Livelli di Endocan nelle donne con insufficienza ovarica prematura (Endocan&POI)

Disegno dello studio Si trattava di uno studio osservazionale prospettico di coorte condotto presso il Dipartimento di ostetricia e ginecologia dell'ospedale pediatrico e di ostetricia Cengiz Gokcek tra luglio e dicembre 2018. Settantasette donne sono state arruolate nello studio in due gruppi. Tutti i pazienti hanno dato il loro consenso informato orale e scritto prima della loro inclusione nello studio. Il protocollo è stato approvato dal comitato etico per la ricerca clinica dell'Università di Gaziantep (numero di riferimento: 2018/64). Lo studio ha aderito rigorosamente ai principi della Dichiarazione di Helsinki.

Raccolta dati e intervento dello studio:

Al momento dell'arruolamento, per entrambi i gruppi, abbiamo raccolto dati su età, altezza, peso, BMI, età del menarca, storia ostetrica, storia del fumo, esercizio fisico regolare e storia familiare di POI. Gli investigatori hanno definito che il periodo POI è un tempo dalla diagnosi al ricovero. All'arruolamento, tutte le pazienti sono state sottoposte a ecografia vaginale per la valutazione della conta dei follicoli antrali (AFC) e prelievo di sangue venoso dalle vene antecubitali per la misurazione della concentrazione sierica di Endocan, ormone follicolo-stimolante (FSH), E2, ormone antimulleriano (AMH) e emocromo completo (CBC). Nei soggetti di controllo sono stati raccolti campioni di sangue venoso e AFC durante la prima fase follicolare del ciclo mestruale (dal 2° al 5° giorno) al mattino (tra le 08:00 e le 09:00). Nel gruppo POI, le misurazioni sono state ripetute con intervalli di 4 settimane. L'AMH non è stato misurato nel gruppo di controllo. L'AFC è stata valutata mediante ecografia vaginale dallo stesso autore (macchina ad ultrasuoni Mindray DC-7T, Shenzen-Mindray Bio-Medical Electronics Co. Ltd., Cina). I campioni di sangue sono stati separati mediante centrifugazione per 10 minuti a 1500 g dopo la coagulazione per 30 minuti a temperatura ambiente. I campioni di siero sono stati successivamente conservati in aliquote a -80°C prima dell'analisi di endocan. Il livello sierico di endocan è stato misurato utilizzando un kit ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) disponibile in commercio, prodotto per rilevare i livelli di endocan umano con elevata sensibilità e specificità (Elabscience Biotechnology Inc., Houston, TX, USA). Le misurazioni endocan sono state eseguite in conformità con il protocollo dell'azienda. Il kit utilizza il principio del sandwich ELISA. Nella misurazione sono stati utilizzati un anticorpo di rilevamento biotinilato specifico per l'ESM1 umano (endocan) e il coniugato avidina-perossidasi di rafano. La spettrofotometria a una lunghezza d'onda di 450 ± 2 nm è stata utilizzata per rilevare la densità ottica, che è proporzionale alla concentrazione del livello di endocan umano. I coefficienti di variazione intra- e inter-dosaggio erano rispettivamente del 6,36% e del 6,09%.

Endpoint dello studio:

L'endpoint primario in questa analisi era confrontare i livelli di endocan nel gruppo POI e nel gruppo di controllo. L'endpoint secondario era confrontare i livelli di endocan nel gruppo POI per il periodo POI. L'endpoint terziario consisteva nel confrontare i livelli di endocan in entrambi i gruppi in base alle nascite.

La normalità della distribuzione delle variabili continue è stata testata utilizzando il test di Shapiro-Wilk. Per confrontare le variabili numeriche tra 2 gruppi, è stato eseguito il test t di Student (per dati normali) o il test U di Mann-Whitney (per dati non normali). Il test Chi-quadrato è stato utilizzato per valutare la relazione tra variabili categoriche e i coefficienti di correlazione di rango di Spearman sono stati utilizzati per valutare la relazione tra dati numerici non normali. Frequenza, percentuale (%) e media ± deviazioni standard (media ± SD) sono fornite come statistiche descrittive. L'analisi statistica è stata eseguita utilizzando il pacchetto software SPSS per Windows versione 24.0 e valori p <0,05 sono stati accettati come statisticamente significativi.