A probiotikumok hatása a szájsebek gyógyulására – kísérleti tanulmány (PROWOUND)

Beavatkozás: a tájékozott beleegyezés és a klinikai adatok (életkor, nem) kiindulási összegyűjtése után a résztvevőket véletlenszerűen besoroljuk a kezelések valamelyikébe. Bejáratási időszakként hét napra elegendő probiotikus vagy placebo tablettát kapnak. A résztvevőket arra utasítják, hogy vegyenek be naponta két tablettát (egyet reggel és egyet este, a 0-7. napon), és arra kérik őket, hogy tartózkodjanak minden egyéb probiotikumot tartalmazó élelmiszertől vagy étrend-kiegészítőtől. A nyolcadik napon a résztvevő ellátogat a klinikákra, és ütési biopsziát végeznek. Az elosztási csoporttól függően probiotikus vagy placeboolajat szállítanak. A résztvevőt arra utasítják, hogy minden este 9 napon keresztül helyileg vigye fel az olajat a sebre műanyag mikrokefével, és erősen megerősítve folytassa a kijelölt tablettákkal naponta kétszer. A résztvevő a sebzés utáni második, ötödik és nyolcadik napon ellátogat a klinikákra, ahol utófényképeket készíthet a sebgyógyulásról. Az első beavatkozási periódus négyhetes kimosódási periódussal ér véget, majd ugyanezen eljárások után kezdődik a második bejáratás.

A probiotikus tabletták és a probiotikus olaj (az ajánlott adagban) 2x10^8 CFU Lactobacillus reuterit tartalmaznak. A placebo tabletták és az olaj is azonos méretben és összetételben, de a probiotikus törzsek hozzáadása nélkül. A tabletták és az olaj azonos edényekbe/palackokba vannak csomagolva színkóddal. A kódot az elemzés befejezéséig megőrzik a nyomozóktól. Mind a tablettákat, mind az olajat a BIOGAIA AB biztosítja.

Klinikai eljárások és mintavétel

Minden klinikai eljárást és mintavételt a Koppenhágai Egyetem Egészségügyi és Orvostudományi Karának Kariológiai, Endodontiai, Gyermekfogászati ​​és Klinikai Genetikai részlegének Fogászati ​​Intézetének szakképzett és engedéllyel rendelkező fogorvosa végez. Az összegyűjtött mintákat (nyál, sebváladék és bakteriális kenet) -80 °C-on fagyasztószekrényben kell tárolni, amíg az összes betegtől be nem veszik az összes mintát - legfeljebb hat hónapig. Az összes begyűjtött minta egyidejű futtatása lehetővé teszi a laboratóriumi elemzések hatékony elvégzését és a hibák elkerülését.

Lyukasztásos biopszia: a nyolcadik napon egy 3,5 mm átmérőjű és körülbelül 1,5 mm mély szabványos kör alakú sebet hozunk létre a kemény szájpad nyálkahártyájában biopsziás ütés segítségével. A biopsziát aszeptikus körülmények között és helyi érzéstelenítésben végezzük, 2%-os lidokaint és epinefrint kombinálva a helyi vérzéscsillapítás érdekében. Szike segítségével távolítják el a felszíni hámot és az alatta lévő felületes kötőszövetet, amelyet a Koppenhágai Egyetem Fogorvosi Intézetének biológiai biztonsági előírásai szerint selejteznek. A sebzést követően a seb helyét lefényképezzük (vakkódolva) intraorális kamerával, referenciaként szabványos méretű, 6 mm átmérőjű sablont helyezve a seb köré. A résztvevő a sebzés utáni második, ötödik és nyolcadik napon ellátogat a fogászati ​​klinikára, hogy Gina Castiblanco doktorandusz fényképet készítsen a sebről. A fényképeken látható sebméretet két értékelő méri, és a seb felületének aránya a szabványos címkemérethez viszonyítva szoftver segítségével (Canvas 7, ACD Systems of America). A végpont a kezdeti sebméret százalékos aránya, a sebzést követő második, ötödik és nyolcadik napon mérve.

Nyálmintavétel: hat mintát gyűjtenek a nem stimulált teljes nyálból (UWS) minden alanytól (egyet az alapvonalon, egyet közvetlenül a bejáratási időszak után és egyet a beavatkozási időszak végén). Az USW gyűjtéshez a résztvevő kényelmes testhelyzetben ül, enyhén hajlított fejjel. A résztvevőt arra kérik, hogy tartsa nyitva a szemét, és a lehető legkevesebb mozdulatot tegyen, beleértve a nyelést is. Ezután megkérik, hogy öblítse ki a száját vízzel, és köpje ki újra. Ezt követően azt az utasítást kapja, hogy tíz percig hagyja, hogy a nyál kifolyjon a szájából egy erre kijelölt műanyag pohárba. A nyál alikvot részeit (1,5 ml) azonnal jégre helyezzük, és a további elemzésig fagyasztóban tároljuk -80 °C-on.

Sebváladék gyűjtése: összesen nyolc sebváladékmintát gyűjtenek. A seb helyét pamutpellettel szárítjuk, és periopapír csíkokat (ProFlow, Amityville, NY, USA) finoman nyomunk a sebbe 20 másodpercig. Vérszennyeződés esetén a csíkot le kell üríteni, és a mintavételt öt perc múlva megismételni. A váladék térfogatát Peritron 8000 (Proflow) segítségével rögzítjük, és µl-ben fejezzük ki. Egy csík körülbelül 0,1-0,4-et tart µl váladék. A csíkokat ezután műanyag csövekbe helyezzük, és -80 °C-on tároljuk a további elemzésig.

Bakteriális kenet gyűjtése: négy bakteriális kenetből vesznek mintát. Steril pálcikát vezetnek át a seb helyén, műanyag csőbe helyezik, és -80 °C-on fagyasztva tárolják a további elemzésig. A keneteket hagyományos mikrobiális tenyésztésnek vetik alá, hogy kimutathassák a késleltetett sebgyógyulással gyakran összefüggő baktériumfajok (β-hemolitikus streptococcusok és S. aureus) jelenlétét/hiányát és számát.

Fájdalom- és diszkomfortérzékelés: minden bejáratási időszak elején egy oldalas naplót adnak át a résztvevőknek, hogy a VAS-skála szerint regisztrálhassák a tabletták bevételét és saját fájdalom- és diszkomfortérzetüket. A résztvevőt arra is ösztönzik, hogy regisztráljon olyan tényezőket, amelyek befolyásolhatják az eredményt (fizikai aktivitás és alkoholos italok száma). A résztvevőt felkérjük, hogy a beavatkozási időszak végén hozza magával a kitöltött naplót.

Érzékelt stressz és általános egészségi állapot: a beavatkozási időszak végén a résztvevőt felkérik, hogy töltse ki az érvényesített GHQ-12 általános egészségkérdőívet (10) és a validált észlelt stresszskálát (11). Ezek a tényezők (a stressz önérzékelése és az általános egészségi állapot) köztudottan hozzájárulhatnak a sebgyógyulási eredményekhez.

Megfelelés: minden beavatkozási időszak elején a résztvevők 16 napra elegendő tablettát és 9 napos helyi alkalmazásra elegendő olajat kapnak. A megfelelőséget egy napló kitöltésével ellenőrzik, amelybe bejegyzik a napi tabletták bevitelét és az olajozást. Az utolsó találkozóra megkérjük a résztvevőket, hogy hozzák magukkal a maradék tablettákat és olajat a számoláshoz/becsléshez.

Adatelemzés: minden adatot az „R” nyílt forráskódú statisztikai szoftverrel dolgozunk fel, és a normál eloszlást szabályozzuk. Többváltozós és egyváltozós varianciaanalízist (MANOVA-k és ANOVA-k) alkalmaznak az alanyon belüli időbeli változások értékelésére. A 0,05-nél kisebb p-érték statisztikailag szignifikánsnak minősül. A kapott eredményeket egy nemzetközileg elismert folyóiratban teszik közzé. Ha az eredményeket nem lehet folyóiratban publikálni, akkor a Fogászati ​​Intézet honlapján elérhetőek lesznek. Hangsúlyozzuk, hogy a pozitív, negatív és nem meggyőző eredményeket közzétesszük.

Adatkezelés: minden összegyűjtött adatot a személyes adatok kezeléséről szóló törvény és az „egészségügyi törvény” előírásai szerint kezelünk. A részvételkor a résztvevők egyedi számot és külön jegyzőkönyvet kapnak személyi azonosító szám nélkül. Ezt a tanulmányt nem jelentik be a "Datatilsynet"-nek, mivel ez egy magán tudományos egészségügyi projekt