PED/PEA-15 fehérje, PCOS, elhízás, inzulinérzékenységi indexek, metformin, orális fogamzásgátlók

Tárgyak:

Húsz elhízott PCOS nőt (életkor: 24,7±18 év; BMI: 30±2,4 kg/m2) egymást követően vettek fel a nápolyi Federico II Egyetem Molekuláris és Klinikai Endokrinológiai és Onkológiai Tanszékének endokrinológiai osztályára, és beiratkoztak ezt a klinikai vizsgálatot. A PCOS diagnózisa a PCOS diagnosztikai kritériumai szerint történt A vizsgálatba való belépéskor a betegeket két kezelési csoportba randomizálták, az inzulinérzékenység szerint. Az OCP csoportban 10 beteg (BMI 29,7± 1,5 kg/m2) kapott 30 µg etinilösztradiolt plusz 30 mg drospirenont 21 nap/hónap. A MET csoportban 10 beteg (BMI 30,4±3,1 kg/m2) naponta háromszor 1250 mg metformint kapott. A követés időtartama 6 hónap volt. A kontrollcsoport 10 egészséges női önkéntesből állt, akik életkora megfelelő volt.

Mód:

Mivel minden PCOS nő anovulációs volt, progeszteron provokációs teszten estek át (100 mg természetes progeszteron i.m.; Prontogest, Amsa, Róma, Olaszország), amely minden PCOS nőnél méhvérzést váltott ki. A 2-es típusú cukorbetegség vagy a kóros glükóztolerancia jelenlétének kizárása érdekében orális glükóztolerancia tesztet (OGTT) végeztek, és meghatározták az OGTT-re adott normál glükózválaszt a „Szakértői bizottság jelentése a diabetes mellitus diagnosztizálásáról és osztályozásáról” című dokumentumban. '.

Minden antropometrikus mérést csak könnyű ruhát viselő alanyokkal végeztek cipő nélkül. Minden nőnél megmértük a súlyt és a magasságot a BMI [súly (kg) osztva a magasság négyzetével (m2), kg/m2] kiszámításához. A magasságot cm-es pontossággal falra szerelt stadionmérővel mértük. A testsúlyt (BW) 50 g pontossággal határoztuk meg egy kalibrált mérleggel.

A betegek standardizált interjút kaptak, hogy információt szerezzenek az elhízás időtartamáról, az étkezési szokásokról, a dohányzási szokásokról és a testmozgásról. Különösen arra kérték az alanyokat, hogy készítsenek napi feljegyzést a fizikai aktivitás mértékéről (nincs testmozgás; ≤2-3 óra/hét; ≥2-3 óra/hét). A felvétel előtti táplálékfelvételt és a táplálkozási előzményeket egy képzett dietetikus értékelte, aki számítógéppel segített interjút (Winfood 1.5, Medimatica srl, Martinsicuro, Olaszország) használt. Minden PCOS-s nő normál kalóriatartalmú diétát kapott.

Vizsgálatok:

A vérmintákat 08:00 és 09:00 óra között vettük egy antecubitalis vénából egy éjszakai koplalás után, a beteg nyugalmi helyzetben. Az OGTT-t 75 g dextróz felhasználásával végeztük. A vérmintákat 0, 30, 60, 90, 120 perckor vettük a plazma glükóz és inzulin mérésére. Az éhgyomri plazma glükóz (FPG) szintet közvetlenül az OGTT után glükóz-oxidáz módszerrel határoztuk meg. Az éhgyomri plazma inzulin (FPI) mintákat azonnal centrifugáltuk, a plazmát elválasztottuk és -20 °C-on tároltuk a vizsgálatig. Az FPI-t szilárd fázisú kemilumineszcens enzimes immunoassay-vel mértük, a kereskedelemben kapható készletek (Immunolite Diagnostic Products Co, Los Angeles, CA) felhasználásával. 1/HOMA-IR, QUICKI és ISI kiszámítása történt.

A PED/PEA-15 fehérjét 10-12 ml frissen gyűjtött, nem alvadt teljes vérből nyert fehérvérsejt-lizátumokban mértük, 6%-os dextránnal történő elválasztás után Western blot analízissel. Western blot analízishez a fehérvérsejteket 4 °C-on TAT pufferben szolubilizáltuk, 500 g-vel 20 percig centrifugáltuk, és a felülúszó frakciókat felhasználásig -20 °C-on tároltuk. 50 μg lizátum fehérjét 100°C-ra melegítettünk Laemmli pufferben. A fehérjéket 15%-os SDS-PAGE-val választottuk el, majd 0-45 mm-es Immobilon-P membránokra (Millipore, Bedfort, MA) vittük át. A szűrőket PED/PEA-15 antiszérummal vizsgáltuk 1:2000 hígításban, amit fokozott kemilumineszcenciával és autoradiográfiával mutattunk ki. A fehérjesávokat lézeres denzitométerrel határoztuk meg, és a pixelek százalékában (tetszőleges egységekben) fejeztük ki.