Effet des probiotiques sur la cicatrisation des plaies buccales - Étude pilote (PROWOUND)

Intervention : après consentement éclairé et collecte de données cliniques de base (âge, sexe), les participants seront assignés au hasard à l'un des ordres de traitements. En période de rodage, ils recevront une quantité suffisante de comprimés de probiotiques ou de placebo pour sept jours. Les participants sont invités à prendre deux comprimés par jour (un le matin et un le soir, jours 0 à 7) et sont priés de s'abstenir de tout autre aliment ou supplément contenant des probiotiques. Le huitième jour, le participant assistera aux cliniques et une biopsie à l'emporte-pièce sera effectuée. Selon le groupe d'attribution, une huile probiotique ou placebo sera fournie. Le participant sera chargé d'appliquer l'huile localement sur la plaie avec une microbrosse en plastique pendant 9 jours tous les soirs, et fortement renforcé pour continuer avec les comprimés attribués deux fois par jour. Le participant assistera aux cliniques les jours deux, cinq et huit après la blessure pour des photographies de suivi de la cicatrisation. La première période d'intervention se termine par une période de sevrage de quatre semaines, puis la deuxième période de rodage commence par une période d'intervention suivant les mêmes procédures.

Les comprimés probiotiques et l'huile probiotique (à la dose recommandée) contiennent 2x10^8 UFC de Lactobacillus reuteri. Les comprimés placebo et l'huile sont identiques en taille et en composition, mais sans l'ajout de souches probiotiques. Les comprimés et l'huile sont conditionnés dans des pots/bouteilles identiques avec un code couleur. Le code sera gardé des enquêteurs jusqu'à ce que l'analyse soit terminée. Les comprimés et l'huile sont fournis par BIOGAIA AB.

Procédures cliniques et échantillonnage

Toutes les procédures cliniques et les prélèvements d'échantillons seront effectués par un dentiste qualifié et autorisé de l'Institut d'odontologie, Section de cariologie, d'endodontie, de dentisterie pédiatrique et de génétique clinique, Faculté des sciences de la santé et médicales, Université de Copenhague. Les échantillons collectés (salive, exsudat de plaie et frottis bactérien) seront conservés dans un congélateur à -80 °C jusqu'à ce que tous les échantillons de tous les patients soient collectés - pendant un maximum de six mois. L'exécution de tous les échantillons collectés en même temps permet d'effectuer efficacement les analyses de laboratoire et d'éviter les erreurs.

Biopsie à l'emporte-pièce : le huitième jour, une plaie circulaire standardisée de 3,5 mm de diamètre et d'environ 1,5 mm de profondeur sera créée dans la muqueuse du palais dur à l'aide d'un emporte-pièce à biopsie. La biopsie est réalisée dans des conditions aseptiques et sous anesthésie locale à l'aide de lidocaïne 2 % associée à de l'épinéphrine pour l'hémostase locale. Un scalpel est utilisé pour retirer l'épithélium de surface et le tissu conjonctif superficiel sous-jacent, qui seront jetés conformément aux réglementations de biosécurité de l'Institut de médecine dentaire de l'Université de Copenhague. Après la blessure, le site de la plaie sera photographié (codé en aveugle) avec une caméra intra-orale, en plaçant un gabarit de taille standard de 6 mm de diamètre autour de la plaie comme référence. Le participant se rendra aux cliniques dentaires les jours deux, cinq et huit après la blessure pour faire photographier la blessure par l'étudiante au doctorat Gina Castiblanco. La taille de la plaie sur les photographies sera mesurée par deux évaluateurs et sera exprimée comme le rapport de la surface de la plaie par rapport à la taille de l'étiquette standard à l'aide d'un logiciel (Canvas 7, ACD Systems of America). Le point final sera le pourcentage de la taille initiale de la plaie, mesuré aux jours deux, cinq et huit après la blessure.

Prélèvement de salive : six échantillons de salive entière non stimulée (UWS) de chaque sujet seront prélevés (un au départ, un juste après la période de rodage et un à la fin de la période d'intervention). Pour la collecte de l'USW, le participant sera assis dans une position confortable avec la tête légèrement penchée. Le participant est invité à garder les yeux ouverts et à faire le moins de mouvements possible, y compris la déglutition. Ensuite, on lui demande de se rincer la bouche avec de l'eau et de la recracher. Ensuite, on lui demande de laisser la salive s'écouler de la bouche dans un gobelet en plastique désigné pendant dix minutes. Des aliquotes de salive (1,5 ml) seront immédiatement placées sur de la glace et conservées au congélateur à -80 °C jusqu'à une analyse plus approfondie.

Collecte d'exsudat de plaie : huit échantillons d'exsudat de plaie seront prélevés au total. Le site de la plaie sera séché avec des boulettes de coton et des bandes de papier pério (ProFlow, Amityville, NY, USA) seront doucement pressées sur la plaie pendant 20 s. En cas de contamination sanguine, la bandelette est déchargée et le prélèvement est répété au bout de cinq min. Le volume d'exsudat est enregistré à l'aide d'un Peritron 8000 (Proflow) et exprimé en µL. Une bande contient environ 0,1-0,4 µL d'exsudat. Les bandes sont ensuite transférées dans des tubes en plastique et stockées à -80°C jusqu'à une analyse plus approfondie.

Collecte de frottis bactériens : quatre frottis bactériens seront prélevés. Un écouvillon stérile sera passé à travers le site de la plaie, placé dans un tube en plastique et stocké congelé à -80 ° C jusqu'à une analyse plus approfondie. Les frottis seront soumis à une culture microbienne conventionnelle pour détecter la présence/l'absence et le nombre d'espèces bactériennes couramment associées à un retard de cicatrisation (streptocoques β-hémolytiques et S. aureus).

Perception de la douleur et de l'inconfort : un journal de bord d'une page sera remis aux participants au début de chaque période de rodage afin qu'ils puissent enregistrer la prise de comprimés et leur propre perception de la douleur et de l'inconfort selon une échelle EVA. Le participant est également encouragé à enregistrer les facteurs susceptibles d'influencer le résultat (activité physique et nombre de boissons alcoolisées). Il sera demandé au participant de rapporter le journal de bord rempli à la fin de la période d'intervention.

Stress perçu et état de santé général : à la fin de la période d'intervention, le participant sera invité à remplir le questionnaire de santé générale validé GHQ-12 (10) et l'échelle de stress perçu validée (11). Ces facteurs (auto-perception du stress et état de santé général) sont connus pour être des cofondateurs possibles des résultats de cicatrisation des plaies.

Conformité : au début de chaque période d'intervention, les participants recevront suffisamment de comprimés pour 16 jours et d'huile à usage topique pour une application de neuf jours. La conformité sera vérifiée par l'achèvement par le participant d'un journal de bord dans lequel la prise quotidienne de comprimés et l'application d'huile sont enregistrées. Pour le dernier rendez-vous, il sera demandé aux participants d'apporter les comprimés et l'huile restants pour le comptage/estimation.

Analyse des données : toutes les données seront traitées avec le logiciel de statistiques open source "R" et contrôlées pour une distribution normale. Des analyses de variance multivariées et univariées (MANOVA et ANOVA) seront utilisées pour évaluer les changements intra-sujets au fil du temps. Une valeur de p inférieure à 0,05 sera considérée comme statistiquement significative. Les résultats obtenus seront publiés dans une revue internationalement reconnue. Si les résultats ne peuvent pas être publiés dans une revue, ils seront disponibles sur le site Web de l'Institut universitaire d'odontologie. Nous mettons l'accent sur le fait que les résultats positifs, négatifs et non concluants seront publiés.

Gestion des données : toutes les données collectées seront traitées conformément à la loi sur le traitement des données personnelles et à la "loi sur la santé". Lors de l'inclusion, les participants se verront attribuer un numéro unique et un protocole séparé sans numéro d'identification personnel. Cette étude ne sera pas rapportée à "Datatilsynet" car il s'agit d'un projet scientifique privé en santé