Effect van probiotica op orale wondgenezing - Pilotstudie (PROWOUND)

Interventie: na geïnformeerde toestemming en basisverzameling van klinische gegevens (leeftijd, geslacht), worden de deelnemers willekeurig toegewezen aan een van de volgorde van de behandelingen. Als aanloopperiode krijgen ze voor zeven dagen een voorraad probiotische of placebotabletten. De deelnemers krijgen de instructie om dagelijks twee tabletten in te nemen (één 's ochtends en één' s avonds, dag 0-7) en wordt gevraagd af te zien van andere voedingsmiddelen of supplementen die probiotica bevatten. Op dag acht gaat de deelnemer naar de klinieken en wordt er een ponsbiopsie uitgevoerd. Afhankelijk van de allocatiegroep wordt probiotische of placebo-olie geleverd. De deelnemer krijgt de instructie om de olie gedurende 9 dagen elke avond plaatselijk op de wond aan te brengen met een plastic microborstel, en sterk versterkt om door te gaan met de toegewezen tabletten tweemaal daags. De deelnemer zal de klinieken bijwonen op dag twee, vijf en acht na de verwonding voor vervolgfoto's van wondgenezing. De eerste interventieperiode eindigt met een wash-outperiode van vier weken, daarna start de tweede inloopperiode volgens dezelfde procedures.

De probiotische tabletten en de probiotische olie (in de aanbevolen dosering) bevatten 2x10^8 CFU van Lactobacillus reuteri. Zowel de placebo-tabletten als de olie zijn qua grootte en samenstelling identiek, maar zonder de toevoeging van de probiotische stammen. De tabletten en olie zijn verpakt in identieke potjes/flessen met kleurcodering. De code wordt bewaard voor de onderzoekers totdat de analyse is voltooid. Zowel de tabletten als de olie worden geleverd door BIOGAIA AB.

Klinische procedures en bemonstering

Alle klinische procedures en monsterverzamelingen worden uitgevoerd door een gekwalificeerde en bevoegde tandarts van het Instituut voor Tandheelkunde, Sectie voor Cariologie, Endodontie, Kindertandheelkunde en Klinische Genetica, Faculteit Gezondheid en Medische Wetenschappen, Universiteit van Kopenhagen. Verzamelde monsters (speeksel, wondexsudaat en bacterie-uitstrijkje) worden in een vriezer bij -80 °C bewaard totdat alle monsters van alle patiënten zijn verzameld - gedurende maximaal zes maanden. Door alle verzamelde monsters tegelijkertijd te laten lopen, kunnen laboratoriumanalyses efficiënt worden uitgevoerd en worden fouten voorkomen.

Ponsbiopsie: op dag acht wordt met behulp van een biopsiepons een gestandaardiseerde cirkelvormige wond van 3,5 mm diameter en ongeveer 1,5 mm diep in het slijmvlies van het harde gehemelte gemaakt. De biopsie wordt uitgevoerd onder aseptische omstandigheden en lokale anesthesie met behulp van lidocaïne 2% gecombineerd met epinefrine voor lokale hemostase. Een scalpel wordt gebruikt om het oppervlakte-epitheel en het onderliggende oppervlakkige bindweefsel te verwijderen, dat zal worden weggegooid volgens de bioveiligheidsvoorschriften van het Instituut voor Tandheelkunde, Universiteit van Kopenhagen. Na verwonding wordt de wondplaats gefotografeerd (blind gecodeerd) met een intraorale camera, waarbij een sjabloon van standaardformaat met een diameter van 6 mm rond de wond wordt geplaatst als referentie. De deelnemer zal op dag twee, vijf en acht na de verwonding naar de tandheelkundige kliniek gaan om een ​​foto van de wond te laten maken door promovenda Gina Castiblanco. De wondgrootte op foto's wordt gemeten door twee beoordelaars en wordt uitgedrukt als de verhouding van het wondoppervlak ten opzichte van de standaard labelgrootte met behulp van software (Canvas 7, ACD Systems of America). Het eindpunt is het percentage van de oorspronkelijke grootte van de wond, gemeten op dag twee, vijf en acht na de verwonding.

Speekselbemonstering: zes monsters van niet-gestimuleerd volledig speeksel (UWS) van elke proefpersoon worden verzameld (één bij baseline, één direct na de inloopperiode en één aan het einde van de interventieperiode). Voor USW-collectie zit de deelnemer in een comfortabele houding met het hoofd licht gebogen. De deelnemer wordt gevraagd de ogen open te houden en zo min mogelijk bewegingen te maken, inclusief slikken. Vervolgens wordt hem/zij gevraagd de mond met water te spoelen en het weer uit te spugen. Daarna krijgt hij/zij de instructie om gedurende tien minuten speeksel uit de mond te laten stromen in een daarvoor bestemde plastic beker. Monsters van speeksel (1,5 ml) worden onmiddellijk op ijs geplaatst en tot verdere analyse in een vriezer bij -80 °C bewaard.

Verzameling van wondexsudaat: in totaal worden acht monsters van wondexsudaat verzameld. De wondplaats wordt gedroogd met wattenbolletjes en periopaper-strips (ProFlow, Amityville, NY, VS) worden gedurende 20 seconden voorzichtig op de wond gedrukt. In geval van bloedbesmetting wordt de strip afgevoerd en wordt de bemonstering na vijf minuten herhaald. Het exsudaatvolume wordt geregistreerd met een Peritron 8000 (Proflow) en uitgedrukt in µL. Een strip bevat ongeveer 0,1-0,4 µL exsudaat. De strips worden vervolgens overgebracht naar plastic buizen en bewaard bij -80°C tot verdere analyse.

Bacteriële uitstrijkjes: er worden vier bacteriële uitstrijkjes genomen. Er wordt een steriel wattenstaafje door de wond gehaald, in een plastic buisje gedaan en tot verdere analyse ingevroren bewaard bij -80 °C. De uitstrijkjes zullen worden onderworpen aan conventionele microbiële kweek om de aanwezigheid/afwezigheid en tellingen te detecteren van bacteriesoorten die vaak worden geassocieerd met vertraagde wondgenezing (β-hemolytische streptokokken en S. aureus).

Beleving van pijn en ongemak: aan het begin van elke inloopperiode wordt aan de deelnemers een logboek van één pagina overhandigd, zodat ze de inname van tabletten en hun eigen perceptie van pijn en ongemak kunnen registreren volgens een VAS-schaal. De deelnemer wordt ook aangemoedigd om factoren te registreren die mogelijk van invloed kunnen zijn op de uitkomst (lichamelijke activiteit en aantal alcoholische dranken). De deelnemer wordt gevraagd het ingevulde logboek mee te nemen op het einde van de interventieperiode.

Ervaren stress en algemene gezondheid: aan het einde van de interventieperiode wordt de deelnemer gevraagd om de gevalideerde algemene gezondheidsvragenlijst GHQ-12 (10) en de gevalideerde ervaren stressschaal (11) in te vullen. Van deze factoren (zelfperceptie van stress en algemene gezondheid) is bekend dat ze mogelijke mede-oprichters zijn van de resultaten van wondgenezing.

Naleving: aan het begin van elke interventieperiode krijgen de deelnemers tabletten die voldoende zijn voor 16 dagen en olie voor uitwendig gebruik die voldoende is voor negen dagen gebruik. Naleving wordt gecontroleerd door het invullen van een logboek door de deelnemer waarin de dagelijkse inname van tabletten en olietoepassing wordt geregistreerd. Voor de laatste afspraak wordt de deelnemers gevraagd de resterende tabletten en olie mee te nemen om te tellen/schatten.

Gegevensanalyse: alle gegevens worden verwerkt met de open source statistieksoftware "R" en gecontroleerd voor normale distributie. Multivariate en univariate variantieanalyse (MANOVA's en ANOVA's) zullen worden gebruikt om verandering binnen de proefpersoon in de loop van de tijd te beoordelen. Een p-waarde van minder dan 0,05 wordt als statistisch significant beschouwd. De verkregen resultaten worden gepubliceerd in een internationaal erkend tijdschrift. Als de resultaten niet in een tijdschrift kunnen worden gepubliceerd, zijn ze beschikbaar op de website van de Universiteit van het Tandheelkundig Instituut. We leggen er de nadruk op dat positieve, negatieve en onduidelijke resultaten zullen worden gepubliceerd.

Gegevensbeheer: alle verzamelde gegevens worden behandeld in overeenstemming met de Wet Verwerking Persoonsgegevens en "De Gezondheidswet". Bij opname krijgen de deelnemers een uniek nummer en een apart protocol zonder persoonlijk identificatienummer. Deze studie zal niet worden gerapporteerd aan "Datatilsynet", aangezien het een particulier wetenschappelijk gezondheidsproject is