구강 상처 치유에 대한 프로바이오틱스의 효과 - 파일럿 연구 (PROWOUND)

개입: 정보에 입각한 동의 및 임상 데이터(연령, 성별)의 기본 수집 후 참가자는 치료 순서 중 하나에 무작위로 배정됩니다. 준비 기간으로 7일 동안 충분한 양의 프로바이오틱스 또는 플라시보 정제가 제공됩니다. 참가자는 매일 2정(아침과 저녁, 0-7일)을 복용하도록 지시받고 프로바이오틱스를 함유한 다른 음식이나 보충제를 삼가도록 요청받습니다. 8일째에 참가자는 클리닉에 참석하고 펀치 생검을 수행합니다. 할당 그룹에 따라 프로바이오틱 또는 위약 오일이 공급됩니다. 참가자는 매일 저녁 9일 동안 플라스틱 마이크로브러시를 사용하여 상처 부위에 오일을 국소적으로 바르도록 지시받게 되며, 할당된 정제를 하루에 두 번 계속 사용하도록 강력하게 강화됩니다. 참가자는 상처 치유의 후속 사진 촬영을 위해 상처 후 2일, 5일 및 8일에 클리닉에 참석합니다. 첫 번째 개입 기간은 4주의 휴약 기간으로 종료되고 두 번째 개입 기간은 동일한 절차에 따라 시작됩니다.

프로바이오틱 정제와 프로바이오틱 오일(권장 용량)에는 2x10^8 CFU의 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri)가 들어 있습니다. 위약 정제와 오일은 모두 크기와 구성이 동일하지만 프로바이오틱 균주가 추가되지 않았습니다. 정제와 오일은 색상 코딩이 있는 동일한 냄비/병에 포장됩니다. 코드는 분석이 완료될 때까지 조사자가 보관하지 않습니다. 정제와 오일 모두 BIOGAIA AB에서 제공합니다.

임상 절차 및 샘플링

모든 임상 절차 및 샘플 수집은 코펜하겐 대학교 보건의학부 치아학 연구소, 우식학, 근관치료, 소아 치과 및 임상 유전학 섹션의 자격을 갖춘 공인 치과의사가 수행합니다. 수집된 샘플(타액, 상처 삼출물 및 박테리아 스미어)은 모든 환자의 모든 샘플이 수집될 때까지 최대 6개월 동안 -80°C의 냉동고에 보관됩니다. 수집된 모든 샘플을 동시에 실행하면 실험실 분석을 효율적으로 수행하고 오류를 방지할 수 있습니다.

펀치 생검: 8일째에 직경 3.5mm, 깊이 약 1.5mm의 표준화된 원형 상처가 생검 펀치의 도움으로 경구개의 점막에 생성됩니다. 생검은 국소 지혈을 위해 에피네프린과 결합된 리도카인 2%를 사용하여 무균 상태 및 국소 마취하에 수행됩니다. 메스를 사용하여 표면 상피와 밑에 있는 표면 결합 조직을 제거하고 코펜하겐 대학교 치과 연구소의 생물안전 규정에 따라 폐기합니다. 상처 후 상처 부위는 구강 내 카메라로 사진을 찍고(블라인드 코딩) 상처 주위에 표준 크기의 6mm 직경 템플릿을 기준으로 배치합니다. 참가자는 부상 후 2일, 5일 및 8일에 치과 진료소에 참석하여 박사 과정 학생인 Gina Castiblanco가 촬영한 상처 사진을 받습니다. 사진의 상처 크기는 2명의 평가자가 측정하고 소프트웨어(Canvas 7, ACD Systems of America)를 사용하여 표준 라벨 크기에 대한 상처 표면적의 비율로 표시됩니다. 끝점은 상처 후 2일, 5일 및 8일에 측정된 초기 상처 크기의 백분율입니다.

타액 샘플링: 각 피험자로부터 자극되지 않은 전체 타액(UWS) 샘플 6개를 수집합니다(기준선에서 하나, 도입 기간 직후에 하나, 개입 기간이 끝날 때 하나). USW 컬렉션의 경우 참가자는 머리를 약간 구부린 채 편안한 자세로 앉게 됩니다. 참가자는 눈을 뜨고 삼키는 것을 포함하여 가능한 한 적게 움직이도록 요청받습니다. 그런 다음 물로 입을 헹구고 다시 뱉으라고 합니다. 그런 다음 대상자는 10분 동안 지정된 플라스틱 컵 아래로 타액이 입에서 흘러나오도록 지시합니다. 타액 분취량(1.5ml)은 즉시 얼음 위에 놓고 추가 분석이 있을 때까지 -80°C의 냉동고에 보관합니다.

상처 삼출물 수집: 총 8개의 상처 삼출물 샘플을 수집합니다. 상처 부위는 면 펠릿으로 건조되고 periopaper 스트립(ProFlow, Amityville, NY, USA)은 20초 동안 상처에 부드럽게 압착됩니다. 혈액 오염의 경우 스트립을 배출하고 5분 후에 샘플링을 반복합니다. 삼출물의 양은 Peritron 8000(Proflow)을 사용하여 기록하고 µL로 표시합니다. 하나의 스트립은 약 0.1-0.4를 보유합니다. 삼출물의 μL. 그런 다음 스트립을 플라스틱 튜브로 옮기고 추가 분석까지 -80에 보관합니다.

세균 도말 수집: 4개의 세균 도말 표본을 채취합니다. 멸균 면봉을 상처 부위에 통과시키고 플라스틱 튜브에 넣고 추가 분석이 있을 때까지 -80°C에서 냉동 보관합니다. 스미어는 일반적으로 상처 치유 지연과 관련된 박테리아 종(β-용혈성 연쇄상구균 및 S. 아우레우스)의 존재/부재 및 수를 감지하기 위해 기존의 미생물 배양을 받게 됩니다.

고통과 불편감에 대한 인식: 참가자들이 VAS 척도에 따라 태블릿 섭취와 고통과 불편감에 대한 자신의 인식을 등록할 수 있도록 각 런인 기간이 시작될 때 참가자에게 한 페이지 분량의 일지가 전달됩니다. 참가자는 또한 결과에 영향을 미칠 수 있는 요인(신체 활동 및 알코올 음료 수)을 등록하도록 권장됩니다. 참가자는 개입 기간이 끝날 때 채워진 일지를 가져와야 합니다.

인지된 스트레스 및 일반 건강: 개입 기간이 끝나면 참가자는 검증된 일반 건강 설문지 GHQ-12(10) 및 검증된 스트레스 인지 척도(11)를 작성해야 합니다. 이러한 요인(스트레스 및 일반 건강에 대한 자기 인식)은 상처 치유 결과의 가능한 공동 설립자로 알려져 있습니다.

준수: 각 개입 기간이 시작될 때 참가자에게는 16일 동안 사용할 수 있는 정제와 9일 동안 사용할 수 있는 국소용 오일이 제공됩니다. 규정 준수 여부는 일일 알약 섭취량과 오일 적용이 기록된 참가자의 일지 작성을 통해 확인됩니다. 마지막 약속을 위해 참가자들은 계산/추산을 위해 남은 정제와 기름을 가져오도록 요청받을 것입니다.

데이터 분석: 모든 데이터는 오픈 소스 통계 소프트웨어 "R"로 처리되고 정규 분포를 위해 제어됩니다. 다변량 및 일변량 분산 분석(MANOVA 및 ANOVA)을 사용하여 시간 경과에 따른 개체 내 변화를 평가합니다. 0.05 미만의 p-값은 통계적으로 유의한 것으로 간주됩니다. 획득한 결과는 국제적으로 인정받는 저널에 게재될 예정입니다. 결과를 저널에 게재할 수 없는 경우 University of the Odontology Institute 웹사이트에서 확인할 수 있습니다. 우리는 긍정적, 부정적, 결정적이지 않은 결과가 발표될 것임을 강조합니다.

데이터 관리: 수집된 모든 데이터는 개인 데이터 처리에 관한 법률 및 "보건법"에 따라 처리됩니다. 포함 시 참가자에게는 개인 식별 번호가 없는 고유 번호와 별도의 프로토콜이 할당됩니다. 이 연구는 민간 과학 건강 프로젝트이므로 "Datatilsynet"에 보고되지 않습니다.