Effekt af probiotika på oral sårheling - Pilotundersøgelse (PROWOUND)

Intervention: efter informeret samtykke og baseline-indsamling af kliniske data (alder, køn), vil deltagerne blive tilfældigt tildelt en af ​​behandlingsrækkefølgen. Som en indkøringsperiode vil de få en forsyning af probiotiske eller placebotabletter nok til syv dage. Deltagerne instrueres i at tage to tabletter dagligt (en om morgenen og en om aftenen, dag 0-7) og bliver bedt om at afstå fra andre fødevarer eller kosttilskud, der indeholder probiotika. På dag otte kommer deltageren til klinikkerne, og der vil blive udført en punchbiopsi. Afhængigt af tildelingsgruppen vil der blive leveret probiotisk eller placeboolie. Deltageren vil blive instrueret i at påføre olien lokalt på såret med en plastikmikrobørste i 9 dage hver aften, og kraftigt forstærket til at fortsætte med de tildelte tabletter to gange dagligt. Deltageren vil deltage i klinikkerne på dag to, fem og otte efter sår til opfølgende fotografier af sårheling. Den første interventionsperiode afsluttes med en udvaskningsperiode på fire uger, og derefter starter den anden indkøringsperiode efter samme procedure.

De probiotiske tabletter og den probiotiske olie (ved den anbefalede dosis) indeholder 2x10^8 CFU af Lactobacillus reuteri. Både placebotabletterne og olien er identiske i størrelse og sammensætning, men uden tilsætning af de probiotiske stammer. Tabletterne og olien er pakket i identiske gryder/flasker med farvekode. Koden vil blive opbevaret fra efterforskerne, indtil analysen er færdig. Både tabletterne og olien er leveret af BIOGAIA AB.

Kliniske procedurer og prøveudtagning

Alle kliniske procedurer og prøveindsamlinger vil blive udført af en kvalificeret og autoriseret tandlæge fra Institut for Odontologi, Sektion for Kariologi, Endodonti, Pædiatrisk Tandpleje og Klinisk Genetik, Det Sundhedsvidenskabelige Fakultet, Københavns Universitet. Opsamlede prøver (spyt, sårekssudat og bakterieudstrygning) vil blive opbevaret i en fryser ved -80 °C, indtil alle prøver fra alle patienter er samlet -i maksimalt seks måneder. Kørsel af alle indsamlede prøver på samme tid gør det muligt at udføre laboratorieanalyser effektivt og undgår fejl.

Stempelbiopsi: På dag otte skabes et standardiseret cirkulært sår på 3,5 mm i diameter og ca. 1,5 mm dybt i slimhinden i den hårde gane ved hjælp af en biopsistans. Biopsien udføres under aseptiske forhold og lokalbedøvelse med lidocain 2% kombineret med adrenalin til lokal hæmostase. En skalpel bruges til at fjerne overfladeepitel og underliggende overfladisk bindevæv, som vil blive kasseret i henhold til biosikkerhedsforskrifter fra Tandlægeinstituttet, Københavns Universitet. Efter sårdannelse vil sårstedet blive fotograferet (blindkodet) med et intraoralt kamera, idet der placeres en skabelon i standardstørrelse 6 mm i diameter rundt om såret som reference. Deltageren vil besøge tandlægeklinikkerne på dag to, fem og otte efter såret for at få taget et fotografi af såret af ph.d.-studerende Gina Castiblanco. Sårstørrelsen på fotografier vil blive målt af to bedømmere og vil blive udtrykt som forholdet mellem såroverfladearealet i forhold til standardetikettens størrelse ved hjælp af software (Canvas 7, ACD Systems of America). Endepunktet vil være procentdelen af ​​den oprindelige sårstørrelse, målt på dag to, fem og otte efter såret.

Spytprøvetagning: Seks prøver af ustimuleret hel spyt (UWS) fra hvert forsøgsperson vil blive indsamlet (én ved baseline, én lige efter indkøringsperioden og én ved slutningen af ​​interventionsperioden). Ved USW-opsamling vil deltageren sidde i en behagelig stilling med hovedet let bøjet. Deltageren bliver bedt om at holde øjnene åbne og lave så få bevægelser som muligt, herunder synke. Derefter bliver han/hun bedt om at skylle munden i vand og spytte den ud igen. Derefter bliver han/hun instrueret i at lade spyt strømme ud af munden ned i en dertil udpeget plastikkop i ti minutter. Alikvoter af spyt (1,5 ml) vil straks blive placeret på is og opbevaret i en fryser ved -80 °C indtil videre analyse.

Opsamling af såreksudat: I alt vil der blive indsamlet otte prøver af såreksudat. Sårstedet vil blive tørret med bomuldspellets og periopaper-strimler (ProFlow, Amityville, NY, USA) vil blive presset forsigtigt på såret i 20 s. Ved blodkontaminering udtømmes strimlen og prøvetagningen gentages efter fem min. Volumenet af ekssudat registreres ved hjælp af en Peritron 8000 (Proflow) og udtrykt i µL. En strimmel rummer ca. 0,1-0,4 µL ekssudat. Strimlerne overføres derefter til plastrør og opbevares ved -80°C indtil videre analyse.

Bakterieudstrygning: Der vil blive udtaget fire bakterieudstrygninger. En steril podepind vil blive ført gennem sårstedet, anbragt i et plastikrør og opbevaret nedfryst ved -80 °C indtil videre analyse. Udstrygningerne vil blive udsat for konventionel mikrobiel dyrkning for at detektere tilstedeværelsen/fraværet og antallet af bakteriearter, der almindeligvis er forbundet med forsinket sårheling (β-hæmolytiske streptokokker og S. aureus).

Opfattelse af smerte og ubehag: Deltagerne får ved begyndelsen af ​​hver indkøringsperiode udleveret en logbog på én side, så de kan registrere indtagelse af tabletter og deres egen opfattelse af smerte og ubehag efter en VAS-skala. Deltageren opfordres også til at registrere faktorer, der muligvis kan påvirke resultatet (fysisk aktivitet og antal alkoholholdige drikkevarer). Deltageren vil blive bedt om at medbringe den udfyldte logbog i slutningen af ​​interventionsperioden.

Opfattet stress og generel sundhed: i slutningen af ​​interventionsperioden vil deltageren blive bedt om at udfylde det validerede General Heath Questionnaire GHQ-12 (10) og den validerede Perceived Stress Scale (11). Disse faktorer (selvopfattelse af stress og generel sundhed) er kendt for at være mulige medstiftere af sårhelingsresultater.

Overholdelse: I begyndelsen af ​​hver interventionsperiode vil deltagerne blive forsynet med tabletter nok til 16 dage og olie til topisk brug nok til ni dages påføring. Overholdelse vil blive kontrolleret gennem deltagerens udfyldelse af en logbog, hvori det daglige indtag af tabletter og oliepåføring er registreret. Til sidste aftale vil deltagerne blive bedt om at medbringe de resterende tabletter og olie til optælling/vurdering.

Dataanalyse: alle data vil blive behandlet med open source-statistiksoftwaren "R" og kontrolleret til normal distribution. Multivariat og univariat variansanalyse (MANOVA'er og ANOVA'er) vil blive brugt til at vurdere ændring inden for emnet over tid. En p-værdi mindre end 0,05 vil blive betragtet som statistisk signifikant. De opnåede resultater vil blive publiceret i et internationalt anerkendt tidsskrift. Hvis resultaterne ikke kan publiceres i et tidsskrift, vil de være tilgængelige på hjemmesiden for University of the Odontology Institute. Vi lægger vægt på, at positive, negative og inkonklusive resultater vil blive offentliggjort.

Datahåndtering: alle indsamlede data vil blive behandlet i overensstemmelse med lov om behandling af personoplysninger og "Sundhedsloven". Ved optagelse vil deltagerne få tildelt et unikt nummer og en separat protokol uden personnummer. Denne undersøgelse vil ikke blive indberettet til "Datatilsynet", da det er et privat videnskabeligt sundhedsprojekt