод окраски гематоксилин-эозином (HE).

Иммуногистохимическая характеристика микроокружения опухоли будет проводиться на срезах ткани толщиной 2–4 мкм, предварительно зафиксированных в формалине и залитых в парафин. Мы будем использовать коммерчески доступные первичные моноклональные антитела для определения воспалительного инфильтрата, стромы и сосудистой сети опухоли. Мы будем использовать следующие антитела: CD3, CD4, CD8, CD56, CD163, FoxP3, ERG, PGM1, CD274 (PD-L1). Выбор используемых антител и метод патогистологического анализа могут меняться в зависимости от результатов. Специфическое связывание первичных антител будет визуализировано с использованием рекомендуемой трехэтапной системы обнаружения OptiView DAB IHC Detection Kit (кат. № 760-700; производства Ventana ROCHE Inc., Тусон, Аризона, США) в соответствии с инструкциями производителя. Анализ будут проводить два независимых патологоанатома.

Мы также соберем информацию о предыдущих методах лечения меланомы кожи и фотографическую документацию эффективности лечения ЭСТ. Пациенты также будут заполнять международно признанные, проверенные опросники качества жизни (EORTC QLQ-C 30 и EQ-5D-5L) при зачислении, после ЭСТ, через 3 месяца, 6 месяцев и 12 месяцев после ЭСТ, а затем один раз в год в течение последующего периода. период подъема.