Vaccinazione di pazienti affetti da melanoma con cellule dendritiche caricate con cellule di melanoma allogenico apoptotico-necrotico

Sfondo: Sedici pazienti con melanoma (1 stadio IIC, 8 stadio III e 7 stadio IV) sono stati trattati in uno studio di fase I per valutare la sicurezza e le risposte immunitarie, con un vaccino (DC/Apo-Nec) composto da cellule dendritiche autologhe (DC ) caricato con una miscela di linee cellulari di melanoma apoptotico/necrotico (Apo-Nec).

Metodi: le PBMC sono state ottenute dalla leucaferesi e le DC sono state generate da monociti coltivati ​​in presenza di GM-CSF e IL-4 in terreno privo di siero. Le DC immature (iDC) sono state caricate con cellule Apo-Nec irradiate gamma e id iniettate senza adiuvante. A coorti di quattro pazienti sono stati somministrati quattro vaccini con 5, 10, 15 o 20 x106 DC/Apo-Nec per vaccino, a distanza di due settimane.

Risultati: Il vaccino è stato ben tollerato in tutti i pazienti. La tossicità per il vaccino è stata lieve e la dose limite di tossicità non è stata raggiunta. Abbiamo scoperto che il 42,3 ± 13,7% di iDC dei pazienti con melanoma era in grado di fagocitare le cellule Apo-Nec che inducevano la maturazione delle DC, come evidenziato dall'aumentata espressione di CD83, CD80, CD86, HLA di classe I e II rispetto agli iDC. Inoltre, dopo la fagocitosi, è stata osservata una riduzione del 75,2 ± 16% nell'endocitosi Dextran-FITC rispetto agli iDC. CCR7 è stato sovraregolato sulla fagocitosi di Apo-Nec nelle DC di tutti i pazienti e di conseguenza le cellule DC / Apo-Nec in vitro sono state in grado di migrare verso MIP-3 beta. Il punteggio DTH è aumentato significativamente nei pazienti dopo la prima vaccinazione e leggermente diminuito dal quarto vaccino (Mann-Whitney Test, p<0.05). Per la paziente n. 1 è stata rilevata una reazione DTH positiva alle proprie cellule tumorali irradiate. La presenza di linfociti T CD8+ specifici per gp100 e Melan A/MART-1 Ags è stata studiata mediante il legame dei tetrameri in pazienti HLA-A*0201 (7/15 pazienti) prima e dopo la vaccinazione. Due pazienti che rimangono NED hanno aumentato i loro linfociti T specifici Ags dopo la vaccinazione. Non sono state rilevate risposte umorali alle cellule Apo-Nec. Con un follow-up medio di 44,5 mesi dopo l'intervento, il paziente in stadio IIC è NED, 7/8 pazienti in stadio III sono NED e 7/7 pazienti in stadio IV sono progrediti.

Conclusioni: concludiamo che il vaccino DC/Apo-Nec è ben tollerato, induce un'immunità specifica contro il melanoma Ags e nei pazienti in stadio III può prolungare la sopravvivenza libera da malattia, offrendo protezione dalle ricadute in un contesto adiuvante.