Elektrokemoterapi inducerer ændringer i tumormikromiljøet af kutane og subkutane metastaser hos patienter med kutant melanom

Undersøgelsen er prospektiv. Det primære formål er at evaluere ændringerne i tumormikromiljøet af kutane og subkutane melanommetastaser induceret af elektrokemoterapi (ECT), baseret på den histologiske analyse af behandlede og ubehandlede metastaser før og efter behandling. Det sekundære mål er at bestemme, om ændringerne i tumormikromiljøet er forskellige afhængigt af det anvendte kemoterapeutiske middel.

I undersøgelsen vil 10-15 patienter blive indskrevet og opdelt i to arme, ECT med bleomycin og ECT med cysplatin.

ECT vil blive tilbudt patienter med cuteant melanom og mindst 5 in-transit eller fjerntliggende kutane og/eller subkutane melanommetastaser uanset tidligere behandlinger. Beslutningen vil blive truffet i et tværfagligt tumornævn. Valget af kemoterapeutisk lægemiddel vil afhænge af størrelsen og antallet af læsioner, der skal behandles. Inddragelse i undersøgelsen har ingen indflydelse på beslutningen om tidspunktet for behandling med immunterapi. Behandling med immunterapi vil senere indgå som en faktor i den statistiske analyse.

ECT vil blive udført i henhold til standard operationsprocedurer for behandling af kutane og subkutane tumorer med ECT. ECT vil blive udført inden for 8 - 28 minutter efter intravenøs bolusadministration af bleomycin (15.000 IE/m2 BSA) eller direkte efter intratumoral administration af cysplatin (0,5-2 mg/cm3 tumor). CliniporatorTM (IGEA S.P.A., Carpi, Italien) vil blive brugt til at påføre pulserne (8 pulser, 1300 V/cm, 100 μs, 5 kHz). Udløsning af de elektriske pulser vil blive synkroniseret med EKG-signaler gennem EKG-triggerenheden AccuSync for at undgå levering af pulser i en sårbar periode af hjertet. Den anvendte type elektrode vil blive valgt i henhold til størrelsen og placeringen af ​​tumorerne.

En kutan/subkutan metastase vil blive udskåret før ECT. En behandlet kutan/subkutan metastase vil blive skåret ud 2-4 og 9-13 dage efter indgrebet. En ubehandlet kutan/subkutan metastase vil blive skåret ud på dag 9-13. Udskæringerne vil blive udført under lokalbedøvelse. Alle patienter vil blive tilmeldt undersøgelsen, efter at procedurerne og undersøgelsen er blevet forklaret detaljeret for dem, og de har underskrevet en informeret samtykkeformular. Der tages en venøs blodprøve på samme tidspunkt (før ECT, 2-4 dage og 9-13 dage efter ECT).

Histologisk undersøgelse, vurdering af graden af ​​regression og tilstedeværelsen af ​​tumorinfiltrerende lymfocytter (TIL) vil blive udført efter standardiserede procedurer på 2-3 μm tykke vævssnit, tidligere fikseret i formalin og indlejret i paraffin (FFPE), farvet med hæmatoxylin-eosin (HE) farvningsmetode.

Immunhistokemisk karakterisering af tumormikromiljøet vil blive udført på 2-4 μm tykke vævssnit præfikseret i formalin og indlejret i paraffin. Vi vil bruge kommercielt tilgængelige primære monoklonale antistoffer til at definere tumorinflammatoriske infiltrat, stroma og vaskulatur. Vi vil bruge følgende antistoffer: CD3, CD4, CD8, CD56, CD163, FoxP3, ERG, PGM1, CD274 (PD-L1). Valget af anvendte antistoffer og metoden til patohistologisk analyse kan ændre sig afhængigt af resultaterne. Specifik binding af primære antistoffer vil blive visualiseret ved hjælp af det anbefalede tre-trins detektionssystem OptiView DAB IHC Detection Kit (Kat. nr. 760-700; fremstillet af Ventana ROCHE inc., Tucson, AZ, USA) i henhold til producentens instruktioner. Analysen vil blive udført af to uafhængige patologer.

Vi vil også indsamle oplysninger om tidligere behandlinger for kutant melanom og fotografisk dokumentation af effektiviteten af ​​ECT-behandling. Patienterne vil også udfylde internationalt anerkendte, validerede livskvalitetsspørgeskemaer (EORTC QLQ-C 30 og EQ-5D-5L) ved indskrivning, efter ECT, 3 måneder, 6 måneder og 12 måneder efter ECT og derefter en gang om året i den efterfølgende -op periode.