PED/PEA-15 단백질, PCOS, 비만, 인슐린 감수성 지수, 메트포르민, 경구 피임약

주제:

20명의 비만 PCOS 여성(나이: 24.7±18세, BMI: 30±2.4 kg/m2)이 나폴리 페데리코 II 대학교 분자 및 임상 내분비학 및 종양학과의 내분비학과에 연속적으로 입학했으며, 이 임상 연구. PCOS의 진단은 PCOS의 진단 기준에 따라 이루어졌습니다. 연구 시작 시 환자는 인슐린 감수성에 따라 두 그룹의 치료로 무작위 배정되었습니다. OCP 그룹, 10명의 환자(BMI 29.7± 1.5 kg/m2)는 30 µg ethinylestradiol과 30 mg drospirenone을 21일/월 투여 받았습니다. MET 그룹, 10명의 환자(BMI 30.4±3.1kg/m2)는 메트포르민 1250mg을 1일 3회 투여받았다. 추적 기간은 6개월이었다. 대조군은 나이가 맞는 10명의 건강한 여성 지원자로 구성되었습니다.

행동 양식:

모든 PCOS 여성은 무배란 상태였기 때문에 모든 PCOS 여성에서 자궁 출혈을 유도하는 프로게스테론 챌린지 테스트(천연 프로게스테론 100mg i.m., Prontogest, Amsa, Rome, Italy)를 받았습니다. 제2형 당뇨병 또는 비정상적인 내당능을 배제하기 위해 경구당부하검사(OGTT)를 시행하였고, OGTT에 대한 정상 포도당 반응은 '당뇨병의 진단 및 분류에 관한 전문위원회 보고서'에 따라 정의하였다. '.

모든 인체측정학적 측정은 가벼운 옷만 입고 신발은 신지 않은 피험자를 대상으로 수행되었습니다. 각 여성의 체중과 키를 측정하여 BMI[체중(kg)을 키의 제곱(m2)으로 나눈 값, kg/m2]를 계산했습니다. 신장은 벽걸이 형 stadiometer를 사용하여 가장 가까운 cm까지 측정되었습니다. 체중(BW)은 보정된 밸런스 빔 저울을 사용하여 가장 가까운 50g으로 결정되었습니다.

환자들은 비만 기간, 식습관, 흡연 습관 및 신체 운동에 대한 정보를 얻기 위해 표준화된 인터뷰를 받았습니다. 특히, 피험자들은 신체 활동량을 매일 기록하도록 요청받았습니다(운동 없음, ≤2-3시간/주, ≥2-3시간/주). 컴퓨터 지원 인터뷰(Winfood 1.5, Medimatica srl, Martinsicuro, Italy)를 사용하는 숙련된 영양사가 사전 입원 음식 섭취 및 식이 이력을 평가했습니다. 모든 PCOS 여성은 정상 칼로리 식단을 받았습니다.

분석:

혈액 샘플은 휴식 자세에서 환자와 함께 하룻밤 금식 후 전주 정맥에서 08:00시에서 09:00시 사이에 채취되었습니다. OGTT는 75g 포도당을 사용하여 수행되었습니다. 혈장 포도당 및 인슐린 측정을 위해 혈액 샘플을 0, 30, 60, 90, 120분에 채취했습니다. 공복 혈장 포도당(FPG) 수준은 OGTT 직후 포도당 산화 효소 방법에 의해 결정되었습니다. 공복 혈장 인슐린(FPI) 샘플을 즉시 원심분리하고, 혈장을 분리하여 분석할 때까지 -20°C에서 보관했습니다. FPI는 상업적으로 이용 가능한 키트(Immunolite Diagnostic Products Co, Los Angeles, CA)를 사용하여 고체상 화학발광 효소 면역분석으로 측정되었습니다. 1/HOMA-IR, QUICKI 및 ISI가 계산되었습니다.

PED/PEA-15 단백질은 웨스턴 블롯 분석을 사용하여 덱스트란 6%로 분리한 후 새로 수집한 응고되지 않은 전혈 10~12ml에서 얻은 백혈구(WBC) 용해물에서 측정되었습니다. 웨스턴 블롯 분석을 위해 WBC를 TAT 완충액에 4°C에서 가용화하고 500g에서 20분 동안 원심분리하고 상청액 분획을 사용할 때까지 -20°C에 보관했습니다. 50 μg의 용해물 단백질 양을 Laemmli 완충액에서 100°C로 가열했습니다. 단백질을 15% SDS-PAGE로 분리한 다음 0•45mm Immobilon-P 멤브레인(Millipore, Bedfort, MA)으로 옮겼습니다. 필터는 1:2000 희석에서 PED/PEA-15 항혈청으로 탐침되었으며, 강화된 화학발광 및 자가방사선 사진에 의해 밝혀졌습니다. 단백질 밴드는 레이저 농도계로 정량화하고 픽셀의 백분율(임의 단위)로 표시했습니다.