Probioottien vaikutus suun haavan paranemiseen - Pilottitutkimus (PROWOUND)

Interventio: tietoisen suostumuksen ja kliinisten tietojen (ikä, sukupuoli) keräämisen jälkeen osallistujat jaetaan satunnaisesti johonkin hoitojen järjestyksestä. Aloitusjaksona heille annetaan probiootti- tai lumetabletteja, jotka riittävät seitsemäksi päiväksi. Osallistujia neuvotaan ottamaan kaksi tablettia päivässä (yksi aamulla ja yksi illalla päivinä 0-7) ja heitä pyydetään pidättäytymään muista probiootteja sisältävistä ruoista tai lisäravinteista. Kahdeksantena päivänä osallistuja käy klinikoilla ja hänelle suoritetaan biopsia. Jakoryhmästä riippuen toimitetaan probiootti- tai lumelääkeöljyä. Osallistujaa neuvotaan levittämään öljyä paikallisesti haavalle muovisella mikroharjalla 9 päivän ajan joka ilta ja vahvistetaan voimakkaasti jatkamaan määrätyillä tableteilla kahdesti päivässä. Osallistuja osallistuu klinikoilla haavan jälkeisenä päivänä toiseksi, viideksi ja kahdeksanneksi haavan paranemisen seurantavalokuviin. Ensimmäinen interventiojakso päättyy neljän viikon pesujaksoon, ja sitten toinen interventiojakso alkaa samoilla menettelyillä.

Probioottitabletit ja probioottiöljy (suositellulla annoksella) sisältävät 2x10^8 CFU Lactobacillus reuteria. Sekä lumetabletit että öljy ovat kooltaan ja koostumukseltaan samanlaisia, mutta niihin ei ole lisätty probioottikantoja. Tabletit ja öljy on pakattu samanlaisiin ruukkuihin/pulloihin, joissa on värikoodi. Koodi säilytetään tutkijoilta, kunnes analyysi on valmis. Sekä tabletit että öljyt toimittaa BIOGAIA AB.

Kliiniset toimenpiteet ja näytteenotto

Kaikki kliiniset toimenpiteet ja näytekeräykset suorittaa pätevä ja valtuutettu hammaslääkäri Kööpenhaminan yliopiston terveys- ja lääketieteellisen tiedekunnan kariologian, endodontian, lasten hammaslääketieteen ja kliinisen genetiikan osastosta. Kerätyt näytteet (sylki, haavaerite ja bakteerinäyte) säilytetään pakastimessa -80 °C:ssa, kunnes kaikki näytteet on kerätty kaikilta potilailta - enintään kuuden kuukauden ajan. Kaikkien kerättyjen näytteiden ajaminen samanaikaisesti mahdollistaa laboratorioanalyysien tehokkaan suorittamisen ja virheiden välttämisen.

Punch biopsia: päivänä kahdeksan standardisoitu pyöreä haava, jonka halkaisija on 3,5 mm ja syvä noin 1,5 mm, luodaan kovan kitalaen limakalvolle biopsian avulla. Biopsia suoritetaan aseptisissa olosuhteissa ja paikallispuudutuksessa käyttäen 2 % lidokaiinia yhdistettynä epinefriiniin paikalliseen hemostaasiin. Veitsellä poistetaan pintaepiteeli ja alla oleva pinnallinen sidekudos, joka hylätään Kööpenhaminan yliopiston hammaslääketieteen instituutin bioturvallisuusmääräysten mukaisesti. Haavan jälkeen haavakohta valokuvataan (sokkokoodataan) intraoraalisella kameralla ja asetetaan vakiokokoinen halkaisijaltaan 6 mm malli haavan ympärille referenssinä. Osallistuja käy hammasklinikoilla toisena, viidentenä ja kahdeksantena päivänä haavan jälkeen ottaakseen valokuvan haavasta, jonka tohtori Gina Castiblanco ottaa. Valokuvien haavan koon mitataan kahdella arvioijalla, ja se ilmaistaan ​​haavan pinta-alan suhteena standarditarrakokoon ohjelmiston avulla (Canvas 7, ACD Systems of America). Päätepiste on haavan alkuperäisen koon prosenttiosuus, mitattuna päivänä kaksi, viisi ja kahdeksan haavan jälkeen.

Sylkinäytteenotto: jokaiselta koehenkilöltä otetaan kuusi näytettä stimuloimatonta kokonaissylkeä (UWS) (yksi lähtötilanteessa, yksi heti sisäänajojakson jälkeen ja yksi interventiojakson lopussa). USW-kokoelmaa varten osallistuja istuu mukavassa asennossa pää hieman koukussa. Osallistujaa pyydetään pitämään silmät auki ja tekemään mahdollisimman vähän liikkeitä, mukaan lukien nieleminen. Sitten häntä pyydetään huuhtelemaan suu vedellä ja sylkemään se uudelleen ulos. Sen jälkeen häntä ohjeistetaan antamaan syljen virrata suusta alas sille tarkoitettuun muovimukiin kymmenen minuutin ajan. Syljen alikvootit (1,5 ml) asetetaan välittömästi jäille ja säilytetään pakastimessa -80 °C:ssa lisäanalyysiin asti.

Haavaeritteen kerääminen: haavaeritteen näytettä kerätään yhteensä kahdeksan. Haavakohta kuivataan puuvillapelleteillä ja periopaperiliuskoja (ProFlow, Amityville, NY, USA) painetaan varovasti haavaan 20 sekunnin ajan. Verikontaminaation sattuessa liuska poistetaan ja näytteenotto toistetaan viiden minuutin kuluttua. Eksudaatin tilavuus rekisteröidään käyttämällä Peritron 8000 (Proflow) -laitetta ja ilmaistaan ​​ui:na. Yksi liuska kestää noin 0,1-0,4 µl eksudaattia. Liuskat siirretään sitten muoviputkiin ja säilytetään -80 °C:ssa lisäanalyysiin asti.

Bakteerinäytteiden kerääminen: näyte otetaan neljästä bakteerinäytteestä. Steriili vanupuikko viedään haavakohdan läpi, asetetaan muoviputkeen ja säilytetään pakastettuna -80 °C:ssa jatkoanalyysiin asti. Näytteet altistetaan tavanomaiselle mikrobiviljelylle sellaisten bakteerilajien läsnäolon/puuttumisen ja lukumäärän havaitsemiseksi, jotka yleensä liittyvät haavan viivästymiseen (β-hemolyyttinen streptokokki ja S. aureus).

Kivun ja epämukavuuden havaitseminen: Osallistujille jaetaan jokaisen sisäänajojakson alussa yksisivuinen lokikirja, jotta he voivat rekisteröidä tablettien nauttimisen ja oman kivun ja epämukavuuden tuntemuksen VAS-asteikon mukaan. Osallistujaa kehotetaan myös rekisteröimään lopputulokseen mahdollisesti vaikuttavia tekijöitä (fyysinen aktiivisuus ja alkoholijuomien määrä). Osallistujaa pyydetään tuomaan täytetty lokikirja interventiojakson lopussa.

Koettu stressi ja yleinen terveys: interventiojakson lopussa osallistujaa pyydetään täyttämään validoitu General Heath Questionnaire GHQ-12 (10) ja validoitu koettu stressiasteikko (11). Näiden tekijöiden (stressin itsetunto ja yleinen terveys) tiedetään olevan mahdollisia haavan paranemistulosten perustajia.

Vaatimustenmukaisuus: Osallistujille annetaan jokaisen interventiojakson alussa tabletteja 16 päiväksi ja paikalliseen käyttöön tarkoitettua öljyä yhdeksän päivän annosteluksi. Vaatimustenmukaisuus tarkistetaan osallistujan täyttämällä päiväkirjaa, johon kirjataan päivittäinen tablettien saanti ja öljyn levitys. Viimeiselle tapaamiselle osallistujia pyydetään tuomaan jäljellä olevat tabletit ja öljy laskemista/arviointia varten.

Tietojen analysointi: kaikki tiedot käsitellään avoimen lähdekoodin tilastoohjelmistolla "R" ja niitä ohjataan normaalijakaumaa varten. Monimuuttuja- ja yksimuuttuja-varianssianalyysiä (MANOVA- ja ANOVA-analyysiä) käytetään arvioimaan subjektin sisäistä ajan kuluessa tapahtuvaa muutosta. P-arvoa alle 0,05 pidetään tilastollisesti merkitsevänä. Saadut tulokset julkaistaan ​​kansainvälisesti tunnustetussa lehdessä. Jos tuloksia ei voida julkaista lehdessä, ne ovat saatavilla Hammastautiinstituutin yliopiston verkkosivuilla. Korostamme, että positiiviset, negatiiviset ja epäselvät tulokset julkaistaan.

Tietojen käsittely: kaikkia kerättyjä tietoja käsitellään henkilötietojen käsittelystä annetun lain ja "terveyslain" mukaisesti. Osallistujille annetaan yksilöllinen numero ja erillinen protokolla ilman henkilötunnusta. Tätä tutkimusta ei raportoida "Datatilsynetille", koska se on yksityinen tieteellinen terveysprojekti