L'effetto del CLA su obesità, funzioni polmonari, profilo lipidico e infiammazione nelle donne con BMI≥25

Si tratta di uno studio di controllo randomizzato in doppio cieco con disegno parallelo, in cui le donne sovrappeso e obese consenzienti della città di Chester nel Regno Unito saranno assegnate in modo casuale a due gruppi: un gruppo CLA riceverà 4,5 g/giorno di capsule di miscela CLA mentre l'altro gruppo riceverà un placebo.

I partecipanti frequenteranno tre cliniche ed entro la fine di ogni clinica, ai partecipanti verrà chiesto di fornire campioni di sangue venoso da 20 ml per l'analisi del marcatore biologico. Antropometrici, composizione corporea, funzioni polmonari, leptina adiponectina, profilo lipidico, molecole di adesione CD14, CD16, CD11b e CD62L, HSPA1A e HSPB1 dei partecipanti saranno valutati in tre punti temporali, al basale dopo 6 e 12 settimane. Il livello di CLA nel plasma, così come il profilo lipidico (HDL, LDL, TC, TG), saranno misurati in ogni momento

Ai partecipanti verrà chiesto di compilare tre diari alimentari prima di frequentare ciascuna clinica. La composizione corporea sarà misurata utilizzando l'impedenza bioelettrica, le funzioni polmonari saranno valutate utilizzando spirometri, l'adiponectina e la leptina saranno valutate utilizzando ELISA e, infine, CD11b, CD62L, HSPA1A e HSPB1 saranno analizzati utilizzando il citometro a flusso. Il livello plasmatico di c9, t11-CLA e t10, c12-CLA sarà misurato mediante gascromatografia a ionizzazione di fiamma e il profilo lipidico sarà valutato utilizzando ALERE AFINION™ AS100 ANALYZER.

Calcolo della potenza per l'RCT Il calcolo della dimensione del campione viene eseguito utilizzando il software G*Power, è richiesto un totale di 20 partecipanti, 10 partecipanti in ciascun gruppo, per ottenere una dimensione dell'effetto di 1,3 kg/m2 di variazione del BMI rispetto al basale e SD di 0,45, Margine di errore 0,05, potenza 95% e intervallo di confidenza 95%. Considerando un abbandono del 150%, il numero totale sarà di 50, 25 per ogni gruppo.

La randomizzazione dei partecipanti sarà eseguita da una terza parte indipendente che non è coinvolta nello studio in corso. I partecipanti verranno randomizzati in blocchi utilizzando (www.randomization.com) che generano il piano di randomizzazione. Tutte le capsule saranno confezionate in un contenitore a prova di manomissione marrone scuro protettivo chiaro. I partecipanti randomizzati saranno assegnati al gruppo CLA o al gruppo placebo. Le capsule CLA e placebo avranno la stessa forma e colore e sia i partecipanti che il ricercatore saranno ciechi ai trattamenti.

Analisi statistica. Il software IBM SPSS Statistic Data Editor (versione 25) verrà utilizzato per l'analisi statistica di questa prova, mentre i grafici verranno realizzati utilizzando GraphPad Prism versione 7.

Le statistiche descrittive dei dati continui di base saranno espresse in forma di media ± errore standard della media (SEM). I dati nominali saranno espressi in percentuale. L'assunzione parametrica sarà verificata utilizzando i test di Shapiro-Wilk a un livello significativo p<0.05. Le differenze tra le caratteristiche di base nel CLA e nel gruppo placebo saranno effettuate utilizzando un t-test indipendente nei dati parametrici o Mann Whitney U per i dati non parametrici, a un livello significativo P<0,05.

Il test degli effetti del CLA rispetto al placebo e l'interazione con i tempi (basale, 6 settimane e 12 settimane) verranno eseguiti utilizzando l'analisi della varianza a misure ripetute del modello misto (ANOVA) a un livello significativo p<0,05. L'analisi successiva utilizzerà il test post hoc di Tukey con la correzione di Bonferroni per tutti i parametri misurati.

Verrà eseguito un test t accoppiato o un test di Wilcoxon per rilevare la differenza all'interno dei partecipanti in diversi punti temporali nei dati parametrici e non parametrici, rispettivamente, a un livello significativo P <0,05. Verrà utilizzato il t-test indipendente o Mann Whitney U per rilevare la differenza tra il gruppo CLA e il placebo attraverso i diversi punti temporali per dati distribuiti normalmente e non normalmente, rispettivamente a un livello significativo P <0,05.

La differenza nella variazione alla settimana 6 rispetto al basale (∆ 6 settimane) e alla settimana 12 rispetto al basale (∆ 12 settimane), nei gruppi CLA rispetto al placebo sarà verificata utilizzando il test t in caso di dati normalmente distribuiti o Mann Whitney-U per dati non parametrici a livello significativo P<0,05. La differenza tra i dati categorici sarà effettuata utilizzando il test Chi-quadrato a un livello significativo p<0.05.

Ipotesi di obesità

H1: c'è una significativa riduzione del BMI nel gruppo integrato con CLA rispetto al gruppo placebo.

H0: non vi è alcuna riduzione significativa del BMI nel gruppo integrato con CLA rispetto al gruppo placebo.

H2: c'è una significativa riduzione del peso corporeo nel gruppo integrato con CLA rispetto al gruppo placebo.

H0: non vi è alcuna riduzione significativa del peso corporeo nel gruppo integrato con CLA rispetto al gruppo placebo.

H3: C'è una significativa riduzione della WHR nel gruppo integrato con CLA rispetto al gruppo placebo.

H0: non vi è alcuna riduzione significativa della WHR nel gruppo integrato con CLA rispetto al gruppo placebo.

H5: C'è un aumento significativo della massa magra nel gruppo integrato con CLA rispetto al gruppo placebo.

H0: non vi è alcun aumento significativo della massa magra nel gruppo integrato con CLA rispetto al gruppo placebo.

H6: C'è un aumento significativo della %LBM nel gruppo integrato con CLA rispetto al gruppo placebo.

H0: non vi è alcun aumento significativo della %LBM nel gruppo integrato con CLA rispetto al gruppo placebo.

H8: C'è una significativa riduzione del TBF nel gruppo integrato con CLA rispetto al gruppo placebo.

H0: non vi è alcuna riduzione significativa del TBF nel gruppo integrato con CLA rispetto al gruppo placebo.

H9: C'è una significativa riduzione della %BF nel gruppo integrato con CLA rispetto al gruppo placebo.

H0: non vi è alcuna riduzione significativa della %BF nel gruppo integrato con CLA rispetto al gruppo placebo.

H10: C'è un aumento significativo del metabolismo basale nel gruppo integrato con CLA rispetto al gruppo placebo.

H0: non vi è alcun aumento significativo del metabolismo basale nel gruppo integrato con CLA rispetto al gruppo placebo.

Ipotesi sulla funzionalità polmonare Ipotesi primaria H1: c'è un aumento significativo della %PEF prevista nel gruppo integrato con CLA rispetto al gruppo placebo.

H0: non vi è alcun aumento significativo della %PEF prevista nel gruppo integrato con CLA rispetto al gruppo placebo.

Ipotesi secondarie. H2: C'è un aumento significativo della %FEV1 prevista nel gruppo integrato con CLA rispetto al gruppo placebo.

H0: non vi è alcun aumento significativo della %FEV1 prevista nel gruppo integrato con CLA rispetto al gruppo placebo.

H3: C'è un aumento significativo della %FVC prevista nel gruppo integrato con CLA rispetto al gruppo placebo.

H0: non vi è alcun aumento significativo della %FVC prevista nel gruppo integrato con CLA rispetto al gruppo placebo.

H8: C'è un aumento significativo della %FEV1/FVC prevista nel gruppo integrato con CLA rispetto al gruppo placebo.

H0: non vi è alcun aumento significativo della %FEV1/FVC prevista nel gruppo integrato con CLA rispetto al gruppo placebo.

8.6.3 Ipotesi di Adipokines Ipotesi primaria H1: c'è una significativa riduzione della leptina nel gruppo integrato con CLA rispetto al gruppo placebo.

H0: non vi è alcuna riduzione significativa della leptina nel gruppo integrato con CLA rispetto al gruppo placebo.

Ipotesi secondaria. H2: C'è un aumento significativo dell'adiponectina nel gruppo integrato con CLA rispetto al gruppo placebo.

H0: non vi è alcun aumento significativo dell'adiponectina nel gruppo integrato con CLA rispetto al gruppo placebo.

8.6.4 Ipotesi di infiammazione Ipotesi primaria H1: c'è un cambiamento significativo nell'espressione di HSPA1A sulle PBMC nel gruppo CLA rispetto al gruppo placebo.

H0: non vi è alcun cambiamento significativo nell'espressione di HSPA1A sui PBMC nel gruppo CLA rispetto al gruppo placebo.

Ipotesi secondarie H2: c'è un cambiamento significativo nell'espressione di HSPA1A sui linfociti nel gruppo CLA rispetto al gruppo placebo.

H0: non vi è alcun cambiamento significativo nell'espressione di HSPA1A sui linfociti nel gruppo CLA rispetto al gruppo placebo.

H3: c'è un cambiamento significativo nell'espressione di HSPA1A sui monociti nel gruppo CLA rispetto al gruppo placebo.

H0: non vi è alcun cambiamento significativo nell'espressione di HSPA1A sui monociti nel gruppo CLA rispetto al gruppo placebo.

H4: c'è un cambiamento significativo nell'espressione di HSPB1 su PBMC nel gruppo CLA rispetto al gruppo placebo.

H0: non vi è alcun cambiamento significativo nell'espressione di HSPB1 su PBMC nel gruppo CLA rispetto al gruppo placebo.

H5: c'è un cambiamento significativo nell'espressione di HSPB1 sui linfociti nel gruppo CLA rispetto al gruppo placebo.

H0: non vi è alcun cambiamento significativo nell'espressione di HSPB1 sui linfociti nel gruppo CLA rispetto al gruppo placebo.

H6: c'è un cambiamento significativo nell'espressione di HSPB1 sui monociti nel gruppo CLA rispetto al gruppo placebo.

H0: non vi è alcun cambiamento significativo nell'espressione di HSPB1 sui monociti nel gruppo CLA rispetto al gruppo placebo.

H7: c'è un cambiamento significativo nell'espressione di CD11b sui monociti pro-infiammatori (CD14++CD16+) nel gruppo CLA rispetto al gruppo placebo.

H0: non vi è alcun cambiamento significativo nell'espressione di CD11b sui monociti pro-infiammatori (CD14++CD16+) nel gruppo CLA rispetto al gruppo placebo.

H8: c'è un cambiamento significativo nell'espressione di CD11b sui monociti pro-infiammatori (CD14++CD16+) dopo la stimolazione di 100 ng/ml di LPS per un'ora nel gruppo CLA rispetto al gruppo placebo.

H0: non vi è alcun cambiamento significativo nell'espressione di CD11b sui monociti pro-infiammatori (CD14++CD16+) nel gruppo CLA rispetto al gruppo placebo.

H9: c'è un cambiamento significativo nell'aumento dell'espressione di CD11b sui monociti pro-infiammatori (CD14++CD16+) dopo stimolazione con LPS nel gruppo CLA rispetto al gruppo placebo.

H0: non vi è alcuna differenza significativa H8: vi è un cambiamento significativo nell'aumento dell'espressione di CD11b sui monociti pro-infiammatori (CD14++CD16+) dopo la stimolazione con LPS nel gruppo CLA rispetto al gruppo placebo.

H10: c'è un cambiamento significativo nell'espressione di CD62L sui monociti pro-infiammatori (CD14++CD16+) nel gruppo CLA rispetto al gruppo placebo.

H0: non vi è alcun cambiamento significativo nell'espressione di CD62L CD11b sui monociti pro-infiammatori (CD14++CD16+) nel gruppo CLA rispetto al gruppo placebo.

H11: c'è un cambiamento significativo nell'espressione di CD62L sui monociti pro-infiammatori (CD14++CD16+) dopo la stimolazione di 100 ng/ml di LPS per un'ora nel gruppo CLA rispetto al gruppo placebo.

H0: non vi è alcun cambiamento significativo nell'espressione di CD62L sui monociti pro-infiammatori (CD14++CD16+) nel gruppo CLA rispetto al gruppo placebo.

H12: c'è un cambiamento significativo nella riduzione dell'espressione di CD62L sui monociti pro-infiammatori (CD14++CD16+) dopo stimolazione con LPS nel gruppo CLA rispetto al gruppo placebo.

H0: non vi è alcun cambiamento significativo nella riduzione dell'espressione di CD62L sui monociti pro-infiammatori (CD14++CD16+) dopo stimolazione con LPS nel gruppo CLA rispetto al gruppo placebo.

Ipotesi profilo lipidico H1: c'è un cambiamento significativo nel livello di LDL nel gruppo CLA rispetto al gruppo placebo.

H0: non vi è alcun cambiamento significativo nel livello di LDL nel gruppo CLA rispetto al gruppo placebo.

H2: c'è un cambiamento significativo nel livello di HDL nel gruppo CLA rispetto al gruppo placebo.

H0: non vi è alcun cambiamento significativo nel livello di HDL nel gruppo CLA rispetto al gruppo placebo.

H3: c'è un cambiamento significativo nel livello di TC nel gruppo CLA rispetto al gruppo placebo.

H0: non vi è alcun cambiamento significativo nel livello di TC nel gruppo CLA rispetto al gruppo placebo.

H4: c'è un cambiamento significativo nel livello di TG nel gruppo CLA rispetto al gruppo placebo.

H0: non vi è alcun cambiamento significativo nel livello di TG nel gruppo CLA rispetto al gruppo placebo.